【技术实现步骤摘要】
一种血液基因组DNA的提取方法
[0001]本专利技术涉及DNA提取
,具体涉及一种血液基因组DNA的提取方法。
技术介绍
[0002]DNA提取是分子生物学研究的基础技术,目前已经发展了多种从血样中提取DNA的方法。在血液中含有大量的蛋白质及盐类,其性质与核酸的物理性质非常相似。在血样DNA提取过程中处理不当极易与DNA共同沉淀下来,并且难以分离,直接导致DNA纯度较低,影响后续实验结果。
[0003]目前的血液基因检测实验中,常用方法是购买核酸提取试剂盒进行提取或纯化;然而,现有试剂盒的DNA提取方法对DNA的提取效率和纯度较低,直接影响检测结果。
[0004]有鉴于此,特提出本专利技术。
技术实现思路
[0005]本专利技术的目的在于提供一种血液基因组DNA的提取方法,本专利技术提取方法通过特定裂解液对血液样本进行处理,能够充分提取血液样本中的DNA并有效去除杂质。
[0006]为了实现本专利技术的上述目的,特采用以下技术方案:
[0007]本专利技术第一方面提供了 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种血液基因组DNA的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:(a)获取血液样本,向血液样本中加第一细胞裂解液并混匀,然后,再经离心,收集沉淀,得到第一沉淀物,其中,所述第一细胞裂解液包括以下组分:0.3~0.5M的氯化铵、0.01M~0.2M的碳酸氢钾、0.5~1.5%(v/v)的曲拉通100、0.001~0.05M的乙二胺四乙酸;(b)向第一沉淀物中加入第二细胞裂解液并混匀,然后,再经离心,收集沉淀,得到第二沉淀物,其中,所述第二细胞裂解液包括以下组分:pH值为7.5~9的Tris
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HCl 0.01~0.05M,氯化钠0.1~0.2M、乙二胺四乙酸0.05~0.2M、SDS 0.8%~1.2%和蔗糖0.3~0.4M;(c)向第二沉淀物中加入蛋白酶K溶液并反复吹打,再加入SDS溶液进行处理,得到处理液;(d)向处理液中加入氯化钠溶液并混匀,离心,收集上清液;(e)向上清液中加入乙酸钠溶液和异丙醇并静置、离心,收集沉淀,得到第三沉淀物;(f)向第三沉淀物中加入乙醇溶液并混匀、离心,收集沉淀,即得所述血液基因组DNA。2.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步骤(a)中,血液样本与第一细胞裂解液的体积比为1∶(1~5)。3.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步骤(a)中,离心转速为10000~12000r/m...
【专利技术属性】
技术研发人员:张向阳,初国海,刘济忠,屈阳,钟瑶,
申请(专利权)人:深圳东亿医学检验实验室,
类型:发明
国别省市:
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