黄嘌呤脱氢酶(XDH)iRNA组合物及其使用方法技术

本发明专利技术涉及靶向黄嘌呤脱氢酶(XDH)基因的RNAi剂例如dsRNA剂。本发明专利技术还涉及使用这种RNAi剂抑制XDH基因的表达的方法，以及在受试者中治疗或预防XDH相关疾病的方法。者中治疗或预防XDH相关疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】黄嘌呤脱氢酶(XDH)iRNA组合物及其使用方法
[0001]相关申请
[0002]本申请要求于2020年6月18日提交的美国临时申请第63/040,587号和2021年2月26日提交的美国临时申请第63/153,983号的优先权权益。每个前述申请的全部内容通过引用并入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请包含已以ASCII格式电子提交的序列表，并且其全部内容通过引用并入本文。该ASCII拷贝创建于2021年6月10日，名为121301
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12920_SL.txt，大小为714,554字节。

技术介绍

[0005]尿酸的肾清除率降低是多种因素的结果，包括尿酸转运蛋白如SLC2A9、ABCG2等的缺陷，由于肾病、甲状腺功能减退、容量收缩和容量衰竭、酸中毒、铅中毒和由于尿调节素沉积引起的家族性肾病而导致的肾排泄减少；以及由于糖尿病中的高胰岛素血症或胰岛素抵抗引起的肾清除率改变。尿酸合成增加与以下相关：高尿酸血症加高尿酸尿症；先天性代谢缺陷，如Lesch Nyhan/HPRT缺乏症、PRPP合成酶过度活性和葡萄糖
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磷酸脱氢酶缺乏症(Von Gierke病/糖原贮积病Ia型)；某些高细胞转化率的情况(如肿瘤溶解综合征)；某些高ATP转化率的情况(如糖原贮积病、组织缺血)。此外，慢性肾病、高血压、代谢综合征和高果糖摄入等病况可能会导致尿酸合成增加和尿酸清除率降低两者。
[0006]慢性血清尿酸升高(慢性高尿酸血症)，通常定义为血清尿酸盐水平大于6.8mg/dl(大于360mmol/)(高于该值的水平即超过生理饱和阈值(Mandell,Cleve.Clin.Med.75:S5
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S8,2008))，与许多疾病相关。例如，痛风的特征在于急性炎症性关节炎的反复发作，这是由关节中尿酸晶体(通常由于尿酸的肾清除不足或尿酸产生过多)的炎症反应引起的。果糖相关性痛风与在肾脏、肠道和肝脏中表达的转运蛋白变体有关。慢性尿酸升高还与非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、代谢障碍、心血管疾病、2型糖尿病以及与氧化应激、慢性低度炎症和胰岛素抵抗相关的病症有关(Xu et al.,J.Hepatol.62:1412
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1419,2015；Cardoso et al.,J.Pediatr.89:412
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418,2013；Sertoglu et al.,Clin.Biochem.,47:383
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388,2014).
[0007]尿酸(uric acid)(在本文中也被称为尿酸盐(urate))是内源性和饮食性嘌呤代谢的最终代谢物。分别催化次黄嘌呤氧化为黄嘌呤和催化黄嘌呤氧化为尿酸的黄嘌呤氧化酶(XO)(EC 1.1.3.22)和黄嘌呤脱氢酶(XDH)(EC 1.17.1.4)是同一种酶的相互转化形式。所述酶是包含钼喋呤的黄素蛋白，由两个相同的约145kDa的亚基组成。来自哺乳动物来源(包括人)的这种酶是以脱氢酶形式合成的，但它可以通过巯基残基的氧化或通过蛋白水解容易地转化为氧化酶形式。XDH主要在肠和肝脏中表达，但也在包括脂肪组织在内的其他组织中表达。
[0008]别嘌呤醇和非布索坦是所述酶的XDH形式的抑制剂，通常用于治疗痛风。然而，在患有痛风常见并发症特别是肾功能下降(例如，由于慢性肾脏疾病或肝脏损伤)的患者中，它们是禁用的。由于疾病或病状导致的器官功能受限，或者是由于与用于治疗这
些病状的药物的不良药物相互作用，它们在患有代谢综合征、高血压、血脂异常、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)或非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、心血管疾病或糖尿病(1型或2型)的患者中的使用也可能受到限制。
[0009]目前，用于痛风的治疗不能完全满足患者的需求。因此，需要对将受益于XDH基因表达减少的受试者(例如患有XDH相关疾病或病症(例如痛风))的受试者进行额外的治疗。

