（６Ｓ）－和（６Ｒ）四氢叶酸的制备方法技术

本发明专利技术涉及（６Ｓ）－和（６Ｒ）四氢叶酸及其磺酸加成盐硫酸加成盐的制备方法，其特征在于：使（６Ｒ，Ｓ）－四氢叶酸与磺酸或与硫酸进行反应，将生成的酸架成盐进行分步结晶，如果需要，可用碱处理，使（６Ｒ）－四氢叶酸从产生的非对映酸加成盐中释出并加以分离。本发明专利技术还涉及（６Ｓ）－和（６Ｒ）－四氢叶酸与磺酸或与硫酸生成的新颖的酸加成盐，涉及把它们用作药物或制备药物的原料和涉及把它们用来制备旋光的５－甲基－，５－甲酰－和５，１０－亚甲基－四氢叶酸及其与强碱及与强酸的加成盐。（*该技术在2012年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及制备N-〔4-〔〔(2-氨基-1，4，5，6，7，8-六氢-4-氧代-(6S)-蝶啶基)-甲基〕氨基〕苯甲酰基〕-L-谷氨酸(以下称为(6S)-四氢叶酸)及其盐和制备N-〔4-〔〔(2-氨基-1，4，5，6，7，8-六氢化-4-氧代-(6R)-蝶啶基)-甲基〕苯甲酰基〕-L-谷氨酸(以下称(6R)-四氢叶酸)及其盐的方法。四氢叶酸衍生物含有2个不对称中心。在此情况下，由于由叶酸、N-(蝶酰)-L-谷氨酸合成这些衍生物，在谷氨酸基中含有的旋光碳原子以L形式存在，而通过在蝶酰基的5，6位置上的双键的氢化反应而形成的在6位置上的旋光碳原子是以外消旋的(6R，S)形式存在，因此，四氢叶酸的合成衍生物由两种非对映体的1∶1的混合物组成。在自然界，例如在肝脏中，只发现一种非对映型的四氢叶酸盐，即(6S)型的5，6，7，8-四氢叶酸盐。四氢叶酸盐，如5-甲酰基-5，6，7，8-四氢叶酸(甲酰四氢叶酸)的钙盐或5-甲基-5，6，7，8-四氢叶酸的钙盐，作为药物，主要用来治疗巨红细胞叶酸贫血症，作为解毒药主要用来提高叶酸拮抗物的耐药力，特别是癌的治疗(甲酰四氢叶酸抢救法)中的氨基蝶呤和氨甲蝶呤的耐药力，用来提高5-氟尿嘧啶的治疗效果和用来治疗自身免疫疾病，例如治疗银屑病和类风湿性关节炎，以及用来提高化疗中的某些杀寄生虫药的耐受性，例如三甲氧苄二氨嘧啶-磺胺甲噁唑的耐受性。四氢叶酸是用来制备各种各样四氢叶酸衍生物的基本物质。制备(6S)-或(6R)四氢叶酸的努力，迄今已得出以下方法-酶催化法-物理化学法-化学法酶催化法包括化学上正常进行的还原法，由叶酸还原成7，8-二氢叶酸，随后例如按照L.Rees在Tetrahedron 42(1)，117-36(1986)中所述的方法或按EP-A2-0，356，934的方法进行酶催化还原，由此生成(6S)-5，6，7，8-四氢叶酸。但是，在反应步骤上使这些方法只能停止在7，8-二氢叶酸阶段是困难的，因此在酶催化阶段只有很少的时-空产率，而且需要象还原了的烟酰胺腺嘌呤磷酸二核甙(NADPH)之类的昂贵辅助成分和需要一种建立起来的通常是复杂工作方法。迄今所知的用酶催化制备旋光纯的四氢叶酸的方法不适合于工业规模的制备。有人也试图借助于色谱法分离非对映体对。(见J.Feeney等，Biochemistry，20，1837，(1981)。这些方法不适于在工业规模上制备这些非对映体。从这类物理化学方法中也知道叶酸在手性电极上的一种非对称还原(见S.Kwee et al.，Bioelectrochem.Bioenerg.7，693-698，(1980))。由于还原反应中所允许的叶酸浓度(通常是10-3M)还原反应发生后只能困难地实现除去非对称的诱导物，这些还原反应，不管怎样，也不能用于工业化生产。在化学合成领域，在旋光性催化剂存在下，就存在叶酸的非对称加氢的可能性，例如根据P.H.Boyle等在J.Chem.Soc.Chem.Commun.(1974)，10，375-6中的方法。但是这需要使用很昂贵的催化剂。这些催化剂在发生均匀催化作用后，只能在损耗大量产品的情况下被分离出来。因此至今还没有在工业上可以利用的，用于获得旋光纯的四氢叶酸的方法。因此，本专利技术的目的是要研究出一种简单的在工业上可用的并且经济的制备旋光纯的四氢叶酸的方法。现意外地发现，在加入磺酸或硫酸后，可从(6R，S)-四氢叶酸或其盐的水溶液中沉淀出相应的旋光的四氢叶酸加成盐，这可通过过滤得到，非对映体加成盐可从滤液中分离出来。