【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学体外核酸检测，具体涉及检测社区获得性肺炎病原体的组合物、试剂盒及检测方法。
技术介绍
1、肺炎链球菌(streptococcus pneumoniae，sp)是一种革兰阳性球菌，广泛分布于自然界，2017年世界卫生组织(who)将肺炎链球菌列为12种重点病原体之一，据统计数据显示每年有超过1000万人因肺炎链球菌感染而死亡。肺炎链球菌有荚膜，根据荚膜多糖抗原的不同，可分为84个血清型，多数不致病或致病力弱，其中1-3型致病力强。人感染后主要引起人类大叶性肺炎，可继发胸膜炎、脓胸，也可引起中耳炎、乳突炎、副鼻窦炎、脑膜炎和败血症等。肺炎链球菌也是引起社区获得性肺炎的重要病原菌，约50％的社区获得性肺炎由肺炎链球菌所致。
2、流感嗜血杆菌(haemophilus influenzae，hi)，简称嗜血杆菌或流感杆菌，属孤菌科嗜血杆菌属，是一种没有运动力的革兰氏阴性杆菌。流感嗜血杆菌是嗜血杆菌属中对人有致病性的最常见细菌。当机体抵抗力低下或免疫系统不健全时，即可引起感染，是引起儿童社区获得性肺炎的常见病原菌，尤其是b型流感嗜血杆菌的毒性最强，临床感染病例最多。能引起肺炎、化脓性扁桃体炎、会厌炎、中耳炎等感染性疾病，还可引起脑膜炎、败血症等侵袭性感染，严重威胁儿童的健康。在我国，流感嗜血杆菌是引起儿童呼吸道感染的重要病原菌。
3、肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae，mp)是一种常见的可引起呼吸道感染的病原体，介于细菌与病毒之间，是在有氧或无氧环境中均能独立存活的最小微生
4、鹦鹉热衣原体(chlamydophila psittaci，cp)是一种专性细胞内寄生、以鸟类和人为宿主的人兽共患病原体，感染人类可引起所谓的“鹦鹉热”，表现为非特异性流感症状或社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia,cap)，但临床表现差异大：从无症状携带到严重并发症，如心内膜炎、心肌炎、脑炎、多器官衰竭甚至死亡。由于其可通过气溶胶传播，鹦鹉热衣原体被归类为可能的生物恐怖剂。近几年，鹦鹉热感染事件在世界范围内经常报道，绝大多数病例为散发性感染。家禽养殖工人和宠物鸟主人的感染风险较高，易发生鸟类到人的传播。
5、社区获得性肺炎(community acquired pneumonia，cap)是指在医院外罹患的感染性肺实质(含肺泡壁，即广义上的肺间质)炎症，包括具有明确潜伏期的病原体感染而在入院后平均潜伏期内发病的肺炎。常见病原体包括细菌、病毒、支原体和衣原体四大类。社区获得性肺炎的临床表现主要有发热、咳嗽、咳痰、呼吸困难等。患者可能还会出现胸痛、头痛、肌肉疼痛等症状，严重的感染可能会导致休克、呼吸衰竭等并发症。目前传统检测社区获得性肺炎的实验室金标准为痰培养，但痰培养耗时长，对细菌、支原体和衣原体要求高，活菌不易获取。对于感染患者而言，需要快速区分具有类似症状的社区获得性肺炎病原体，对后续的防控、治疗以及采取针对性措施提供指导，因此本领域需求一种快速检测并区分社区获得性肺炎常见病原体的相关产品。
技术实现思路
1、为了解决上述技术问题，本专利技术的目的在于提供检测社区获得性肺炎病原体的组合物、试剂盒及检测方法，以实现对社区获得性肺炎病原体快速、高灵敏度、高精密度、高特异性的检测。
2、本专利技术提供一种检测社区获得性肺炎病原体的组合物，所述组合物包括组分a、组分b、组分c、组分d中的至少一种；
3、所述组分a包括如seq id no:1～3所示的核苷酸序列，所述组分a用于检测流感嗜血杆菌；
4、所述组分b包括如seq id no:4～6所示的核苷酸序列，所述组分b用于检测肺炎支原体；
5、所述组分c包括如seq id no:7～9所示的核苷酸序列，所述组分c用于检测肺炎链球菌；
6、所述组分d包括如seq id no:10～12所示的核苷酸序列，所述组分d用于检测鹦鹉热衣原体。
7、本专利技术经过对肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎支原体、鹦鹉热衣原体全基因组序列分析，对其保守区域的序列进行特异性引物(上游引物和下游引物)探针设计，提供的检测社区获得性肺炎病原体的组合物能够实现对肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎支原体、鹦鹉热衣原体的检测和区分，而且灵敏度高、精密度高、特异性高，有助于提高检测社区获得性肺炎病原体的检测效率，也对精准用药提供了一定的指导，在检测社区获得性肺炎病原体的检测领域有良好的应用前景。
