一种去甲哈尔满在制备抗菌剂中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种去甲哈尔满在制备抗菌剂中的应用，本发明专利技术中群体感应抑制剂Norharmane与阿奇霉素联合应用时，存在明显的协同增效作用，可在不抑制细菌生长的情况下抑制细菌相关毒力因子的表达，从而减弱细菌的毒力，在体内对耐药性铜绿假单胞菌具有良好的抗菌效果。对耐药性铜绿假单胞菌肺炎模型小鼠，能显著提升感染后小鼠的生存率和降低小鼠肺部的细菌负荷，并且能降低小鼠肺部炎症因子水平和改善肺泡结构损伤，在获得相同的抗菌效果下，可显著降低给药剂量，从而降低药物的副作用。Norharmane联合阿奇霉素作为抗细菌耐药性抗菌药物或抗生素辅助治疗药物的开发提供支持。持。

【技术实现步骤摘要】
一种去甲哈尔满在制备抗菌剂中的应用
(一)

[0001]本专利技术涉及药学领域，具体涉及一种群体感应抑制剂去甲哈尔满(Norharmane)与阿奇霉素联合在制备抗菌剂中的应用。
(二)
技术介绍

[0002]细菌感染一直以来都是人类所面对的一个重大健康挑战，但自抗生素问世以来，这一问题得到了有效解决。然而，随着抗生素的广泛使用和随意滥用，抗生素耐药性问题逐渐显现，许多抗生素在其上市后的几年内就出现了耐药性。与此同时，新型抗生素的开发速度逐渐减慢。据2016年发表的《全球抗菌药物耐药回顾》估计，如果目前的情况得不到改善，到2050年全球每年将有1000万人死于耐药菌感染。2020年WHO发布的《2019年全球卫生估计报告》仍指出，目前抗感染药物的需求并未解决。
[0003]因此，亟需寻找新的靶点来开发能抵抗细菌耐药性的新的抗菌药物。
(三)
技术实现思路

