CHD6检测试剂在制备结直肠癌诊断试剂中的应用制造技术

本申请属于生物医药领域，具体涉及CHD6检测试剂在制备结直肠癌诊断试剂中的应用。本申请研究发现CHD6在原发性CRC患者标本中过表达，并且与不良预后相关。通过分子生物学手段，干扰CHD6可以显著地抑制CRC的增殖、克隆形成、迁移和侵袭等，从而显示CHD6在结直肠癌发生发展中具有重要功能。另外，本申请还发现EGF可以通过抑制CHD6蛋白的降解，而增加CHD6蛋白水平。使用EGFR抑制剂可以抑制CHD6高表达的PDX的肿瘤生长。并且，使用Wnt抑制剂LGK

【技术实现步骤摘要】
CHD6检测试剂在制备结直肠癌诊断试剂中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，更具体地，CHD6检测试剂在制备结直肠癌诊断试剂中的应用。

技术介绍

[0002]结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)，是消化系统最常见的恶性肿瘤之一。据最新全球癌症调查报告显示，结直肠癌是世界上仅次于乳腺癌和肺癌的发病率与死亡率均位列第三的肿瘤。我国结直肠癌发病率和死亡率一直在增加，2016年我国结直肠癌新增发病人数约40万人。尤其在广东省，结直肠癌发病率每年递增4.2％，超过我国平均3.9％的增速，是世界平均递增速度的近两倍。结直肠癌患者5年生存率与诊断时肿瘤恶性程度直接相关，早期结直肠癌患者5年生存率高达92％，而晚期仅为7％。由于我国缺乏常规结直肠癌筛查和针对性的诊治方式，约90％的患者被诊断时已处于晚期，肿瘤已侵袭转移到其他的远程组织，死亡率高达60％，是一种严重威胁我国人民生命健康的疾病。目前针对结直肠癌的诊断试剂及针对性的诊治方式有限，制备结直肠癌诊断试剂及有针对性的治疗试剂是非常有意义的。
[0003]临床上使用单克隆抗体西妥昔单抗进行KRAS/BRAF野生型的结直肠癌病人的治疗，其是通过靶向细胞外结构域抑制EGFR的活性起作用，在转移性CRC的疾病缓解和生存方面具有临床意义的。但是，即使是KRAS/BRAF野生型的结直肠癌病人，也只有一部分接受西妥昔单抗治疗可以从该药物中获益。

