一种高产β-葡萄糖苷酶的酿酒酵母及应用制造技术

本发明专利技术属于生物工程技术领域，本发明专利技术涉及一种高产β‑葡萄糖苷酶的酿酒酵母及应用。酿酒酵母是高产β‑葡萄糖苷酶的酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae pYES2(G418)‑bgl，该菌株于2022年10月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25945。本发明专利技术所用菌株与初始菌相比，β‑葡萄糖苷酶的酶活达到726.59±4.36U/mL，是初始菌株Bacillus licheniformis 15‑4的6.6倍，基因表达水平是初始菌株的4.3倍。抗氧化活性显著增强，具有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程，本专利技术涉及一种高产β-葡萄糖苷酶的酿酒酵母及应用。

技术介绍

1、淡豆豉为历版《中国药典》唯一收载的药食同源发酵类中药，具有解表除烦、宣发郁热之功效。淡豆豉的发酵基质为大豆，大豆蛋白和异黄酮苷类为其主要成分，通过发酵，β-葡萄糖苷酶可将异黄酮苷转化为苷元。

2、β-葡萄糖苷酶(beta-glucosidase,bgl)，全称为β-d-葡萄糖苷水解酶，又称为纤维二糖酶或龙胆二糖酶，作用于末端非还原性的β-d-葡萄糖苷键，使其水解，产生β-d-葡萄糖及相应配基。β-葡萄糖苷酶广泛存在于自然界各种微生物中和动植物体内，但该酶活力普遍较低，很大程度上限制了其酶大规模、高效的生产应用，为了获得活力更高的β-葡萄糖苷酶，现有技术通过基因工程手段提高β-葡萄糖苷酶活性。

3、其中，尽管有学者已经成功构建了β-葡萄糖苷酶的工程菌株，但是其酶活普遍较低。例如，邵金辉等从扣囊复膜孢酵母中成功克隆出β-葡萄糖苷酶基因，但未进行诱导表达；周衍等从扣囊复膜孢酵母中克隆出β-葡萄糖苷酶基因并在酿酒酵母中表达成功，其β-葡萄糖苷酶活力本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高产β-葡萄糖苷酶的酿酒酵母，其特征在于，是高产β-葡萄糖苷酶的酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae pYES2(G418)-bgl，该菌株于2022年10月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25945。

2.根据权利要求1所述的一种高产β-葡萄糖苷酶的酿酒酵母，其特征在于，高产β-葡萄糖苷酶的酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae pYES2(G418)-bgl包含重组质粒与酿酒酵母表达宿主，所述重组质粒包含β-葡萄糖苷酶基因以及G418筛选标记的pYES2(G418)表达载体，...

【技术特征摘要】

1.一种高产β-葡萄糖苷酶的酿酒酵母，其特征在于，是高产β-葡萄糖苷酶的酿酒酵母saccharomyces cerevisiae pyes2(g418)-bgl，该菌株于2022年10月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.25945。

2.根据权利要求1所述的一种高产β-葡萄糖苷酶的酿酒酵母，其特征在于，高产β-葡萄糖苷酶的酿酒酵母saccharomyces cerevisiae pyes2(g418)-bgl包含重组质粒与酿酒酵母表达宿主，所述重组质粒包含β-葡萄糖苷酶基因以及g418筛选标记的pyes2(g418)表达载体，所述β-葡萄糖苷酶基因bgl来自地衣芽孢杆菌。

3.权利要求1所述的一种高产β-葡萄糖苷酶的酿酒酵母的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述的一种新型高产β-葡萄糖苷酶的酿酒酵母基因工程菌的构建方法，其特征在于，步骤a)中，获取β-葡萄糖苷酶基因的引物序列如下(5'---3')：

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【专利技术属性】
技术研发人员：史海粟，乌日娜，王伟明，闫亦然，武俊瑞，周岩，徐菁雯，霍金海，史琳，王楠，胡心玉，赵玉莲，
申请(专利权)人：沈阳农业大学，
类型：发明
国别省市：