一种利用GC-MS法检测二叔丁基氯甲基磷酸酯残留量的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用GC

【技术实现步骤摘要】
一种利用GC
‑
MS法检测二叔丁基氯甲基磷酸酯残留量的方法


[0001]本专利技术属于生物医药领域，涉及一种基因毒性杂质的检测方法，具体涉及是一种利用GC
‑
MS法检测二叔丁基氯甲基磷酸酯残留量的方法。

技术介绍

[0002]二叔丁基氯甲基磷酸酯，英文通用名称为Phosphoricacidi
‑
T
‑
Butylexterchloromethylester，相对分子质量为258.68，化学分子式为C9H
20
ClO4P，沸点为272.9℃。二叔丁基氯甲基磷酸酯含氯代烷烃化合物，具有警示结构，属于潜在的基因毒性杂质。
[0003]基因毒性杂质是直接或间接损害DNA、引起基因突变或致癌的一类物质；对DNA的损害作用包括染色体断裂、DNA重组及复制过程中共价键的插入和修饰，也包括在细胞水平上产生基因毒性物质而产生的突变。因其严重威胁人类身体健康，已被广泛关注及严格控制，目前欧洲EMA、美国FDA、ICH M7和中华人民共和国药典（四部）均出台了基因毒性杂质研究的相关指导原则。指导原则中规定基因毒性杂质的毒理学关注阈值（TTC）为1.5μg/天，根据制剂的一般日最大使用剂量推算，基因毒性杂质控制限度均为ppm级（1ppm=1000ng/ml），若要严格控制药物中基因毒性杂质的残留量，急需建立一种灵敏度高的检测方法。
[0004]目前，国内外二叔丁基氯甲基磷酸酯的主要检测方法是核磁共振波谱法，核磁共振波谱法分析成本高，日常维护费用贵，不适合低限度杂质的常规检测。另外二叔丁基氯甲基磷酸酯沸点较高，采用常规气相色谱仪检测时灵敏度达不到要求，因此建立一种灵敏度高、准确度好且用于二叔丁基氯甲基磷酸酯痕量检测的方法极为重要。