技术实现思路

[0010]本专利技术提供了iRNA组合物，其引起由RNA诱导的沉默复合物(RISC)介导的编码黄嘌呤脱氢酶(XDH)的基因的RNA转录本的裂解。XDH可以位于细胞内，例如受试者(如人类受试者)的细胞内。
[0011]因此，在一个方面，本专利技术提供了一种双链核糖核酸(dsRNA)剂，其用于抑制XDH在细胞的中表达，其中所述dsRNA剂包含形成双链区域的有义链和反义链，其中所述有义链包含与SEQ ID NO:1的核苷酸序列相异不超过0、1、2或3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，所述反义链包含与SEQ ID NO:2的核苷酸序列相异不超过1、2或3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。在某些实施方案中，所述有义链包含SEQ ID NO:1的核苷酸序列的至少15个连续核苷酸，所述反义链包含SEQ ID NO:2的核苷酸序列的至少15个连续核苷酸。在某些实施方案中，所述有义链包含SEQ ID NO:1的核苷酸序列的至少17个连续核苷酸，所述反义链包含SEQ ID NO:2的核苷酸序列的至少17个连续核苷酸。在某些实施方案中，所述有义链包含SEQ ID NO:1的核苷酸序列的至少19个连续核苷酸，所述反义链包含SEQ ID NO:2的核苷酸序列的至少19个连续核苷酸。
[0012]在另一方面，本专利技术提供了一种双链核糖核酸(dsRNA)，其用于抑制黄嘌呤脱氢酶(XDH)在细胞的中表达，其中所述dsRNA包含形成双链区域的有义链和反义链，其中所述反义链包含与编码XDH的mRNA的互补性区域，并且其中所述互补性区域包含与表2至表3和表6至表7中任一表中的任一反义核苷酸序列相异不超过0、1、2或3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。在某些实施方案中，所述互补性区域包含表2至表3和表6至表7中任一表中的任一反义核苷酸序列的至少15个连续核苷酸。在某些实施方案中，所述互补性区域包含表2至表3和表6至表7中任一表中的任一反义核苷酸序列的至少17个连续核苷酸。在某些实施方案中，所述互补性区域包含表2至表3和表6至表7中任一表中的任一反义核苷酸序列的至少19个连续核苷酸。在某些实施方案中，所述互补性区域包含表2至表3和表6至表7中任一表中的任一反义核苷酸序列的至少20个连续核苷酸。在某些实施方案中，所述互补性区域包含表2至表3和表6至表7中任一表中的任一反义核苷酸序列的至少21个连续核苷酸。
[0013]在一方面，本专利技术提供了一种双链核糖核酸(dsRNA)，其用于抑制黄嘌呤脱氢酶(XDH)在细胞的中表达，其中所述dsRNA包含形成双链区域的有义链和反义链，其中所述有义链包含与SEQ ID NO:1的核苷酸226
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269、1318
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1352、1953
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1998、2351
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2394、2679
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2730、3867
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3916或4510
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4574的任一核苷酸序列相异不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种双链核糖核酸(dsRNA)，其用于抑制黄嘌呤脱氢酶(XDH)在细胞中的表达，其中所述dsRNA包含形成双链区域的有义链和反义链，其中所述反义链包含与表2至表3和表6至表7中任一表中的任一反义核苷酸序列相异不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。2.一种双链核糖核酸(dsRNA)，其用于抑制黄嘌呤脱氢酶(XDH)在细胞中的表达，其中所述dsRNA包含形成双链区域的有义链和反义链，其中所述有义链包含与SEQ ID NO:1的核苷酸15
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45、121
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162、226
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292、306
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338、379
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402、428
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458、495
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521、873
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907、1318
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1344、1381
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1407、1604
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1643、1700
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1723、1960
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1991、1996
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2029、2044
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2067、2128
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2174、2186
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2208、2289
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2345、2359
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2419、2689
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2722、2699
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2721、2774
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2797、2930
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2958、2987
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3064、3083
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3158、3195
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3221、3248
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3293、3352
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3405、3460
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3520、3524
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3571、3575
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3644、3870
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3963、4143
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4176、4259
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4315、4355
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4379、4395
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4467、4502
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4562、4577
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4648、4658
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4752、4815
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4854、5199
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5277、5284
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5310、5358
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5446或5677
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5713的任一核苷酸序列相异不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，并且所述反义链包含来自SEQ ID NO:2的对应核苷酸序列的至少15个连续核苷酸。3.一种双链核糖核酸(dsRNA)，其用于抑制黄嘌呤脱氢酶(XDH)在细胞中的表达，其中所述dsRNA包含形成双链区域的有义链和反义链，其中所述有义链包含与SEQ ID NO:1的核苷酸226
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269、1318
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1352、1953
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1998、2351
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2394、2679
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2730、3867
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3916或4510