8、优选地，所述组合物包括组分a、组分b、组分c、组分d中的至少两种。
9、优选地，所述组合物包括组分a、组分b、组分c和组分d。
10、本方案检测社区获得性肺炎病原体的组合物包括组分a、组分b、组分c和组分d，可实现同时对肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎支原体、鹦鹉热衣原体的联检和区分，不存在非特异扩增，社区获得性肺炎各病原体对应的上下游引物和对应的探针之间相互影响小，整体检测效果好。
11、优选地，所述组合物还包括内标。
12、优选地，所述组分a、所述组分b、所述组分c、所述组分d和所述内标均包括探针，所述探针上标记有荧光报告基团。
13、本专利技术提供一种检测社区获得性肺炎病原体的试剂盒，包括所述检测社区获得性肺炎病原体的组合物。
14、优选地，所述试剂盒还包括核酸释放试剂、核酸提取试剂、dna聚合酶、ung酶、dntps、pcr缓冲液以及mg2+中的至少一种。
15、优选地，所述检测社区获得性肺炎病原体的试剂盒还包括阳性质控品、阴性质控品中的至少一种。
16、优选地，所述阳性质控品为含有社区获得性肺炎病原体靶序列的质粒。
17、本专利技术还提供一种用于非诊断目的检测社区获得性肺炎病原体的方法，包括以下步骤：
18、s1、提取待测样本的核酸，得到核酸样本；
19、s2、使用权利要求6～9任一项所述检测社区获得性肺炎病原体的试剂盒对所述核酸样本进行pcr扩增；
20、s3、获得并分析结果。
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1.一种检测社区获得性肺炎病原体的组合物，其特征在于，所述组合物包括组分A、组分B、组分C、组分D中的至少一种；
2.根据权利要求1所述检测社区获得性肺炎病原体的组合物，其特征在于，所述组合物包括组分A、组分B、组分C、组分D中的至少两种。
3.根据权利要求1所述检测社区获得性肺炎病原体的组合物，其特征在于，所述组合物包括组分A、组分B、组分C和组分D。
4.根据权利要求1所述检测社区获得性肺炎病原体的组合物，其特征在于，所述组合物还包括内标。
5.根据权利要求4所述检测社区获得性肺炎病原体的组合物，其特征在于，所述组分A、所述组分B、所述组分C、所述组分D和所述内标均包括探针，所述探针上标记有荧光报告基团。
6.一种检测社区获得性肺炎病原体的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1～5任一项所述检测社区获得性肺炎病原体的组合物。
7.根据权利要求6所述检测社区获得性肺炎病原体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括核酸释放试剂、核酸提取试剂、DNA聚合酶、UNG酶、dNTPs、PCR缓冲液以及Mg2+中的至少一种。
8.根据权利要求6或7所述检测社区获得性肺炎病原体的试剂盒，其特征在于，所述检测社区获得性肺炎病原体的试剂盒还包括阳性质控品、阴性质控品中的至少一种。
9.根据权利要求8所述检测社区获得性肺炎病原体的试剂盒，其特征在于，所述阳性质控品为含有社区获得性肺炎病原体靶序列的质粒。
10.一种用于非诊断目的检测社区获得性肺炎病原体的方法，其特征在于，包括以下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种检测社区获得性肺炎病原体的组合物，其特征在于，所述组合物包括组分a、组分b、组分c、组分d中的至少一种；
2.根据权利要求1所述检测社区获得性肺炎病原体的组合物，其特征在于，所述组合物包括组分a、组分b、组分c、组分d中的至少两种。
3.根据权利要求1所述检测社区获得性肺炎病原体的组合物，其特征在于，所述组合物包括组分a、组分b、组分c和组分d。
4.根据权利要求1所述检测社区获得性肺炎病原体的组合物，其特征在于，所述组合物还包括内标。
5.根据权利要求4所述检测社区获得性肺炎病原体的组合物，其特征在于，所述组分a、所述组分b、所述组分c、所述组分d和所述内标均包括探针，所述探针上标记有荧光报告基团。
6.一种检测社区获...
【专利技术属性】
技术研发人员：黎涛，贺莉，程星，谭德勇，吴康，戴立忠，
申请(专利权)人：圣湘生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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