抗PD-1抗体制造技术

本发明专利技术提供一种对于大鼠以外的动物也能够反复施用的抗PD

【技术实现步骤摘要】
抗PD
‑
1抗体
[0001]本申请是申请日为2017年8月10日、申请号为201780050367.6、专利技术名称为“抗PD
‑
1抗体”的专利技术专利申请的分案申请。


[0002]本专利技术涉及一种抗PD
‑
1抗体，更具体而言，涉及具有包含大鼠抗牛PD
‑
1抗体的互补链决定区(CDR)的可变区和大鼠以外的动物的抗体的恒定区的抗PD
‑
1抗体。

技术介绍

[0003]免疫抑制受体Programmed death 1(PD
‑
1)和作为其配体的Programmed death ligand 1(PD
‑
L1)是由京都大学本庶佑等人鉴定为抑制过度的免疫响应、与免疫耐受密切相关的因子的分子(非专利文献1：Ishida Y，Agata Y，Shibahara K，Honjo T The EMBO J.，11(11)：3887
‑
3895；Nov.1992.)。近年来已表明还参与肿瘤中的免疫抑制，在人类医疗中，开发出阻碍PD
‑
1的作用的抗体药并得到实用化(小野药品工业株式会社“OPDIVO(注册商标)”)。
[0004]此前，本专利技术人等进行了针对动物难治性疾病的以PD
‑
1或PD
‑
L1为标靶的免疫细胞疗法的开发，阐明该新型免疫细胞疗法可以横跨疾病并且横跨动物地应用(非专利文献2：Ikebuchi R，Konnai S，Shirai T，Sunden Y，Murata S，Onuma M，Ohashi K.Vet.Res.，42：103；Sep.26，2011.、非专利文献3：Ikebuchi R，Konnai S，Okagawa T，Yokoyama K，Nakajima C，Suzuki Y，Murata S，Ohashi K.Vet.Res.，44：59；Jul.22，2013.、非专利文献4：Ikebuchi R，Konnai S，Okagawa T，Yokoyama K，Nakajima C，Suzuki Y，Murata S，Ohashi K.Immunology.142(4)：551
‑
61；Aug.2014.、非专利文献5：Maekawa N，Konnai S，Ikebuchi R，Okagawa T，Adachi M，Takagi S，Kagawa Y，Nakajima C，Suzuki Y，Murata S，Ohashi K.PLoS One.，9(6)：e98415；Jun.10，2014.、非专利文献6：Mingala CN，Konnai S，Ikebuchi R，Ohashi K.Comp.Immunol.Microbiol.Infect.Dis.，34(1)：55
‑
63；Jan.2011.)。
[0005]但是，由于本专利技术人等此前所制作的抗体为大鼠抗体，因此无法对大鼠以外的动物反复施用。
[0006]现有技术文献
[0007]非专利文献
[0008]非专利文献1：Ishida Y，Agata Y，Shibahara K，HonjoT.The EMBO Journal.11(11)：3887
‑
3895；Nov.1992.
[0009]非专利文献2：Ikebuchi R，Konnai S，Shirai T，Sunden Y，Murata S，Onuma M，Ohashi K.Vet.Res.，42：103；Sep.2011.
[0010]非专利文献3：Ikebuchi R，Konnai S，Okagawa T，Yokoyama K，Nakajima C，Suzuki Y，Murata S，Ohashi K.Vet.Res.，44：59；Jul.22，2013.
[0011]非专利文献4：Ikebuchi R，Konnai S，Okagawa T，Yokoyama K，Nakajima C，
Suzuki Y，Murata S，Ohashi K.Immunology，142(4)：551
‑
61；Aug.2014.
[0012]非专利文献5：Maekawa N，Konnai S，Ikebuchi R，Okagawa T，Adachi M，Takagi S，Kagawa Y，Nakajima C，Suzuki Y，Murata S，Ohashi K.PLoS One，9(6)：e98415；Jun.10，2014.
[0013]非专利文献6：Mingala CN，Konnai S，Ikebuchi R，Ohashi K.Comp.Immunol.Microbiol.Infect.Dis.，34(1)：55
‑
63；Jan.2011.