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4574的任一核苷酸序列相异不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，并且所述反义链包含来自SEQ ID NO:2的对应核苷酸序列的至少15个连续核苷酸。4.一种双链核糖核酸(dsRNA)，其用于抑制黄嘌呤脱氢酶(XDH)在细胞中的表达，其中所述dsRNA包含形成双链区域的有义链和反义链，其中所述有义链包含与SEQ ID NO:1的核苷酸123
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143、229
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249、229
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251、230
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250、237
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259、241
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263、271
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291、1320
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1342、1321
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1341、1965
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1987、1971
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1993、2130
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2150、2682
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2704、2689
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2711、2690
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2710、2699
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2721、3880
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3900或3883
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3903的任一核苷酸序列相异不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，并且所述反义链包含来自SEQ ID NO:2的对应核苷酸序列的至少15个连续核苷酸。5.如权利要求1
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4中任一项所述的dsRNA剂，其中所述反义链包含与双链体的反义链核苷酸序列中的任一个相异不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，所述双链体选自由以下所组成的组：AD
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1395794.1、AD
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1136038.3、AD
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1395797.1、AD
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1135991.3、AD
‑
1297597.2、AD
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1395803.1、AD
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1395805.1、AD
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1395807.1、AD
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1395811.1、AD
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1297663.2、AD
‑
1136008.2、AD
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1395816.1、AD
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1136061.2、AD
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1135987.2、AD
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1395823.1、AD
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1136166.3和AD
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1136169。6.如权利要求1
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4中任一项所述的dsRNA剂，其中所述反义链包含双链体的反义链核苷酸序列中的任一个相异不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，所述双链体选自由以下所组成的组：AD
‑
1136091、AD
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1395794、AD
‑
1395805、AD
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1136008、AD
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1136038、AD
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1395823、AD
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1395816、AD
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1136061、AD
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1395811和AD
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1136166。7.如权利要求1
‑
4中任一项所述的dsRNA剂，其中所述有义链包含与SEQ ID NO:1的核苷酸2699
‑
2721的核苷酸序列相异不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。8.如权利要求1
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4中任一项所述的dsRNA剂，其中所述反义链包含与双链体AD
‑
1136091的反义链核苷酸序列相异不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。9.如权利要求1
‑
8中任一项所述的dsRNA剂，其中所述dsRNA剂包含至少一个经修饰的
核苷酸。10.如权利要求1
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9中任一项所述的dsRNA剂，其中所述有义链的基本所有核苷酸包含修饰；所述反义链的基本所有核苷酸包含修饰；或者所述有义链的基本所有核苷酸和所述反义链的基本所有核苷酸均包含修饰。11.如权利要求1
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10中任一项所述的dsRNA剂，其中所述有义链的所有核苷酸包含修饰；所述反义链的所有核苷酸都包含修饰；或者所述有义链的所有核苷酸和所述反义链的所有核苷酸均包含修饰。12.如权利要求9
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11中任一项所述的dsRNA剂，其中所述经修饰的核苷酸中的至少一个选自由以下组成的组：脱氧核苷酸，3'
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末端脱氧胸腺嘧啶(dT)核苷酸，2'
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O
‑
甲基修饰核苷酸，2'
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氟基修饰核苷酸，2'
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脱氧修饰核苷酸，锁核苷酸，未锁核苷酸，构象限制核苷酸，限制性乙基核苷酸，无碱基核苷酸，2'
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氨基修饰核苷酸，2'
‑
O
‑
烯丙基修饰核苷酸，2'
‑
C
‑
烷基修饰核苷酸，2'
‑
甲氧基乙基修饰核苷酸，2'
‑
O
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烷基修饰核苷酸，吗啉基核苷酸，氨基磷酸酯，包含非天然碱基的核苷酸，四氢吡喃修饰核苷酸，1,5
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脱水己糖醇修饰核苷酸，环己烯基修饰核苷酸，包含硫代磷酸基团的核苷酸，包含甲基膦酸酯基团的核苷酸，包含5'
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磷酸的核苷酸，包含5'
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磷酸模拟物的核苷酸，包含2'
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磷酸的核苷酸，热不稳定核苷酸，二醇修饰核苷酸(GNA)和2
‑
O
‑
(N
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甲基乙酰胺)修饰核苷酸；及其组合。13.如权利要求9
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12中任一项所述的dsRNA剂，其中所述经修饰的核苷酸中的至少一个选自由以下组成的组：LNA、HNA、CeNA、2'
‑
甲氧基乙基、2'
‑
O
‑
烷基、2'
‑
O
‑
烯丙基、2'
‑
C
‑
烯丙基、2'
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氟基、2'
‑
脱氧、2'
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羟基和二醇修饰核苷酸(GNA)；及其组合。14.如权利要求9
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12中任一项所述的dsRNA，其中所述经修饰的核苷酸中的至少一个选自由以下组成的组：脱氧核苷酸、2'
‑
O
‑...

【专利技术属性】
技术研发人员：J，
申请(专利权)人：阿尔尼拉姆医药品有限公司，
类型：发明
国别省市：