一种GC-MS测定左卡尼汀中的潜在基因毒性杂质的方法技术

本发明专利技术公开了一种GC

【技术实现步骤摘要】
一种GC
‑
MS测定左卡尼汀中的潜在基因毒性杂质的方法


[0001]本专利技术属于物质检测
，涉及一种GC
‑
MS(气相色谱
‑
质谱联用)测定左卡尼汀中潜在基因毒性杂质的方法，尤其是涉及一种GC
‑
MS测定左卡尼汀中2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇的方法。

技术介绍

[0002]左卡尼汀是用于治疗慢性肾衰长期血透病人因继发性肉碱缺乏产生的一系列并发症状的药物，主要用于治疗如心肌病、骨骼肌病、心律失常、高脂血症，以及低血压和透析中肌痉挛等。
[0003]左卡尼汀化学名是(3R)
‑
羟基
‑
(三甲基铵)丁酸内盐，在化学合成过程中可能会引入潜在基因毒性杂质：2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇。
[0004]左卡尼汀为左卡尼汀相关制剂中主要活性成分，基因毒性杂质的可接受限度一般根据毒理学关注阈值(TTC)限度计算。
[0005][0006]表1.TTC限度
[0007]治疗期≤1个月1～12个月1～10年≥10年日摄入量(μg/d)12020101.5
[0008]左卡尼汀作为注射剂的主要活性成分，其最大日剂量是2g，按照最严格的日摄入量1.5μg/d计算，基因毒性杂质的可接受限度为0.75ppm。
[0009]左卡尼汀作为口服制剂的主要活性成分，其最大日剂量是3g，按照最严格的日摄入量1.5μg/d计算，基因毒性杂质的可接受限度为0.5ppm。
[0010]按照最严标准对左卡尼汀的执行控制，0.5ppm作为潜在基因毒性杂质的可接受限度。

技术实现思路

[0011]本专利技术的目的在于建立一种测定左卡尼汀潜在基因毒性杂质2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇的方法。专利技术人首先采用常用的GC(气相色谱法)对2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇进行了方法开发与预验证，在预验证的过程中发现，由于2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇的限度低，GC的灵敏度不能满足要求，因此在GC方法的基础上面调整为GC
‑
MS的方法进行验证。结果表明GC
‑
MS可以有效的、准确的检测2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇。
[0012]本专利技术的目的在于建立一种GC
‑
MS测定左卡尼汀潜在基因毒性杂质2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇的方法，以更好的控制左卡尼汀的质量。
[0013]本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：
[0014]一种GC
‑
MS测定左卡尼汀中的潜在基因毒性杂质的方法，包括：
[0015]配制供试品溶液：取左卡尼汀约0.2～3g，精密称定，置于离心管中，加水1～2ml，振摇使样品溶解，加入丙酮5ml，先充分的振摇进行提取，再密封离心，取上清液，即为供试品溶液；
[0016]配制对照品溶液：各取适量2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇，精密称定，用丙酮稀释成每1ml溶液中含约0.02～0.2μg 2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和约0.02～0.2μg1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇的混合溶液；
[0017]分别对对照品溶液、供试品溶液进行GC
‑
MS检测，采用外标法测定左卡尼汀中杂质2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇的含量。
[0018]专利技术人基于：左卡尼汀是离子化合物，易溶于水，不溶于丙酮。根据GC
‑
MS中不可以使用水或者含水较高的物质，因此把左卡尼汀用少量的水溶解后，用丙酮进行提取后再进行GC
‑
MS检测。控制用水量在本专利技术范围能可以有效分层，且样品可以完全溶解；若用水量过大，则会导致无法分层且会丙酮和水互溶，并出现左卡尼汀析出的现象象；若用水量过少，则会导致左卡尼汀样品不能完全溶解在水中，从而使未溶解部分的左卡尼汀样品中的2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇不能被有效提取。
[0019]优选的，配制供试品溶液：取左卡尼汀约2g，精密称定，置于离心管中，加水1～2ml，振摇使样品溶解，加入丙酮5ml，先充分的振摇进行提取，再密封离心，取上清液。或配制供试品溶液：取左卡尼汀约0.2～3g，精密称定，置离心管中，加水1～1.4ml，振摇使样品溶解，加入丙酮5ml，先充分的振摇进行提取，再密封离心，取上清液。
[0020]更优选的，配制供试品溶液：取左卡尼汀约2g，精密称定，置离心管中，加水1～1.4ml，振摇使样品溶解，加入丙酮5ml，先充分的振摇进行提取，再密封离心，取上清液。
[0021]优选的，配制对照品溶液：各取适量2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇，精密称定，用丙酮定量稀释成每1ml溶液中含0.2μg 2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和0.2μg 1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇的混合溶液。
[0022]气相色谱条件为：采用以聚乙二醇为固定相的毛细管柱为色谱柱，起始柱温为40～120℃，维持2～10分钟，以速率20℃/min升温至180～220℃，保持5～15分钟，进样口温度为200℃，检测器温度为230℃，进样体积0.1～2μl。
[0023]优选的，所述的色谱柱是以聚乙二醇为固定性的毛细管柱(柱长30m，内径0.25mm，膜厚度0.25μm)。
[0024]优选的，气相色谱条件为：DB
‑
WAXert色谱柱(柱长30m
×
内径0.25mm，膜厚度0.25μm)，起始柱温为100～120℃，维持2分钟，以速率20℃/min升温至200℃，保持5分钟，进样口温度为200℃，检测器温度为230℃，进样体积1μl。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种GC
‑
MS测定左卡尼汀中的潜在基因毒性杂质的方法，其特征在于：包括：配制供试品溶液：取左卡尼汀0.2～3g，精密称定，置于离心管中，加水1～2ml，振摇使样品溶解，加入丙酮5ml，先振摇提取，再密封离心，取上清液；配制对照品溶液：各取适量2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇，精密称定，用丙酮稀释成每1ml溶液中含0.02～0.2μg 2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和0.02～0.2μg1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇的混合溶液；分别对对照品溶液、供试品溶液进行GC
‑
MS检测，采用外标法测定左卡尼汀中2,3
‑
二氯
‑1‑
丙醇和1,3
‑
二氯
‑2‑
丙醇的含量。2.根据权利要求1所述的GC
‑
MS测定左卡尼汀中的潜在基因毒性杂质的方法，其特征在于：配制供试品溶液：取左卡尼汀2g，精密称定，置于离心管中，加水1～2ml，振摇使样品溶解，加入丙酮5ml，先振摇提取，再密封离心，取上清液。3.根据权利要求1所述的GC
‑
MS测定左卡尼汀中的潜在基因毒性杂质的方法，其特征在于：配制供试品溶液：取左卡尼汀0.2～3g，精密称定，置离心管中，加水1～1.4ml，振摇使样品溶解，加入丙酮5ml，先振摇提取，再密封离心，取上清液。4.根据权利要求1、2或3所述的GC
‑
MS测定左卡尼汀中的潜在基因毒性杂质的方法，其特征在于：配制供试品溶液：取左卡尼汀2g，精密称定，置离心管中，加水1～1.4ml，振摇使样品溶解，加入丙酮5ml，先振摇提取，再密封离心，取上清液。5.根据权利要求1所述的GC
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MS测定左卡尼汀中的潜在基因毒性杂质的方法，其特征在于：配制对照品溶液：各取适量2,3
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二氯
‑1‑
丙醇和1,...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙春霞，张根元，王松琴，李维思，
申请(专利权)人：南京国星生物技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：