甘蔗叶片DNA的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种甘蔗叶片DNA的提取方法，其是在装有甘蔗叶片的离心管中加入不锈钢珠；取出与离心管大小匹配的离心管架的网格，将离心管置于所述网格中，再将所述网格置于液氮中处理后，上下晃动直至甘蔗叶片粉碎；再加入粗提溶液后进行金属浴，离心取上清，即得。本发明专利技术的甘蔗叶片DNA的提取方法简单、高效、省时省力，且提取的DNA可以直接用于PCR扩增，扩增条带清晰。条带清晰。条带清晰。

【技术实现步骤摘要】
甘蔗叶片DNA的提取方法


[0001]本专利技术属于生物
，更具体地，本专利技术涉及一种甘蔗叶片DNA的提取方法。

技术介绍

[0002]在甘蔗DNA的提取过程中，通常采用的方法为：取甘蔗幼嫩叶片0.5cm2左右剪碎，放入1.5mLEppendorf管中，加入100μL0.25mol/L的NaOH，将此离心管插入沸水中煮30s，取出加入100μL0.25mol/L的HCl和50μL1mol/LTris
‑
HCl(pH8.0)；再将该管放入沸水中孵育2min，室温条件下10000r/min离心2min，取上清2μL直接作为模板进行PCR反应。
[0003]该方法的不足之处在于：1、衰老甘蔗叶片的体内DNA会出现了一定程度的降解，由于没有磨碎样品的步骤，DNA从细胞中释放的难度加大，老化叶片扩增出来的条带模糊并且非常微弱，因此，该方法只能提取幼嫩叶片的DNA；2、该方法步骤繁琐，费时费力，需要加入两次溶液，增加工作量。
[0004]目前现有的磨样方法有研钵研磨法以及使用植物组织破碎仪。研钵研磨法缺点在于一次只本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种甘蔗叶片DNA的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)、在装有甘蔗叶片的离心管中加入不锈钢珠；(2)、取出与步骤(1)所述离心管大小匹配的离心管架的网格，将步骤(1)所述离心管置于所述网格中，再将所述网格置于液氮中；(3)、上下晃动网格
，
直至离心管中的甘蔗叶片粉碎；(4)、打开离心管，迅速倒出不锈钢珠，再加入粗提溶液后进行金属浴，离心取上清，即得。2.根据权利要求1所述的甘蔗叶片DNA的提取方法，其特征在于，步骤(2)中将所述网格盖上盖子，用橡皮筋固定后，再置于液氮中。3.根据权利要求2所述的甘蔗叶片DNA的提取方法，其特征在于，所述网格置于液氮中1～2min。4.根据权利要求1所述的甘蔗叶片DNA的提取方法，其特征在于，所述网格为36格、72格或100格。5.根据权利要求1所述的甘蔗叶片DNA的提取方法，其特征在于，步骤(1)中加入2～4颗不...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾璇，张明永，李暄妍，李泽聪，夏快飞，陈建通，
申请(专利权)人：中国科学院华南植物园，
类型：发明
国别省市：