一种增强畜禽免疫力的添加剂、制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种增强畜禽免疫力的添加剂、制备方法及其应用。本发明专利技术以聚合物与抗菌肽结合，增加了抗菌肽的稳定性及两亲性。本发明专利技术的增强畜禽免疫力的添加剂中柔性聚合物链连接肽主链，形成两亲性构象，相对于仅肽链形成的刚性二级结构而言具有更优异的活性。通过破坏细菌的细胞膜来杀灭细菌，两亲性的增强畜禽免疫力的添加剂生物活性强，对细菌细胞膜的通透性高，杀菌效果优异，用于畜禽饲料中，可增强畜禽机体免疫力，有效防治疾病，并促进禽畜生长。生长。

【技术实现步骤摘要】
一种增强畜禽免疫力的添加剂、制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及抗菌肽
，尤其涉及一种增强畜禽免疫力的添加剂、制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]具有抗菌功能的多肽是一种新型的抗生素替代物，它可提取自天然动植物，也可以通过人工合成得到。抗菌多肽具有持久的抗菌活性及低细胞毒性，替代抗生素可以缓解细菌出现耐药性的问题。
[0003]天然提取或人工合成的抗菌肽已投入到养殖及畜牧业的应用之中。中国专利CN107518189A公开了一种添加抗菌肽及中草药的保育仔猪饲料及其制备方法，该专利技术所要解决的技术问题是在于提供一种添加抗菌肽及中草药的保育仔猪饲料，可以增强断奶仔猪的免疫力，健脾胃，预防仔猪感染性疾病，采用的技术方案为：该饲料由以下重量份的原料配制而成：玉米400～500份、46％豆粕100～200份、饼干粉50～100份、膨化大豆50～150份、发酵豆粕20～80份、蒸汽鱼粉15～45份、豆油15～45份、磷酸氢钙5～15份、石粉4～12份、蒙脱石3～7份、食盐2～6份、巧克力粉30～80份、乳清粉15～45份、复合中草药预混料3～7份、抗菌肽3～7份、预混料30～80份。该专利技术添加抗菌肽和复合中草药，促进早期断奶仔猪胃肠道功能发育的同时，使之成为能发挥后继性力量效应的动力源泉，避免由于断奶而造成的肠道损伤，达到使断奶仔猪的肠道结构上有能力接受更多的非母源性饲料从而提高仔猪生产性能的目的，同时提高仔猪抵抗力，减少仔猪发病率和死亡率，有助于提高保育仔猪的日增重。然而抗菌肽作为一种小分子化合物，其结构不稳定，容易受到蛋白酶的裂解而使功能下降，影响了实际使用效果。
[0004]将抗菌肽与聚合物结合来增加其稳定性是一种可行的研究方向。中国专利CN111110856A提供了一种基于抗菌肽和亲水聚合物的抗菌药物及制备方法，该专利采用柔性的亲水聚合物分子对抗菌肽进行共价修饰，构建了一系列具有特殊设计结构的抗菌复合物分子。与原始抗菌肽相比，分子修饰增强了复合物的自组装能力，从而形成更大的聚集体；致密的聚集体表现出脂质特异性结合行为，从而能够靶向作用于细菌而不会对哺乳动物细胞造成伤害；在之后的膜作用过程中，复合物聚集体中的抗菌肽部分在膜内形成“多肽通道”，促使亲水聚合物部分顺利通过膜并最终形成稳定的跨膜孔。与原始抗菌肽相比，显示了增强的抗菌效率，同时减少了副作用和毒性。该专利技术虽然通过亲水聚合物分子对抗菌肽进行共价修饰，但是共价修饰需要的反应温度较高，可能在反应过程中会降低抗菌肽的活性；此外，聚合物虽然能够提供一定程度的保护，但抗菌肽的分子链结构并未发生变化，其仍会受到蛋白酶水解的影响导致实际的使用效果下降。

