抗TROP-2/PD-L1双特异性抗体制造技术

本发明专利技术涉及一种抗TROP

【技术实现步骤摘要】
抗TROP
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2/PD
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L1双特异性抗体


[0001]本专利技术属于肿瘤治疗和生物
，涉及一种抗TROP
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2和PD
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L1的双特异性抗体。

技术介绍

[0002]人滋养层细胞表面抗原2(human trophoblast cell surface antigen 2,TROP
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2)是由TACSTD2基因编码表达的细胞表面糖蛋白。TROP
‑
2为单次跨膜的I型膜蛋白，由323个氨基酸构成，其中信号肽26个氨基酸，胞外区248个氨基酸，跨膜区23个氨基酸，胞内区26个氨基酸。截至目前，TROP
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2的配体蛋白还没有鉴定到，因此对其生理生化功能还不十分明确。但是大量的临床研究和文献报道，TROP
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2蛋白在各种人类上皮癌中高表达并且与患者的预后不良和癌细胞转移密切相关，包括乳腺癌、肺癌、胃癌、胰腺癌、前列腺癌、宫颈癌等。美国FDA已经批准TROP
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2抗体偶联药物
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sacituzumab govitecan用于转移性三阴性乳腺癌的治疗。
[0003]PD
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1蛋白(人程序性细胞死亡受体
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1)是CD28超家族的一个成员，激活的T细胞表面表达的PD
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1蛋白和配体PD
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L1(programmed cell death
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Ligand1)和PD
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L2(programmed cell death
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Ligand2)相互作用，会抑制T细胞的免疫反应。在各种实体瘤和血液系统恶性肿瘤中均发现了PD
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L1和PD
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L2的高表达，越来越多的证据表明肿瘤细胞利用PD
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1和PD
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L1介导的免疫抑制反应逃避免疫监视。Atezolizumab单抗是全球第一个获批的PD
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L1单抗药物，用于局部晚期或转移性尿路上皮癌和非小细胞肺癌等肿瘤的治疗。
[0004]双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb)也称为双功能抗体，是同时靶向两种不同抗原或相同抗原不同表位的特异性药物。这种双重特异性打开了广泛的应用领域，包括将T细胞重定向至肿瘤细胞周围、同时阻断两个不同的信号通路等。
[0005]然而，目前本领域尚缺乏令人满意的针对TROP
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2和PD
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L1的双特异性抗体。因此，本领域亟待开发一种抗TROP
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2和PD
‑
L1的双特异性抗体。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种抗TROP
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2和PD
‑
L1的双特异性抗体及其制备方法和应用。
[0007]本专利技术的目的在于提供一种能与TROP
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2和PD
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L1特异结合的双特异性抗体；提供编码所述双特异性抗体的核苷酸分子；提供包含所述核苷酸分子的表达载体；提供包含所述表达载体的宿主细胞；提供所述双特异性抗体的制备方法；提供包含所述双特异性抗体的药物组合物；提供所述双特异性抗体在制备药物中的应用。
[0008]在本专利技术的第一方面，提供了一种双特异性抗体，所述双特异性抗体包含：
[0009]第一抗原结合结构域D1；和
[0010]第二抗原结合结构域D2；
[0011]其中，D1特异性结合靶分子TROP
‑
2蛋白；D2特异性结合靶分子PD
