新型冠状病毒、艾滋病毒和猴痘病毒联检的组合物制造技术

本发明专利技术属于分子生物学检测领域，具体地，涉及新型冠状病毒2019

【技术实现步骤摘要】
新型冠状病毒、艾滋病毒和猴痘病毒联检的组合物


[0001]本专利技术属于分子生物学检测领域，具体地，涉及新型冠状病毒2019
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nCoV、艾滋病毒和猴痘病毒的联检组合物、方法和用途。

技术介绍

[0002]基于流行病学调查，新型冠状病毒的潜伏期为1～14天，症状主要是发热、乏力、干咳，重症患者表现为呼吸困难、脓毒症休克、出现凝血功能障碍及多器官功能衰竭、难以纠正的代谢性酸中毒等。
[0003]猴痘病毒是一种双链DNA病毒，属于人畜共患病，1958年，在丹麦哥本哈根的实验猕猴上首次发现，1970年首次报道扎伊尔地区出现人类感染猴痘病毒。猴痘病毒与天花病毒同属痘病毒科，感染的症状与天花相似，如发热、咳嗽、淋巴结肿大和全身疼痛，可通过直接接触患者或者被感染的动物，或通过患者的体液、呼吸道飞沫传播，毒力强的病毒株有可能致死。从2022年5月第一例病例被发现以来，不到一个月已确诊了超过100多例，WHO扩大了对非流行国家的监测，现有信息表明，与有症状的病例发生密切身体接触的人群中正在发生人际传播，现在越来越多的人不再对猴痘病毒具有免疫力。
[0004]人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)为获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)的病原体，属于反转录病毒科慢病毒属，HIV为直径100～120nm的球形颗粒，由核心和包膜两部分组成。核心由衣壳蛋白(CA，p24)组成，衣壳内包括两条完全相同的病毒单股正链 RNA、核衣壳蛋白(NC)和病毒复制所必需的酶类，包括反转录酶(RT，p51/p66)、整合酶(IN，p32)和蛋白酶(PR，p10)等。
[0005]一种临床表现可由多个病原体引起，为临床早期诊断带来了困难，不同的病毒其临床治疗方式可能不一样。同时一个个体可能同时存在多个感染，日前就发现一例患者同时感染新冠、艾滋和猴痘。对于易感染病毒而言，需要尽早发现，尽早治疗，且及时控制传染源，阻断传播途径。区分这些病毒感染，对后续的防控、治疗以及采取针对性的措施提供指导，因此本领域需求一种能够同时检测并区分新型冠状病毒、艾滋病毒和猴痘病毒的相关产品。