技术实现思路

[0004]本专利技术目的在于提供一种CHD6抑制剂在制备治疗结直肠肿瘤药物方面的应用。
[0005]本专利技术的另一个目的在于提供一种CHD6表达的检测试剂在制备结直肠肿瘤诊断试剂/试剂盒中的应用。
[0006]CHD6(chromodomain helicase DNAbinding protein 6，染色质解旋酶DNA结合蛋白6)是一种染色质重塑蛋白，该蛋白通过催化ATP水解产生能量而改变染色质结构，促进转录因子与基因的启动子结合，从而调节基因表达。CHD6与RNA聚合酶存在共定位，与mRNA合成有关。研究发现CHD6可以与转录因子NRF2结合调控NQOI的表达，维持细胞氧化还原稳态。
[0007]本专利技术中的“检测”同诊断，除了结直肠肿瘤的早期诊断，还包括结直肠肿瘤中期和晚期的诊断，且也包括结直肠肿瘤筛选、风险评估、预后、疾病识别、病症阶段的诊断和治疗性靶标的选择。
[0008]结直肠肿瘤标志物CHD6的应用使得结直肠肿瘤的早期诊断成为可能。当确定在癌症细胞中CHD6在临床上或形态学上正常表象的细胞中过表达时，这就表明该正常表象的细胞向癌症发展。这样，结直肠癌可在早期通过在正常表象的细胞中的结直肠肿瘤特异性CHD6的表达而诊断。
[0009]其中，早期诊断指的是在转移之前发现癌症的可能性，优选在可观察到组织或者
细胞的形态学变化之前。
[0010]除了结直肠肿瘤的早期诊断，本专利技术的试剂/试剂盒还有希望用于结直肠肿瘤筛选、风险评估、预后诊断、疾病识别、病症阶段的诊断和治疗性靶标的选择。
[0011]一方面，本申请提供了CHD6检测试剂在制备肿瘤筛选/诊断/预测/预后诊断试剂或诊断系统的应用。
[0012]在一些实施方案中，所述肿瘤选自黑色素瘤、子宫癌、胃癌、膀胱癌、肺腺癌、宫颈癌、食道癌、肺鳞癌、肉瘤、头颈部癌、乳腺浸润癌、卵巢癌、胰腺癌、肝癌、前列腺癌、胶质母细胞瘤、脑低级别胶质瘤、嗜铬细胞瘤、副神经节瘤、甲状腺癌和结直肠肿瘤。
[0013]在一些实施方案中，所述肿瘤选自结直肠肿瘤。
[0014]在一些实施方案中，所述的诊断试剂/试剂盒为结直肠肿瘤预后用途的诊断试剂/试剂盒。
[0015]在一些实施方案中，所述检测试剂为检测CHD6的基因表达量；在一些实施方案中，所述检测试剂检测CHD6的mRNA表达量；在一些实施方案中，所述检测试剂检测CHD6蛋白的表达量。
[0016]在一些实施方案中，所述检测试剂为荧光定量PCR染料、荧光定量PCR引物、荧光定量PCR探针、抗体、抗体功能性片段和偶联抗体中的一种或多种；在一些实施方案中，所述的试剂盒选自qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒、蛋白沉淀试剂盒、免疫荧光试剂盒和电化学发光检测试剂盒中的一种或多种；在一些实施方案中，所述的试剂盒选自蛋白沉淀试剂盒、免疫荧光试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫组化检测试剂盒中的一种或多种。
[0017]在一些实施方案中，所述的检测试剂的检测样品为组织、粪便或血液；在一些实施方案中，所述的检测样品为组织；在一些实施方案中，所述的检测样品为肠粘膜组织。
[0018]一方面，本申请提供了一种肿瘤诊断试剂/试剂盒，所述试剂/试剂盒包含CHD6检测试剂。
[0019]在本申请的一个特定的实施例中，发现CHD6在CRC中显著地高表达。
[0020]在一些实施方案中，当CHD6表达水平与正常水平相比升高，则预测结直肠癌预后差/风险高。
[0021]一方面，本申请提供了一种结直肠肿瘤的诊断系统，所述的诊断系统含有：
[0022]检测构件：所述的检测构件用以检测CHD6的表达量；
[0023]结果判断构件：所述的结果判断构件用于根据检测构件所检测CHD6的表达量的结果，输出肿瘤患者疾病结果。
[0024]在一些实施方案中，所述CHD6的表达量为基因表达量、mRNA表达量和/或蛋白表达量中的一种或多种。
[0025]在一些实施方案中，所述的结果判断构件含有输入模块、分析模块和输出模块；输入模块用于输入CHD6的表达量；分析模块用于根据CHD6的表达量，分析出肿瘤患者疾病风险结果的可能性；输出模块用于输出分析模块的分析结果。
[0026]在一些实施方案中，所述的检测构件含有qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒、蛋白沉淀试剂盒、免疫荧光试剂盒、电化学发光检测试剂盒、qPCR仪、免疫印迹检测装置、流式细胞仪、免
