一种天然水体中胞内外DNA精准提取分离的方法技术

本发明专利技术公开了一种天然水体中胞内外DNA精准提取的方法，属于生物领域中的DNA提取技术。该方法向含有透明胞外聚合物颗粒的目标水体中加入能够和金属离子结合的提取剂，使透明胞外聚合物颗粒均匀分散后在提取剂的作用下完全破裂，并将其上的胞内外DNA释放到目标水体后进行离心处理，得到含有所有胞内外DNA的上清液。将上清液通过滤膜过滤处理，将胞外DNA收集到滤液中，胞内DNA收集到滤膜上，完成目标水体中的胞内外DNA精准分离。本发明专利技术可以有针对性的、精准提取天然水体中的胞内外DNA，解决水体中传统胞外DNA提取方法对胞外DNA含量严重低估的问题，对于水生生物生态系统中微生物群落结构、抗性基因、功能基因、物质循环等方面的研究有重要意义。研究有重要意义。研究有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种天然水体中胞内外DNA精准提取分离的方法


[0001]本专利技术涉及一种天然水体中胞内外DNA精准提取的方法，属于生物领域中的DNA提取技术。

技术介绍

[0002]EPS中的一大类别——透明胞外聚合物颗粒(transparent exopolymer particles，TEP)是连接颗粒有机碳(particulate organic carbon，POC)与溶解有机碳(dissolved organic carbon，DOC)两大有机碳库的纽带。TEP是DOM转化为POM的重要途径对碳循环有重要意义。TEP由酸性多糖组成，其他成分还包括蛋白质、腐殖酸、氨基酸和金属等。TEP在光学显微镜下不可见，但属于可以用阿尔新蓝对其染色后进行观察的一种EPS。
[0003]透明胞外聚合物颗粒(TEP)在水环境中普遍存在。TEP具有低密度的特性，能延长水体中固体颗粒物的停留时间，继而影响水体中的碳循环，影响着吸附在聚集体上的活性元素，进一步影响水体中的营养元素循环。透明颗粒物在水生态系统中利用自身的高黏性形成大型凝聚体(如“湖雪”、“海雪”)，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种天然水体中胞内外DNA精准提取的方法，其特征在于，具体如下：向含有透明胞外聚合物颗粒的目标水体中加入能够和金属离子结合的提取剂，得到混合液；将所述混合液进行震荡处理，使提取剂与目标水体中的透明胞外聚合物颗粒充分反应；待目标水体中的透明胞外聚合物颗粒完全破裂，并将其上的胞内外DNA完全释放到目标水体后进行离心处理，得到含有所有胞内外DNA的上清液；将所述上清液通过0.22μm滤膜过滤处理，将胞外DNA收集到滤液中，胞内DNA收集到滤膜上，完成含透明胞外聚合物颗粒的目标水体中的胞内外DNA精准分离；所述提取剂采用对生物膜和DNA均无破坏作用的乙二胺四乙酸、焦磷酸钠或六偏磷酸钠中的一种。2.根据权利要求1所述天然水体中胞内外DNA精准提取的方法，其特征在于，所述提取剂与目标水体按照体积比为1:(1～10)的比例混合。3.根据权利要求1所述天然水体中胞内外DNA精准提取的方法，其特征在于，所述乙二胺四乙酸的浓度为0.001mM～10mM。4.根据权利要求1所述天然水体中胞内外DNA精准提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：王潇男，郑洁琰，何烨晨，孙悦，张道勇，潘响亮，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：