技术实现思路

[0006]有鉴于此，第一方面，本专利技术提供一种新型冠状病毒、艾滋病毒，和猴痘病毒联检的组合物，同时包括：
[0007]第一核酸组合物：
[0008]如SEQ ID NO:1～3所示的检测2019
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nCoV ORF1ab基因的上下游引物和探针；和
[0009]如SEQ ID NO:4～6所示的检测2019
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nCoV N基因的上下游引物和探针；
[0010]第二核酸组合物：
[0011]如SEQ ID NO:7～9所示的检测猴痘病毒的上下游引物和探针；
[0012]第三核酸组合物：
[0013]如SEQ ID NO:13～15所示的检测艾滋病毒的上下游引物和探针。
[0014]本专利技术提供的联检的组合物，主要利用多重荧光PCR分析方法，通过检测不同病原体上的不同的位点，对不同病原体进行检测，从而在单管反应体系中同时实现新型冠状病毒、艾滋病毒和猴痘病毒的检测。使得不同病原体能够得到区别对待，从而使得治疗和预防更有效。同时，本专利技术的组合物，其检测的灵敏度更高，达到500拷贝/mL，检测更为准确。
[0015]在一些具体的实施方案中，所述第二核酸组合物还包括：
[0016]如SEQ ID NO:10～12所示的检测猴痘病毒的上下游引物和探针。
[0017]一些具体的实施方案中，所述第三核酸组合物还包括：
[0018]如SEQ ID NO:16～18所示的检测艾滋病毒的上下游引物和探针。
[0019]使用额外的猴痘和艾滋病毒的引物和探针可以进一步预防漏检。避免在第一靶基因突变导致检测失效时，仍然能够检测到猴痘和艾滋病毒，进一步提高了检测准确率。降低了假阴性的概率。
[0020]进一步地，所述组合物包括第四核酸组合物。
[0021]所述第四核酸组合物为：检测内标的上下游引物及探针。
[0022]在一些具体的实施方案中，内标是人源内标基因。在一个具体的实施方案中，内标是人管家基因。
[0023]在一些具体的实施方案中，用于检测内标的上下游引物及探针为如SEQ IDNO:19所示的内标上游引物、如SEQ ID NO:20所示的内标下游引物，和如SEQID NO:21所示的内标探针。
[0024]进一步地，本专利技术第一、第二、第三和第四核酸组合物探针的荧光基团彼此互不相同且互不干扰。
[0025]在本文中，“互不相同且互不干扰”是指组合物中每个探针所用的荧光基团是不一样的，并且不会影响彼此的检测，即可以利用不同的通道进行检测。例如可以使用FAM、HEX、ROX和CY5，这些基团吸光值不接近，能选择不同的通道，因而不会互相干扰。
[0026]进一步地，在一些实施方案中，本专利技术的组合物可以同时包括上述引物和探针对中的一对或多对。在本专利技术中，“对”是指检测一个靶点的互相匹配的上游、下游引物和探针。
[0027]本专利技术的组合物可以任意组合成检测对应6个靶点的任意组合形式。本领域技术人员可以根据需要进行组合，检测哪几个靶点，即把对应靶点的引物和探针对进行组合即可。这些组合形式均包括在本专利技术中。
[0028]举例来说，可以包括上述6对引物和探针中的任意5对，可以包括上述6 对引物和探针中的任意4对，可以包括上述6对引物和探针中的任意3对，可以包括上述6对引物和探针中的任意2对，也可以包括上述6对引物和探针中的任意1对。
[0029]举例来说，还可以只包括第一核酸组合物；只包括第二核酸组合物；只包括第三核酸组合物。
[0030]举例来说，还可以包括不同核酸组合物中不同对，举例来说可以包括第一核酸组合物中1对或2对引物和探针，和/或第二核酸组合物中1对或2对引物和探针，和/或第三组合物中1对或2对引物和探针。
[0031]在一些具体的实施方案中，本专利技术组合物用于荧光PCR。
[0032]在一个具体的实施方案中，第一核酸组合物的探针的荧光报告基团为 FAM；第二核酸组合物的探针的荧光报告基团为HEX；第三核酸组合物的探针的荧光报告基团为ROX；第四核酸组合物的探针的荧光报告基团为CY5。
[0033]进一步地，探针的3
’
末端还具有非荧光淬灭剂。
[0034]进一步地，探针的3
’
末端还具有淬灭基团，例如BHQ1或BHQ2。
[0035]在一个具体的实施方案中，探针的3
’
末端为BHQ1。
[0036]进一步地，所述组合物中引物的用量为0.2μM～0.5μM；所述组合物中探针的用量为0.2μM～0.5μM。
[0037]在一个具体的实施方案中，本专利技术的组合本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种新型冠状病毒、艾滋病毒，和猴痘病毒联检的组合物，同时包括：第一核酸组合物：如SEQ ID NO:1～3所示的检测2019
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nCoV ORF1ab基因的上下游引物和探针；和如SEQ ID NO:4～6所示的检测2019
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nCoV N基因的上下游引物和探针；第二核酸组合物：如SEQ ID NO:7～9所示的检测猴痘病毒的上下游引物和探针；第三核酸组合物：如SEQ ID NO:13～15所示的检测艾滋病毒的上下游引物和探针。2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述第二核酸组合物还包括：如SEQ ID NO:10～12所示的检测猴痘病毒的上下游引物和探针。3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述第三核酸组合物还包括：如SEQ ID NO:16～18所示的检测艾滋病毒的上下游引物和探针。4.根据权利要求2或3所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括第四核酸组合物，所述第四核酸组合物包括用于检测内标的上下游引物及探针为如SEQ ID NO:19所示的内标上游引物、如SEQ ID NO:20所示的内标下游引物，和如SEQ ID NO:21所示的内标...

【专利技术属性】
技术研发人员：许思瑶，孙青芝，谭德勇，王剑，唐奕昕，刘佳，戴立忠，
申请(专利权)人：圣湘生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：