[0004]本专利技术目的是提供一种去甲哈尔满在制备抗菌剂中的应用，将群体感应抑制活性的小分子化合物去甲哈尔满与阿奇霉素联用，不仅能够显著降低铜绿假单胞菌的毒力因子，能显著提升肺炎小鼠的生存率并降低小鼠肺部细菌负荷，降低小鼠肺部炎症因子水平和改善肺泡结构损伤；并在临床试验中对铜绿假单胞菌引起肺囊性纤维化患者表现出良好的治疗效果。二者联用时，在多种细菌感染模型小鼠中具有协同增效作用，包括铜绿假单胞菌肺炎模型、大肠杆菌大腿感染模型和金黄色葡萄球菌腹膜炎模型；并且在获得相同的抗菌效果下，显著降低给药剂量。
[0005]本专利技术采用的技术方案是：<br/>[0006]本专利技术提供一种去甲哈尔满在制备抗菌剂中的应用，所述抗菌剂为去甲哈尔满与阿奇霉素的混合。
[0007]优选的，所述去甲哈尔满以盐酸盐形式作用，所述阿奇霉素以盐酸阿奇霉素形式作用，所述去甲哈尔满盐酸盐与盐酸阿奇霉素以质量比3:1
‑
4混合，更优选3:2.7。
[0008]所述Norharmane结构式为：
[0009][0010]所述阿奇霉素的结构式为：
[0011][0012]优选的，所述抗菌剂为耐药铜绿假单胞菌肺炎抑菌剂，所述耐药铜绿假单胞菌为耐药铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)GDMCC No：61027。
[0013]优选的，所述抗菌剂为治疗肺囊性纤维化药物。
[0014]与现有技术相比，本专利技术有益效果主要体现在：
[0015]1、本专利技术中群体感应抑制剂Norharmane与阿奇霉素联合应用时，在体内对耐药性铜绿假单胞菌具有良好的抗菌效果。对耐药性铜绿假单胞菌肺炎模型小鼠，能显著提升感染后小鼠的生存率和降低小鼠肺部的细菌负荷，并且能降低小鼠肺部炎症因子水平和改善肺泡结构损伤。
[0016]2、Norharmane和阿奇霉素均可在不抑制细菌生长的情况下抑制细菌相关毒力因子的表达，从而减弱细菌的毒力，具有防止铜绿假单胞菌产生耐药的潜力。
[0017]3、Norharmane与阿奇霉素联合应用时在多种细菌感染模型中存在明显的协同增效作用，包括铜绿假单胞菌肺炎模型、大肠杆菌大腿感染模型和金黄色葡萄球菌腹膜炎模型，在获得相同的抗菌效果下，可显著降低给药剂量，从而降低药物的副作用。
[0018]4、Norharmane联合阿奇霉素作为抗细菌耐药性抗菌药物或抗生素辅助治疗药物的开发提供支持。
(四)附图说明
[0019]图1、Norharmane和阿奇霉素对铜绿假单胞菌肺炎模型小鼠生存率的影响。
[0020]图2、Norharmane和阿奇霉素对铜绿假单胞菌肺炎模型小鼠肺部细菌负荷的影响。
[0021]图3、小鼠肺组织扫描电镜。
[0022]图4、小鼠肺匀浆液中炎症因子水平。
(五)具体实施方式
[0023]下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步描述，但本专利技术的保护范围并不仅限于此：
[0024]实施例1：去甲哈尔满与阿奇霉素联合应用在铜绿假单胞菌肺炎模型小鼠中的抗菌效果
[0025]1.材料
[0026]1.1药品与试剂
[0027]Norharmane，上海毕得医药有限公司；
[0028]阿奇霉素，罗恩试剂有限公司；
[0029]生理盐水，上海源叶生物科技有限公司；
[0030]浓盐酸，国药集团化学试剂有限公司；
[0031]环磷酰胺，上海毕得医药有限公司；
[0032]胰蛋白胨，上海阿拉丁试剂有限公司；
[0033]酵母提取物，国药集团化学试剂有限公司；
[0034]琼脂，国药集团化学试剂有限公司；
[0035]氯化钠，国药集团化学试剂有限公司；
[0036]甲醇，上海泰坦科技股份有限公司；
[0037]磷酸氢二钠，上海麦克林生化科技有限公司；
[0038]氢氧化钠，国药集团化学试剂有限公司；
[0039]无菌PBS缓冲液，博士德生物工程有限公司；
[0040]去甲哈尔满碱盐酸盐(去甲哈尔满碱
·
HCl)注射液：100mg的去甲哈尔满用7
‑
8mL甲醇溶解后，加入1
‑
2mL过量浓盐酸，室温下磁力搅拌反应6h，反应完成后旋干除去体系内甲醇、多余盐酸及水，即得到去甲哈尔满盐酸盐固体123mg，使用时根据所需要的浓度用生理盐水现用现配，并用0.22μm滤膜过滤。
[0041]阿奇霉素盐酸盐注射液：首先配制1mol/L盐酸水溶液和1mol/L磷酸氢二钠水溶液备用。称取100mg阿奇霉素固体，加4ml生理盐水，搅拌混悬缓慢滴加盐酸水溶液使之充分反应，再用Na2PO4调节pH为6.5
‑
8.0。过0.22μm滤膜，并从滤膜上补加生理盐水至10ml，使用时用生理盐水根据所需浓度稀释。
[0042]培养基：
[0043](1)LB液体培养基：NaCl 10g/L，蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，溶剂为水，混合均匀后在25℃用1mol/L的NaOH溶液调节pH为7.2
±
0.2，分装到250mL锥形瓶后在121℃，1
×
105Pa下灭菌20min，备用。
[0044](2)LB琼脂培养基：NaCl 10g/L，蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，溶剂为水，混合均匀后加入质量浓度1.5％
‑
2.0％的琼脂粉，在25℃用1mol/L的NaOH溶液调节pH为7.2
±
0.2，121℃，1
×
105Pa下灭菌20min，倒平板备用。
[0045]1.2仪器
[0046]SW
‑
CJ
‑
IFB净化工作台，苏州安泰空气技术有限公司；
[0047]LDZF
‑
75L
‑
I立式压力蒸汽灭菌锅，上海申安医疗器械厂；
[0048]LRH
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种去甲哈尔满在制备抗菌剂中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗菌剂为去甲哈尔满与阿奇霉素的混合。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述去甲哈尔满以盐酸盐形式作用，所述阿奇霉素以盐酸阿奇霉素形式作用，所述去甲哈尔满盐酸盐与盐酸阿奇霉素以质量比3:1
‑
4混合。4....

【专利技术属性】
技术研发人员：陈建伟，王鸿，张红芳，王思琪，魏斌，章华伟，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：