技术实现思路

[0005]有鉴于现有技术的上述缺陷，本专利技术所要解决的问题是提供一种抗菌效果良好的增强畜禽免疫力的添加剂、制备方法及其应用。
[0006]为了提高抗菌肽的稳定性和两亲性，以增加其使用效果，本专利技术以6
‑
己内酯与庚醇经开环聚合、加成反应得到一种含有溴基的聚合物；随后以谷氨酸5
‑
苄酯N
‑
羧基环内酸酐及(S)
‑4‑
[4
‑
(Boc
‑
氨基)丁基]噁唑烷
‑
2,5
‑
二酮为氨基酸结构单体在催化下经聚合、功能化及脱保护反应得到一种抗菌肽；该抗菌肽分子链端的巯基官能团与上述聚合物中的溴基能够在较低温度下发生取代反应，进而结合形成一种抗菌肽聚合体，即本专利技术的增强畜禽免疫力的添加剂。
[0007]本专利技术公开了一种增强畜禽免疫力的添加剂的制备方法，包括如下步骤：
[0008]M1、将6
‑
己内酯与庚醇在催化下进行开环聚合反应，开环聚合反应结束后经纯化，得到开环聚合产物；
[0009]M2、另取所述开环聚合产物与三乙胺溶于溶剂，随后加入2
‑
溴异丁酰溴并进行加成反应，加成反应结束后经纯化，得到加成产物；
[0010]M3、将谷氨酸5
‑
苄酯N
‑
羧基环内酸酐、(S)
‑4‑
[4
‑
(Boc
‑
氨基)丁基]噁唑烷
‑
2,5
‑
二酮与溶剂混合，在催化下进行聚合反应；聚合反应结束后向聚合产物中加入2
‑
(三苯甲基硫基)乙胺以进行功能化反应，功能化反应结束后产物经纯化，得到肽聚合物；
[0011]M4、另取所述多肽聚合物加入脱保护处理液，进行脱保护反应；脱保护反应结束后，产物经纯化，得到脱保护产物；
[0012]M5、另取所述脱保护产物、所述加成产物与溶剂混合后发生取代反应；取代反应结束后，产物经纯化，得到抗菌肽聚合体，即所述增强畜禽免疫力的添加剂。
[0013]具体的，所述增强畜禽免疫力的添加剂的制备方法，包括如下步骤，以重量份计：
[0014]M1、将26.7～37.5份6
‑
己内酯与0.15～0.21份庚醇混合均匀，向二者混合物中加入0.12～0.18份异辛酸亚锡，并在异辛酸亚锡的催化下进行开环聚合反应；开环聚合反应结束后向产物中加入25～50份二氯甲烷，混合均匀后将该混合物加入200～400份0～4℃的正己烷中进行沉淀，过滤并收集滤饼，滤饼经正己烷洗涤、干燥，得到开环聚合产物，备用；
[0015]M2、无氧条件下，另取2.1～2.9份所述开环聚合产物、0.05～0.08份三乙胺与150～250份二氯甲烷混合均匀，随后加入0.11～0.15份2
‑
溴异丁酰溴以进行加成反应；加成反应结束后，将产物加入200～400份0～4℃的正己烷中进行沉淀，过滤并收集滤饼，滤饼经正己烷洗涤、干燥，得到加成产物，备用；
[0016]M3、将0.38～0.53份谷氨酸5
‑
苄酯N
‑
羧基环内酸酐、3.54～4.96份(S)
‑4‑
[4
‑
(Boc
‑
氨基)丁基]噁唑烷
‑
2,5
‑
二酮与75～150份四氢呋喃混合均匀，得到反应混合液；向所述反应混合液中加入4.4～6.2份六甲基二硅基胺基锂，混合均匀并进行聚合反应；聚合反应结束后向聚合产物中继续加入0.83～1.16份2
‑
(三苯甲基硫基)乙胺，混合均匀以进行功能化反应；功能化反应结束后将反应产物倒入200～400份0～4℃的无水乙醇中进行沉淀，过滤并收集滤饼，滤饼经无水乙醇洗涤、干燥，得到多肽聚合物，备用；
[0017]M4、将所述多肽聚合物加入24～40份由三氟乙酸与三乙基硅烷制得的脱保护处理液，混合均匀后进行脱保护反应；脱保护反应结束后以氮吹去除脱保护处理液中的三氟乙酸，向剩余产物中加入15～30份甲醇并混合均匀，再将该混合物倒入150～300份0～4℃的乙醚中进行沉淀，过滤并收集滤饼，滤饼经乙醚洗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种增强畜禽免疫力的添加剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：M1、将6
‑
己内酯与庚醇在催化下进行开环聚合反应，开环聚合反应结束后经纯化，得到开环聚合产物；M2、另取所述开环聚合产物与三乙胺溶于溶剂，随后加入2
‑
溴异丁酰溴并进行加成反应，加成反应结束后经纯化，得到加成产物；M3、将谷氨酸5
‑
苄酯N
‑
羧基环内酸酐、(S)
‑4‑
[4
‑
(Boc
‑
氨基)丁基]噁唑烷
‑
2,5
‑
二酮与溶剂混合，在催化下进行聚合反应；聚合反应结束后向聚合产物中加入2
‑
(三苯甲基硫基)乙胺以进行功能化反应，功能化反应结束后产物经纯化，得到肽聚合物；M4、另取所述多肽聚合物加入脱保护处理液，进行脱保护反应；脱保护反应结束后，产物经纯化，得到脱保护产物；M5、另取所述脱保护产物、所述加成产物与溶剂混合后发生取代反应；取代反应结束后，产物经纯化，得到抗菌肽聚合体，即所述增强畜禽免疫力的添加剂。2.如权利要求1所述的增强畜禽免疫力的添加剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤，以重量份计：M1、将26.7～37.5份6
‑
己内酯与0.15～0.21份庚醇混合均匀，向二者混合物中加入0.12～0.18份异辛酸亚锡，并在异辛酸亚锡的催化下进行开环聚合反应；开环聚合反应结束后向产物中加入25～50份二氯甲烷，混合均匀后将该混合物加入200～400份0～4℃的正己烷中进行沉淀，过滤并收集滤饼，滤饼经正己烷洗涤、干燥，得到开环聚合产物，备用；M2、无氧条件下，另取2.1～2.9份所述开环聚合产物、0.05～0.08份三乙胺与150～250份二氯甲烷混合均匀，随后加入0.11～0.15份2
‑
溴异丁酰溴以进行加成反应；加成反应结束后，将产物加入200～400份0～4℃的正己烷中进行沉淀，过滤并收集滤饼，滤饼经正己烷洗涤、干燥，得到加成产物，备用；M3、将0.38～0.53份谷氨酸5
‑
苄酯N
‑
羧基环内酸酐、3.54～4.96份(S)
‑4‑
[4
‑
(Boc
‑
氨基)丁基]噁唑烷
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：肖丽萍，周盛昌，黎俊，杨伟春，张敬学，张荣生，吴有林，
申请(专利权)人：广州傲农生物科技有限公司金华傲农生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：