一种可食用冻干椰肉支架在促进脂肪间充质细胞成脂分化方法技术

本发明专利技术公开了一种可食用冻干椰肉支架在促进脂肪间充质细胞成脂分化方法，包括以下步骤：选用新鲜的椰肉，对其进行修整，将椰肉进行切片，切片后的椰肉粉碎，直径大小约为1

【技术实现步骤摘要】
一种可食用冻干椰肉支架在促进脂肪间充质细胞成脂分化方法


[0001]本专利技术涉及未来食品科技领域，特别涉及一种可食用冻干椰肉支架在促进脂肪间充质细胞成脂分化方法。

技术介绍

[0002]培养肉又称细胞培养肉、培育肉，是一种利用组织工程技术生产的肉，细胞培养肉在颜色、营养价值、风味、纹理和咀嚼性与传统肉类高度相似，目前细胞培养肉面临主要挑战在于如何有效模拟动物肌肉组织的生长环境，并在生物反应器中实现规模化生产。虽然动物细胞组织培养技术已经得到了不同程度的深入研究及成功应用，但现有的细胞组织培养仍存在高成本、高技术要求、非食源等缺点。为有效降低生产成本达到工业化应用的目的而发展高效、安全的大型细胞培养技术是细胞培养肉生产急需解决的问题。其中细胞培养肉的支架系统是当前细胞培养肉研究中的一项关键技术。细胞培养支架所起的作用主要有支持细胞生长、辅助细胞形成组织纹理、维持肌肉组织三维结构等。目前被用作细胞培养肉的支架大多为非食源，再或者是以明胶为动物源的材料制备而成，且加工过程过于复杂，还可能引入一些非食源物质，这样有悖细胞培养肉初衷。因此，急需探寻更多非动物源的可再生支架来作为细胞培养肉的载体。

技术实现思路

[0003]本专利技术要解决的技术问题是克服现有技术的缺陷，提供一种可食用冻干椰肉支架在促进脂肪间充质细胞成脂分化方法。
[0004]为了解决上述技术问题，本专利技术提供了如下的技术方案：
[0005]本专利技术一种可食用冻干椰肉支架在促进脂肪间充质细胞成脂分化方法，主要包括以下步骤：<br/>[0006]1)选用新鲜的椰肉，对其进行修整，将椰肉进行切片，切片后的椰肉粉碎，直径大小约为1
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1.5mm，椰肉进行4次过滤清洗，在
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80℃预冻2小时，在
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60℃条件下真空冷冻干燥24小时进行真空冷冻干燥，得到的冻干椰肉支架结合细胞进行培养；
[0007]2)将牛脂肪间充质细胞进行复苏，离心后用H
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DMEM培养基重悬，该培养基含5％的FBS、1％的两性霉素、5ng/ml的FGF；
[0008]3)取一定量的冻干椰肉支架于24孔超低吸附培养板中，使其铺满板底；取含有5W细胞的悬液加到冻干椰肉支架上，使其完全浸上细胞悬液，置于37℃、5％的CO2培养箱孵育5小时；每孔加入1.5mL培养基，持续观察细胞在载体上生长情况，细胞培养条件为37℃、5％的CO2培养箱，每隔48小时进行换液；
[0009]4)牛脂肪间充质细胞结合冻干椰果支架培养7天，对细胞进行收获，通过Calcein AM细胞活性检测试剂盒进行细胞荧光检测，通过AO/PI染色计数，细胞的增殖倍数为4.52倍，通过油红o进行染色，可控的细胞成脂分化比例达18％。
[0010]与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：
[0011]本专利技术该构成简单，且容易制备，有着良好的生物相容性，椰肉本身含有丰富的脂肪酸和维生素，对脂肪间充质细胞成脂分化有促进作用，通过简单的加工处理即可结合细胞进行培养，为细胞在体外三维培养提供支撑，属于未来食品科技领域，本专利技术以天然椰肉为主要原料，通过简单处理，来制备冻干椰肉支架，实验发现该支架不但支持细胞贴附扩增，还能促进脂肪间充质细胞成脂分化。
附图说明
[0012]附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制。在附图中：
[0013]附图1为实施例1制备的冻干椰果支架；
[0014]附图2为冻干椰果支架结合牛脂肪间充质细胞培养7天的显微荧光图；
[0015]附图3为冻干椰果支架结合牛脂肪间充质细胞培养7天的成脂分化油红O染色图。
具体实施方式
[0016]以下结合附图对本专利技术的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0017]实施例1
[0018]如图1
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3所示，本专利技术提供一种可食用冻干椰肉支架在促进脂肪间充质细胞成脂分化方法，主要包括以下步骤：
[0019]1)选用新鲜的椰肉，对其进行修整，将椰肉进行切片，切片后的椰肉粉碎，直径大小约为1
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1.5mm，椰肉进行4次过滤清洗，在
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80℃预冻2小时，在
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60℃条件下真空冷冻干燥24小时进行真空冷冻干燥，得到的冻干椰肉支架结合细胞进行培养；
[0020]2)将牛脂肪间充质细胞进行复苏，离心后用H
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DMEM培养基重悬，该培养基含5％的FBS、1％的两性霉素、5ng/ml的FGF；
[0021]3)取一定量的冻干椰肉支架于24孔超低吸附培养板中，使其铺满板底；取含有5W细胞的悬液加到冻干椰肉支架上，使其完全浸上细胞悬液，置于37℃、5％的CO2培养箱孵育5小时；每孔加入1.5mL培养基，持续观察细胞在载体上生长情况，细胞培养条件为37℃、5％的CO2培养箱，每隔48小时进行换液；
[0022]4)牛脂肪间充质细胞结合冻干椰果支架培养7天，对细胞进行收获，通过Calcein AM细胞活性检测试剂盒进行细胞荧光检测，通过AO/PI染色计数，细胞的增殖倍数为4.52倍，通过油红o进行染色，可控的细胞成脂分化比例达18％。
[0023]最后应说明的是：以上所述仅为本专利技术的优选实施例而已，并不用于限制本专利技术，尽管参照前述实施例对本专利技术进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本专利技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种可食用冻干椰肉支架在促进脂肪间充质细胞成脂分化方法，主要包括以下步骤：1)选用新鲜的椰肉，对其进行修整，将椰肉进行切片，切片后的椰肉粉碎，直径大小约为1
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1.5mm，椰肉进行4次过滤清洗，在
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80℃预冻2小时，在
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60℃条件下真空冷冻干燥24小时进行真空冷冻干燥，得到的冻干椰肉支架结合细胞进行培养；2)将牛脂肪间充质细胞进行复苏，离心后用H
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DMEM培养基重悬，该培养基含5％的FBS、1％的两性霉素、5ng/ml的...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹灵，曹哲厚，
申请(专利权)人：杭州极麋生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：