化合物APO-9制造技术

本发明专利技术属于药物研发技术领域，具体涉及化合物APO

【技术实现步骤摘要】
化合物APO
‑9′
在制备用于治疗脑缺血再灌注损伤的药物的应用


[0001]本专利技术属于药物研发
，具体涉及化合物APO
‑9′
在制备用于治疗脑缺血再灌注损伤的药物的应用。

技术介绍

[0002]脑卒中是一种急性脑血管疾病，已成为全球第二大常见死因和第三大致残原因。调查显示，我国脑卒中死亡率已上升至149/10万，居所有病因中第一位。据其发病机制可分为缺血性脑卒中和出血性脑卒中，其中缺血性脑卒中占脑卒中总病例数的80%。《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018》指出，目前缺血性脑卒中最有效的治疗方法仍是血管再通治疗。然而，血管再通后导致的再灌注却可能加重组织和器官的功能障碍及结构损伤，即脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia
‑
reperfusion injury, CIRI）。CIRI以其高发病率、高死亡率、高致残率的特点成为全世界严重威胁人类健康的主要疾病之一，降低CIRI后的神经损伤已经成为一个亟待解决的关键问题。
[0003]化合物Apo
‑9′‑
fucoxanthinone（APO
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）是从网地藻、马尾藻等海洋褐藻中分离得到，目前已有研究发现其具有抗炎、抗氧化、促进毛发生长等作用，同时毒副作用小，具有开发前景。但是，APO
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的抗CIRI作用，未曾有人报道，其治疗潜力尚不清楚。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是为了克服现有技术存在的缺点和不足，而提供一种化合物APO
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在制备用于治疗脑缺血再灌注损伤的药物的应用。
[0005]所述化合物APO
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的化学式如下所示:。
[0006]本专利技术发现APO
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在一定的剂量范围内能够抑制神经炎症，降低神经细胞凋亡促进神经细胞再生。减少大鼠的脑梗死面积。因此APO
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在CIRI的治疗中具有良好效果。
附图说明
[0007]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，根据这些附图获得其他的附图仍属于本专利技术的范畴。
[0008]图1：OGD/R诱导SH
‑
SY5Y细胞中APO
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对细胞的保护作用；（A）APO
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在SH
‑
SY5Y细
胞上的活力情况。SH
‑
SY5Y细胞铺96孔板，24h后APO
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以不同浓度（3
ꢀ‑
50μM）在细胞上作用24h，用MTT法检测细胞活力。（B）APO
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可以抑制OGD/R对SH
‑
SY5Y细胞的损伤。APO
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（2.5、5、10μM）预保护24h，氧糖剥夺6h，复氧24h，用MTT法检测细胞活力。数据表示平均值
±
SD，n≥3，
###
P＜0.001，
##
P＜0.01，
#
P＜0.05，
***
P＜0.001，
**
P＜0.01，
*
P＜0.05。
具体实施方式
[0009]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本专利技术作进一步地详细描述。
[0010]实施例: APO
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逆转OGD/R诱导的SH
‑
SY5Y细胞损伤本实施例采用的APO
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为从网地藻、马尾藻等海洋褐藻中分离得到，通过核磁鉴定其化学式如下所示：。
[0011]（1）SH
‑
SY5Y细胞培养该细胞使用DMEM/F12完全培养基培养于75cm
²
细胞培养瓶，传代时弃去旧培养基，加入4mLPBS清洗，再加入2mL胰酶置于培养箱中消化1min，加入4mL培养基终止消化，吹打后取细胞液离心，新鲜培养基重悬后按1：5接种于含15mL培养基的培养瓶中培养。其他操作同1.1.5。
[0012]（2）细胞缺氧模型的制备采用经典的物理性缺氧法建立SH
‑
SY5Y细胞的氧糖剥夺/复氧（OGD/R）模型。生长状态良好的SH
‑
SY5Y细胞接种于细胞培养板中，细胞汇合至80%时，吸走细胞培养液，用PBS小心清洗细胞，加入无糖DMEM基础培养基，放入置于37
°
C恒温培养箱内的缺氧小室中，密封后通入含95%N2、5%CO2的混合气体排气15min，即开始正式缺血缺氧培养。计时结束后，小心吸取上清，用PBS轻柔地清洗一遍，加入正常含10%FBS的DMEM/F12完全培养基，放入37
°
C5%CO2培养箱中复氧24h，模拟体外脑缺血再灌注时细胞缺血缺氧/复氧的状态。
[0013]（3）细胞模型分组将SH
‑
SY5Y细胞分为五组：a)空白对照组：预处理其他组时该组更换一次DMEM/F12完全培养基。
[0014]b) OGD/R组：按照上述缺氧模型制备。
[0015]c)APO
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（2.5μM）干预组：加入完全培养基稀释的终浓度为5μM的APO
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溶液，培养箱中培养24h。
[0016]d) APO
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（5μM）干预组：加入完全培养基稀释的终浓度为5μM的APO
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溶液，培养箱中培养24h。
[0017]e)APO
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（10μM）干预组：加入终浓度为10μM的APO
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溶液，培养箱中培养24h。
[0018]（4）MTT实验检测细胞活力将细胞接种于96孔板中，每孔1万个细胞，周围用PBS填充一圈。待细胞汇合至80%
时，按上述分组对细胞进行预处理，加入LPS后于培养箱中培养24h。用完全培养基按1:9比例稀释MTT工作液得混合液；将细胞上清液取出后，每孔加入100μL混合液，于培养箱中孵育3h。小心去除孔内液体，每孔中加入150μL DMSO振摇5min，用酶标仪在490nm波长处检测OD值。
[0019]如图1所示：采用MTT法检测APO
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对SH
‑
SY5Y细胞的活力影响，用最高浓度为50μM的APO
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在SH
‑
SY5Y细胞上作用24h，结果表明，APO
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在50μM浓度下的细胞存活率与空白对照组相比无差异，即APO
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在50μM浓度以下对SH
‑
SY5Y细胞均无毒性作用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.化合物APO
‑9′
在制备用于治疗脑缺血再灌注损伤的药物的...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐钰，严鹏程，赵敏，朱昊如，唐淑华，祝昊云，张静文，
申请(专利权)人：温州医科大学，
类型：发明
国别省市：