疫组化检测装置、ELISA检测装置、电化学发光检测装置、免疫荧光检测装置中的一种或几种。
[0027]在一些实施方案中，所述的试剂盒选自蛋白沉淀试剂盒、免疫荧光试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫组化检测试剂盒。
[0028]在一些实施方案中，EGFR抑制剂西妥昔单抗处理可以显著抑制CHD6高表达的异种移植肿瘤的生长。免疫组织化学染色显示西妥昔单抗处理明显抑制CHD6高表达的异种移植肿瘤中细胞恶性指标Ki67的表达，而CHD6低表达的异种移植肿瘤对西妥昔单抗的处理效果不明显。
[0029]一方面，本申请提供了一种结直肠肿瘤的治疗系统，所述的治疗系统含有：
[0030]1)CHD6诊断系统，所述诊断系统含有所述的诊断系统；
[0031]2)用药系统；所述用药系统含有EGFR抑制剂；
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.CHD6检测试剂在制备肿瘤筛选/诊断/预测/预后诊断试剂或诊断系统的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括黑色素瘤、子宫癌、胃癌、膀胱癌、肺腺癌、宫颈癌、食道癌、肺鳞癌、肉瘤、头颈部癌、乳腺浸润癌、卵巢癌、胰腺癌、肝癌、前列腺癌、胶质母细胞瘤、脑低级别胶质瘤、嗜铬细胞瘤、副神经节瘤、甲状腺癌、结直肠肿瘤；优选地，所述肿瘤选自结直肠肿瘤；优选地，所述的诊断试剂/试剂盒为结直肠肿瘤预后用途的诊断试剂/试剂盒；优选地，所述检测试剂为检测CHD6的基因表达量；优选地，所述检测试剂检测CHD6的mRNA表达量；优选地，所述检测试剂检测CHD6蛋白的表达量；优选地，所述检测试剂为荧光定量PCR染料、荧光定量PCR引物、荧光定量PCR探针、抗体、抗体功能性片段和偶联抗体中的一种或多种；优选地，所述的试剂盒选自qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒、蛋白沉淀试剂盒、免疫荧光试剂盒和电化学发光检测试剂盒中的一种或多种；优选地，所述的试剂盒选自蛋白沉淀试剂盒、免疫荧光试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫组化检测试剂盒中的一种或多种；优选地，所述的检测试剂的检测样品为组织、粪便或血液；优选地，所述的检测样品为组织；优选地，所述的检测样品为肠粘膜组织。3.一种肿瘤诊断试剂/试剂盒，其特征在于，所述试剂/试剂盒包含CHD6检测试剂；所述肿瘤包括黑色素瘤、子宫癌、胃癌、膀胱癌、肺腺癌、宫颈癌、食道癌、肺鳞癌、肉瘤、头颈部癌、乳腺浸润癌、卵巢癌、胰腺癌、肝癌、前列腺癌、胶质母细胞瘤、脑低级别胶质瘤、嗜铬细胞瘤、副神经节瘤、甲状腺癌、结直肠肿瘤；优选地，所述肿瘤选自结直肠肿瘤；优选地，所述的诊断试剂/试剂盒为结直肠肿瘤预后用途的诊断试剂/试剂盒；优选地，所述检测试剂为检测CHD6的基因表达量；优选地，所述检测试剂检测CHD6的mRNA表达量；优选地，所述检测试剂检测CHD6蛋白的表达量；优选地，所述检测试剂为荧光定量PCR染料、荧光定量PCR引物、荧光定量PCR探针、抗体、抗体功能性片段和偶联抗体中的一种或多种；优选地，所述的试剂盒选自qPCR试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫层析检测试剂盒、流式细胞分析试剂盒、免疫组化检测试剂盒、ELISA试剂盒、蛋白沉淀试剂盒、免疫荧光试剂盒和电化学发光检测试剂盒中的一种或多种；优选地，所述的试剂盒选自蛋白沉淀试剂盒、免疫荧光试剂盒、免疫印迹检测试剂盒、免疫组化检测试剂盒中的一种或多种；优选地，所述的检测试剂的检测样品为组织、粪便或血液；优选地，所述的检测样品为组织；优选地，所述的检测样品为肠粘膜组织。4.一种结直肠肿瘤的诊断系统，其特征在于，所述的诊断系统含有：
检测构件：所述的检测构件用以检测CHD6的表达量；结果判断构件：所述的结果判断构件用于根据检测构件所检测CHD6的表达量的结果，输出肿瘤患者疾病结果；优选地，所述CHD6的表达量为基因表达量、mRNA表达量和/或蛋白表达量中的一种或多种；优选地，所述的结果判断构件含有输入模块、分析模块和输出模块；输入模块用于输入CHD6的表达量；分析模块用于根据CH...

【专利技术属性】
技术研发人员：李孟鸿，刘庆欣，张博煜，
申请(专利权)人：中山大学附属第六医院，
类型：发明
国别省市：