技术实现思路

[0005]本专利技术所要解决的技术问题是，针对上述现有技术的不足，提供一种利用GC
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MS法检测二叔丁基氯甲基磷酸酯残留量的方法。该方法具有专属性好、检测灵敏度高、准确度好、实用性强等优点，能快速准确地控制有机药物中二叔丁基氯甲基磷酸酯的残留量。为实现上述目的，具体技术方案如下：
[0006]一种利用GC
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MS法检测二叔丁基氯甲基磷酸酯残留量的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.样品溶液配制：对照品溶液：取二叔丁基氯甲基磷酸酯对照品适量，精密称定，用乙腈溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，作为储备液；精密量取储备液用稀释剂定量稀释制成每1ml中约含200ng/ml的溶液，作为对照品溶液;供试品溶液：取药物A或药物B适量，精密称定，用稀释剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含10mg的溶液，作为供试品溶液;S2.采用气相色谱
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质谱联用法对样品溶液进行检测;其中气相色谱条件如下：以高性能聚乙二醇为固定液的毛细管柱；进样口温度220
℃，程序升温：初始温度为60℃，保持3min，以30℃/min的速率升温至220℃，保持2min；分流比20:1；顶空进样；其中质谱条件如下：监测模式：离子监测；四极杆温度150℃，离子源温度230℃，质谱传输线温度280℃；因二叔丁基氯甲基磷酸酯的水解产物为叔丁醇，故监测定量离子m/z 59。
[0007]进一步的：步骤S1中，所述药物A、药物B的结构式如下：, 药物A；，药物B。
[0008]进一步的，步骤S1中，所述稀释剂为水、0.1mol/L氢氧化钠溶液、0.1mol/L氢氧化钾溶液中的一种。
[0009]进一步的，步骤S2中，所述毛细管柱规格为30m
×
0.25mm
×
1.0μm。
[0010]进一步的，步骤S2中，所述毛细管柱为安捷伦毛细管柱VF
‑
WAX MS。
[0011]进一步的，步骤S2中，所述顶空进样：顶空平衡时间为15分钟，平衡温度为90℃。
[0012]与现有技术相比，本专利技术具有的有益效果如下：
①
本方法专属性良好，稀释剂、药物A或药物B均不干扰二叔丁基氯甲基磷酸酯的检测；
②
本方法检测灵敏度高，二叔丁基氯甲基磷酸酯检测限浓度为20ng/ml，定量限浓度为40ng/ml，能够满足基因毒性杂质的痕量检测要求；
③
本方法实用性强，运行时间为10min即可完成二叔丁基氯甲基磷酸酯的定量检测，且检测过程简便快捷，在药品生产和质量控制方面具有重要的现实意义。
附图说明：
[0013]图1是实施例1中0.1mol/L氢氧化钠溶液的质谱图；图2是实施例1中二叔丁基氯甲基磷酸酯对照品溶液的质谱图；图3是实施例1中供试品溶液的质谱图。
[0014]图4是实施例1中二叔丁基氯甲基磷酸酯的标准曲线图。
具体实施方式：
[0015]以下通过实施例形式对本专利技术涉及的一种利用GC
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MS法检测二叔丁基氯甲基磷酸
酯残留量的方法，作进一步的详细说明，但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
[0016]实施例所用仪器和色谱柱。
[0017]气相色谱
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质谱联用仪（Agilent 7697A
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7890
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5977B，安捷伦科技有限公司，美国），配有电子轰击电离离子源（EI）。
[0018]毛细管柱为Agilent VF
‑
WAX MS（30m
×
0.25mm
×
1.0μm）。
[0019]二叔丁基氯甲基磷酸酯对照品（纯度为95%）。
[0020]实施例1 药物A中二叔丁基氯甲基磷酸酯残留量的检测。
[0021]1.对照品溶液：取二叔丁基氯甲基磷酸酯对照品5mg，精密称定，置5ml量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，作为浓度为1mg/ml的储备液
①
；精密量取储备液
①ꢀ
0.2ml，置10ml量瓶中，加0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，作为浓度为20μg/ml的储备液
②
；精密量取储备液
②ꢀ
1ml，置10ml量瓶中，加0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，作为浓度为2μg/ml的储备液
③
；精密量取储备液
③ꢀ
1ml，置10ml量瓶中，加0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，作为浓度为200ng/ml的对照品溶液。
[0022]2.供试品溶液：取药物A约100mg，精密称定，置10ml量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，即得浓度为10mg/ml的供试品溶液。
[0023]3.采用气相色谱
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质谱联用法对上述配制的溶液进样分析，气相色谱条件设定为：毛细管柱为安捷伦毛细管柱Agilent VF
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用GC
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MS法检测二叔丁基氯甲基磷酸酯残留量的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.样品溶液配制：对照品溶液：取二叔丁基氯甲基磷酸酯对照品适量，精密称定，用乙腈溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，作为储备液；精密量取储备液用稀释剂定量稀释制成每1ml中约含200ng/ml的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液：取药物A或药物B适量，精密称定，用稀释剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含10mg的溶液，作为供试品溶液；S2.采用气相色谱
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质谱联用法对样品溶液进行检测：其中气相色谱条件如下：以高性能聚乙二醇为固定液的毛细管柱；进样口温度220℃，程序升温：初始温度为60℃，保持3min，以30℃/min的速率升温至220℃，保持2min；分流比20:1；顶空进样；其中质谱条件如下：监测模式：离子监测；四极杆温度150℃，离子源温度230℃，质谱传输线温度280℃；因二叔丁基氯甲基磷酸酯的水解产物为叔丁醇，故监测定量离子m/z59。2.根据权利要求1所述的一种利用GC
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MS法检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵庆雅，黄畅，陈旭，
申请(专利权)人：天津辰欣药物研究有限公司，
类型：发明
国别省市：