技术实现思路

[0014]专利技术所要解决的问题
[0015]本专利技术的目的在于，提供一种对于大鼠以外的动物也能够反复施用的抗PD
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1抗体。
[0016]用于解决问题的方法
[0017]本专利技术人等确定了能够阻碍牛PD
‑
1与PD
‑
L1的结合的大鼠抗牛PD
‑
1单克隆抗体(5D2)的可变区，并将该可变区基因与牛免疫球蛋白(牛IgG1，其中为了抑制ADCC活性而对CH2结构域的Fcγ受体预想结合部位施加了突变(参照图1、图11。氨基酸序号及突变：251E
→
P，252L
→
V，253P
→
A，254G
→
缺失，348A
→
S，349P
→
S；Ikebuchi R，Konnai S，Okagawa T，Yokoyama K，Nakajima C，Suzuki Y，Murata S，Ohashi K.Immunology 2014Aug；142(4)：551
‑
561.)。)的恒定区基因组合而得到嵌合抗体基因，培养增殖导入了所得的嵌合抗体基因的中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell：CHO细胞)，由此成功地制作出大鼠
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牛嵌合抗牛PD
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1抗体。此外，确定了大鼠抗牛PD
‑
1单克隆抗体(5D2)的可变区的CDR。本专利技术是根据这些见解而完成的专利技术。
[0018]本专利技术的主旨如下所示。
[0019](1)一种抗PD
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1抗体，其包含(a)L链和(b)H链，所述L链具有包含具有QSLEYSDGYTY(序列号16)的氨基酸序列的CDR1、具有GVS的氨基酸序列的CDR2及具有FQATHDPDT(序列号17)的氨基酸序列的CDR3的L链可变区、和大鼠以外的动物抗体的L链恒定区，所述H链具有包含具有GFSL本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗PD
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1抗体，其包含(a)L链和(b)H链，所述L链具有包含具有QSLEYSDGYTY即序列号16的氨基酸序列的CDR1、具有GVS的氨基酸序列的CDR2及具有FQATHDPDT即序列号17的氨基酸序列的CDR3的L链可变区、和大鼠以外的动物抗体的L链恒定区，所述H链具有包含具有GFSLTSYY即序列号18的氨基酸序列的CDR1、具有IRSGGST即序列号19的氨基酸序列的CDR2及具有ARTSSGYEGGFDY即序列号20的氨基酸序列的CDR3的H链可变区、和大鼠以外的动物抗体的H链恒定区。2.根据权利要求1所述的抗体，其中，L链可变区和H链可变区来自于大鼠。3.根据权利要求2所述的抗体，其中，L链可变区为大鼠抗牛PD
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1抗体的L链可变区，H链可变区为大鼠抗牛PD
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1抗体的H链可变区。4.根据权利要求3所述的抗体，其中，L链可变区具有序列号1的氨基酸序列，H链可变区具有序列号2的氨基酸序列。5.根据权利要求1～4中任一项所述的抗体，其中，大鼠以外的动物抗体的L链恒定区具有Lambda链或Kappa链的恒定区的氨基酸序列。6.根据权利要求1～4中任一项所述的抗体，其中，大鼠以外的动物抗体的H链恒定区具有相当于人的IgG4的免疫球蛋白的恒定区的氨基酸序列，或者被导入了使ADCC活性和/或CDC活性降低的突变。7.根据权利要求6所述的抗体，其中，大鼠以外的动物为牛，牛抗体的L链恒定区具有Lambda链的恒定区的氨基酸序列，并且牛抗体的H链恒定区被导入了使ADCC活性和/或CDC活性降低的突变。8.根据权利要求7所述的抗体，其中，牛抗体的L链恒定区具有序列号3的氨基酸序列，牛抗体的H链恒定区具有序列号4的氨基酸序列。9.根据权利要求1～4中任一项所述的抗体，其具有两条L链和两条H链的四链结构。10.一种医药组合物，其包含权利要求1～9中任一项所述的抗体作为有效成分。11.根据权利要求10所述的医药组合物...

【专利技术属性】
技术研发人员：今内觉，大桥和彦，村田史郎，冈川朋弘，西森朝美，前川直也，铃木定彦，中岛千绘，
申请(专利权)人：扶桑药品工业株式会社，
类型：发明
国别省市：