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L1蛋白；
[0012]所述D1为特异性结合TROP
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2蛋白的抗体或其抗原结合片段；和/或
[0013]所述D2为特异性结合PD
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L1蛋白的抗体或其抗原结合片段；
[0014]其中，所述的抗原结合片段的结构选自下组：(i)Fab片段；(ii)F(ab')2片段；(iii)Fv片段；或(iv)单链Fv(scFv)。
[0015]在另一优选例中，所述的特异性结合TROP
‑
2蛋白的抗体包括：单链抗体、双链抗体、纳米抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、鼠源抗体、人源化抗体和双特异性抗体。
[0016]在另一优选例中，所述的特异性结合PD
‑
L1蛋白的抗体包括：单链抗体、双链抗体、纳米抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、鼠源抗体、人源化抗体和双特异性抗体。
[0017]在另一优选例中，所述的D1和/或D2为IgG抗体。
[0018]在另一优选例中，所述IgG抗体为IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗体。
[0019]在另一优选例中，所述的D1和/或D2为scFv。
[0020]在另一优选例中，所述D1为抗TROP
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2的scFv。
[0021]在另一优选例中，所述D2为抗PD
‑
L1的IgG抗体。
[0022]在另一优选例中，所述D1包含一个、两个、三个或多个抗TROP
‑
2的scFv。
[0023]在另一优选例中，所述D2包含一个、两个、三个或多个抗PD
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L1的IgG抗体。
[0024]在另一优选例中，所述D1连接到所述的抗PD
‑
L1抗体的选自下组的区域：重链可变区、重链恒定区、轻链可变区、轻链恒定区或其组合。
[0025]在另一优选例中，所述D1为抗TROP
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2的scFv；和所述D2为抗PD
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L1的IgG抗体，其中D1连接在D2的重链可变区末端，或D1连接在D2的重链恒定区末端。
[0026]在另一优选例中，所述D1为抗TROP
‑
2的IgG抗体。
[0027]在另一优选例中，所述D2为抗PD
‑
L1的scFv。
[0028]在另一优选例中，所述D1包含一个、两个、三个或多个抗TROP
‑
2的IgG抗体。
[0029]在另一优选例中，所述D2包含一个、两个、三个或多个抗PD
‑
L1的scFv。
[0030]在另一优选例中，所述D2连接到所述的抗TROP
‑
2抗体的选自下组的区域：重链可变区、重链恒定区、轻链可变区、轻链恒定区或其组合。
[0031]在另一优选例中，所述D1为抗TROP
‑
2的IgG抗体；和所述D2为抗PD
‑
L1的scFv，其中D2连接在D1的重链可变区末端，或D2连接在D1的重链恒定区末端。
[0032]在另一优选例中，所述D1和所述D2通过接头或直接相连。
[0033]在另一优选例中，所述接头的序列为(G4S本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种双特异性抗体，其特征在于，所述双特异性抗体包含：第一抗原结合结构域D1；和第二抗原结合结构域D2；其中，D1特异性结合靶分子TROP
‑
2蛋白；D2特异性结合靶分子PD
‑
L1蛋白；所述D1为特异性结合TROP
‑
2蛋白的抗体或其抗原结合片段；和/或所述D2为特异性结合PD
‑
L1蛋白的抗体或其抗原结合片段；其中，所述的抗原结合片段的结构选自下组：(i)Fab片段；(ii)F(ab')2片段；(iii)Fv片段；或(iv)单链Fv(scFv)。2.如权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于，所述双特异性抗体为同源二聚体，其从N端到C端具有式Ia、Ib、IIa或IIb所示的结构：其中，VL
A
代表抗TROP
‑
2抗体的轻链可变区；VH
A
代表抗TROP
‑
2抗体的重链可变区；VL
B
代表抗PD
‑
L1抗体的轻链可变区；VH
B
代表抗PD
‑
L1抗体的重链可变区；CH代表重链恒定区；CL代表轻链恒定区；L1、L2各自独立地为键或接头；“～”代表二硫键或共价键；
“‑”
代表肽键；其中，所述双特异性抗体具有同时结合TROP
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2以及结合PD
‑
L1的活性。3.如权利要求2所述的双特异性抗体，其特征在于，所述抗PD
‑
L1抗体包含以下三个互补决定区HCDR：SEQ ID NO.7所示的HCDR1；SEQ ID NO.8所示的HCDR2；和SEQ ID NO.9所示的HCDR3；和所述抗PD
‑
L1抗体包含以下三个互补决定区LCDR：SEQ ID NO.10所示的LCDR1；SEQ ID NO.11所示的LCDR2；和SEQ ID NO.12所示的LCDR3。4.如权利要求2所述的双特异性抗体，其特征在于，所述抗TROP
‑
2抗体包含以下三个互
补决定区HCDR：SEQ ID NO.1所示的HCDR1；SEQ ID NO.2所示的HCDR2；和SEQ ID NO.3所示的HCDR3；和所述抗TROP
‑
2抗体包含以下三个互补决定区LCDR：SEQ ID NO.4所示的LCDR1；SEQ ID NO.5所示的LCDR2；和SEQ ID NO.6所示的LCDR3。5.如权利要求2所述的双特异性抗体，其特征在于，所述抗PD
‑
L1抗体的重链可变区如SEQ ID NO.15所示；所述抗PD

【专利技术属性】
技术研发人员：王定和，朱祯平，黄浩旻，
申请(专利权)人：泽达生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：