一种超微量琼脂糖凝胶纯化DNA试剂盒及纯化DNA的方法技术

技术编号:37990711 阅读:23 留言:0更新日期:2023-06-30 10:05
本发明专利技术提供了一种超微量琼脂糖凝胶纯化DNA试剂盒及纯化DNA的方法,涉及生物技术领域,本发明专利技术的试剂盒包括:溶胶液、除杂液、漂洗液、洗脱缓冲液和离子吸附柱和收集管;所述除杂液包括4

【技术实现步骤摘要】
一种超微量琼脂糖凝胶纯化DNA试剂盒及纯化DNA的方法


[0001]本专利技术涉及生物
,具体而言,涉及一种超微量琼脂糖凝胶纯化DNA试剂盒及纯化DNA的方法。

技术介绍

[0002]纯化和分析DNA在分子生物学领域广泛运用,在基因克隆技术中,通常会对聚合链式反应扩增的产物进行回收、纯化和测序等分析;或者通过酶切环状质粒,对线性化质粒DNA进行回收纯化,用于后续的分子实验中。从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的常见方法包括:DEAE—纤维素滤膜回收法、低熔点琼脂糖法、透析袋电洗、挖孔法等。但由于这些方法存在实验操作繁琐、DNA回收效率低和成本高等问题,柱式法回收DNA仍然是应用最广泛,操作效率高的一种方法。但柱式法回收DNA也有缺陷,如回收量低,如果需要回收大量核酸需要更多的吸附柱,现有吸附柱以二氧化硅羟基为主要材料,这是造成柱式法回收DNA成本高的主要原因。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于提供一种超微量琼脂糖凝胶纯化DNA试剂盒及纯化DNA的方法,以解决上述问题。为了实现上述目的,本专利技术采取的技术方案如下:本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种超微量琼脂糖凝胶纯化DNA试剂盒,其特征在于,包括:溶胶液、除杂液、漂洗液、洗脱缓冲液和离子吸附柱和收集管;所述除杂液包括4

6M尿素、2

3M NaCl和70%

80%无水乙醇;所述离子吸附柱采用上下双层纳米膜。2.根据权利要求1所述的超微量琼脂糖凝胶纯化DNA试剂盒,其特征在于:所述离子吸附柱上层纳米膜为聚碳酸酯膜,下层纳米膜为聚酰胺膜。3.根据权利要求1所述的超微量琼脂糖凝胶纯化DNA试剂盒,其特征在于:所述聚碳酸酯膜的微孔直径小于5nm。4.根据权利要求1所述的超微量琼脂糖凝胶纯化DNA试剂盒,其特征在于:所述除杂液的浓度为5

5.5M尿素、2.2M NaCl、70%无水乙醇。5.根据权利要求1所述的超微量琼脂糖凝胶纯化DNA试剂盒,其特征在于:所述溶胶液包括50

100mM Tris

HCl缓冲液和7%酚红溶液,所述Tris

HCl缓冲液pH=8.0。6.根据权利要求5所述的超微量琼脂糖凝胶纯化DNA试剂盒,其特征在于,所述7%酚红溶液配制方法为:称取0.1g的酚红置于研钵中,加入5.7ml 50mM NaOH溶液和适量的水,将酚红研碎,定容至250ml,4℃保存。7.根据权利要求1所述的超微量琼脂糖凝胶纯化DNA试剂盒,其特征在于:所述漂洗液包括70%

80%无水乙醇,pH=7.5。8.根据权利要求1所述的超微量琼脂糖凝胶纯化DNA试剂盒,其特征在于:所述洗脱缓冲液包括1mM

3mM Tris

HCl,pH=8.0

9.0。9.一种纯化DNA的方法,其特征在于,包括步骤:切胶:在长波紫外灯下,将目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下;加入溶胶液:将目的DNA条带放入1.5ml离心管,加400

...

【专利技术属性】
技术研发人员:李艳艳
申请(专利权)人:核小体北京生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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