【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物工程，尤其涉及一种限制性内切酶及其制备方法和应用。
技术介绍
1、限制性内切酶有较高的保真性，它识别切割特定的靶序列，不仅可以用于常规的分子克隆，而且还广泛地应用于甲基化状态的分析、snp检测和基因表达序列的分析。其中，现有的ii型限制性内切酶，例如apali限制性内切酶的生产工艺，无论是低密度摇瓶培养还是大规模发酵罐发酵，均存在产量低，无法满足行业需求的问题。
2、因此，如何提高限制性内切酶的产量，成为本领域技术人员亟待解决的问题。
技术实现思路
1、为了提高限制性内切酶的产量，本申请提供一种限制性内切酶及其制备方法和应用。
2、为实现本专利技术目的提供的一种限制性内切酶的制备方法，包括：
3、制备编码所述限制性内切酶和hfq伴侣蛋白的核酸构建体，所述限制性内切酶为apali蛋白酶；
4、将所述核酸构建体作为外源性核酸导入宿主细胞，培养宿主细胞以使宿主细胞表达所述限制性内切酶；
5、破碎所述宿主细胞，收集所述限制性
【技术保护点】
1.一种限制性内切酶的制备方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的限制性内切酶的制备方法，其特征在于，所述核酸构建体的编码序列如SEQ ID No：1所示。
3.根据权利要求1所述的限制性内切酶的制备方法，其特征在于，所述核酸构建体包括诱导基因，在将所述核酸构建体导入宿主细胞之后，扩增培养宿主细胞，加入诱导剂并继续诱导培养宿主细胞，诱导宿主细胞表达所述限制性内切酶。
4.根据权利要求3所述的限制性内切酶的制备方法，其特征在于，所述诱导培养的培养时间为8小时～10小时。
5.根据权利要求1所述的限制性内切酶的制备...
【技术特征摘要】
1.一种限制性内切酶的制备方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的限制性内切酶的制备方法，其特征在于，所述核酸构建体的编码序列如seq id no：1所示。
3.根据权利要求1所述的限制性内切酶的制备方法，其特征在于，所述核酸构建体包括诱导基因，在将所述核酸构建体导入宿主细胞之后，扩增培养宿主细胞，加入诱导剂并继续诱导培养宿主细胞，诱导宿主细胞表达所述限制性内切酶。
4.根据权利要求3所述的限制性内切酶的制备方法，其特征在于，所述诱导培养的培养时间为8小时～10小时。
5.根据权利要求1所述的限制性内切酶的制备方法，其特征在于，使用液体培养基发酵培养宿主细胞；
6.根据...
【专利技术属性】
技术研发人员：李艳艳，张利存，
申请(专利权)人：核小体北京生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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