然后通过重结晶和/或析出四氢叶酸，接着使其转化成盐的方法对这两种盐进行化学和光学提纯。更令人意外的是，通过其它盐例如盐酸加成盐的制备/重结晶没有检测出光学的富集，而在磺酸或硫酸加成盐的结晶时却发生了光学离析(见W.Frick，et al.，Helv.Chim.Acta，57，2658-61(1974)。甚至用其它一些强酸例如氢溴酸、氢碘酸、硝酸、磷酸、甲酸、草酸、一氯-，二氯-和三氯乙酸，也没能得到四氢叶酸的一种差向异构体的增浓。本专利技术涉及制备(6S)-和(6R)-四氢叶酸及它们的磺酸或硫酸加成盐的方法，其特征是使(6R，S)-四氢叶酸与磺酸或硫酸反应，将得到的酸加成盐进行分步结晶，如果需要，可通过用碱处理，使(6S)-和/或(6R)-四氢叶酸从得到的非对映体酸加成盐中释出，并加以分离。这里所用的(6R，S)-四氢叶酸可以是分离出的产物，或者最好是就地直接使用叶酸的还原产物。适于本专利技术方法的磺酸有含有6-14个碳原子的芳族磺酸，含有7-9个碳原子的芳脂族磺酸或含有2-3个碳原子的脂族磺酸。适用的芳族磺酸主要为苯磺酸、甲苯磺酸、二甲苯磺酸、硝基苯磺酸、氯苯磺酸、硝基甲苯磺酸、萘磺酸、取代的萘磺酸、萘二磺酸、樟脑磺酸、苯并咪唑磺酸、取代的苯并咪唑磺酸(例如2-苯基苯并咪唑-5-磺酸)以及许多其它芳族磺酸化合物。适合的芳脂族磺酸主要是甲苯磺酸，适合的脂族磺酸主要为甲磺酸和乙磺酸。本专利技术方法优先选用的加成盐是苯磺酸加成盐、甲苯磺酸加成盐和硫酸加成盐。结晶过程在极性介质中进行。适合的介质特别是水或水和较低级的水溶性脂族羧酸的混合物，特别是乙酸和乳酸或液态水溶性酰胺如甲酰胺，N，N-二甲基甲酰胺，N，N-二甲基乙酰胺，1-甲基吡咯烷酮、2-哌啶酮。混合物通常含有至少50%的水。使用这种混合物通常会提高产品的旋光纯度，但会降低收率。最佳反应条件取决于所希望达到的目的和特殊的原料，是可通过系统试验毫无困难地确定的。由于四氢叶酸对氧化物用的敏感性，建议使用氧化抑制剂，如2-巯基乙醇。在结晶过程中，通常是(6S)-四氢叶酸的加成盐首先沉淀出来，非对映的(6R)-化合物富集于滤液中。旋光富集的四氢叶酸可以很容易通过加碱，从盐中再析出来。提出化学和光学纯化的又一可能性是用(6S)-或(6R)-四氢叶酸及其与强碱强酸生成的盐变得很容易接受而且特别经济。本专利技术也涉及(6S)-或(6R)-四氢叶酸及其与磺酸或与硫酸生成的加成盐的用途。这些四氢叶酸及其加成盐是按照旋光纯的5，10-亚甲基四氢叶酸及其与强碱或强酸生成的盐的制备方法，通过用甲醛处理获得的。这里要考虑是由(6S)-四氢叶酸与甲醛反应获得5，10-亚甲基-(6R)-四氢叶酸和用类似方法由(6R)-四氢叶酸获得5，10-亚甲基-(6S)-四氢叶酸。下面是说明具体实施例方式以下HPLC方法(高效液相色谱法)用来测定四氢叶酸的纯度及5-甲酰-，5-甲基-及5，10-亚甲基四氢叶酸的纯度。洗脱液A 0.03M Na2HPO4+0.03M KH2PO4水溶液洗脱液B 1份(0.03M Na2HPO4+0.03M KH2PO4水溶液)3份甲醇然后用H3PO4调节至pH7.8梯度25分钟内洗脱液B由2%到95%柱ODS(Hypersil)检测器UV-300nm以下HPLC方法用来测定(6S)-含量衍生作用将四氢叶酸或加成盐溶于1∶1的乙腈/水中，与2，3，4，6-四-O-乙酰(基)-β-D-吡喃葡萄糖基异硫氰酸盐反应。洗脱液2.5份乙腈1.5份甲醇6.0份0.02M的柠檬酸柱RP-8(Lichrosphere)检测器UV-270nm实施例1在60℃和氨气保护下，本文档来自技高网...

【技术保护点】
（６Ｓ）－和（６Ｒ）－四氢叶酸及其磺酸加成盐或硫酸加成盐的制备方法，其特征在于：使（６Ｒ，Ｓ）－四氢叶酸与磺酸或硫酸反应，将生成的酸加成盐进行分步结晶，如有必要，可用碱处理使（６Ｓ）－和／或（６Ｒ）－四氢叶酸从非对映酸的加成盐中释出并加以分离。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：HR米勒，M厄尔曼，J康狄，G默德尔，
申请(专利权)人：埃普罗瓦股份公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]