一株多功能蒙氏假单胞菌Pm12菌株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株多功能蒙氏假单胞菌Pm12菌株及其应用。本发明专利技术提供的蒙氏假单胞菌(Pseudomonas monteilii)Pm12菌株已于2022年6月20日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：62556。本发明专利技术研究显示，蒙氏假单胞菌Pm12菌株能独立利用烟碱，具有高效降解烟碱的能力，还具有产嗜铁素的能力，对多种植物病原菌具有强烈的抑制效果，能用于防治植物病害；同时，Pm12菌株发酵液对玉米种子的萌发具有显著的促进作用。本发明专利技术提供的Pm12菌株作为新型环境治理的细菌，能用于烟碱化土壤的治理与肥化，提高作物产量，减少化肥农药使用具有重要意义，大力推动了绿色农业的发展。大力推动了绿色农业的发展。大力推动了绿色农业的发展。

【技术实现步骤摘要】
一株多功能蒙氏假单胞菌Pm12菌株及其应用


[0001]本专利技术属于微生物
更具体地，涉及一株多功能蒙氏假单胞菌Pm12菌株及其应用。

技术介绍

[0002]烟草(Nicotiana tabacum L.)属于茄科烟草属植物，作为我国重要的经济作物之一。烟碱是烟草的主要生物碱，占烟草生物碱总量的95％以上，通常以弱酸弱碱盐的形式存在于烟草体内，易溶于水，游离态烟碱易挥发，易被氧化，遇空气或紫外光会自动氧化成烟酸、氧化烟碱。在烟草种植和香烟生产上很容易造成固体和液体的高浓度污染，严重污染环境和威胁人类健康。欧盟已将每千克烟碱含量超过500mg的烟草废弃物规定为“有毒有害物”，除此之外，烟碱对于环境存在着巨大的破坏力。在烟草生长中，烟草中烟碱的含量是衡量烟草品质的重要依据，但近几年，烟草中烟碱含量出现了明显的上升趋势，这也使得烟草制品中烟碱含量逐渐升高，逐渐超过了烟草制品中规定的烟碱含量。因此寻找一种有效，绿色降解烟碱的方法成为烟草研究方面的一个重要的课题。
[0003]烟碱降解成为迫切需要解决的问题，而利用微生物降解烟碱是一种低成本、高效率且对环境影响小的方法。近年来，微生物降解烟碱的研究受到关注，通过烟碱降解菌株降解烟碱成为了解决烟草植株烟碱过量以及改善土壤中烟碱含量的主流方法。目前，降解烟碱的微生物主要有嗜烟碱节杆菌、纤维单胞菌、中间苍白杆菌、球形节杆菌、氧化节杆菌、假假单胞菌属、土壤杆菌属、红球菌属、米曲霉等。目前有大量已筛选出的烟碱降解菌，如蒙氏假单胞菌(Pseudomonas monteilii)SCUEC2菌株具有降解烟碱的能力，但是其降解效果还有待提升，且其菌株的功能过于单一，限制了菌株的应用。
[0004]铁是生物体生命活动中重要的微量元素之一，植物的生长发育过程及光合作用、呼吸作用、DNA合成、氮的固定以及激素的合成等重要的生理代谢都需要铁的参与。在缺铁胁迫下，微生物为应对缺铁也进化出适应性策略，即合成分泌一类对铁有很高的亲和能力小分子物质，这类物质被称为微生物铁载体(siderophore)。大量研究表明，嗜铁素在植物病害防治和促进植物生长方面均起着重要的作用。Arora等人从药用植物pruriens中分离到12株根瘤菌菌株，其中有2株菌株能够分泌嗜铁素，能有效抑制菜豆壳球孢Macrophomina phaseolina引起的花生芽腐病的发生，具有潜在的生物防治作用(Arora et al.,2001)；冉隆贤等人对3株假单胞杆菌菌株及嗜铁素缺失突变体防治桉树灰霉病，结果表明荧光假单胞杆菌Pseudomonas fluorescens WCS374r菌株和恶臭假单胞杆菌Pseudomonas putida WCS358r菌株通过对铁离子的竞争抑制了桉树灰霉菌的生长(Ran et al.,2005)。因此，利用微生物分泌的铁载体螯合铁以减少化学铁肥的施用是一种节能、绿色、健康的肥力补充方式，对农业的发展具有重要的生态意义和经济意义。目前对于既有降解烟碱功能，又能产嗜铁素且具有广谱的抑菌功能的拮抗菌还很少，为了能更好地用于烟碱化土壤的治理与肥化，提高作物产量，减少化肥农药使用，研究更多新的多功能微生物菌株对绿色农业的发展具有重要意义。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的上述缺陷和不足，提供一株多功能蒙氏假单胞菌Pm12菌株及其应用。
[0006]本专利技术的第一个目的在于提供一株多功能蒙氏假单胞菌Pm12菌株。
[0007]本专利技术的第二个目的在于提供蒙氏假单胞菌Pm12菌株的应用。
[0008]本专利技术的第三个目的在于提供一种烟碱降解剂或植物病原菌抑制剂。
[0009]本专利技术的第四个目的在于提供一种促进种子萌发的方法。
[0010]本专利技术的第五个目的在于提供一种抑制植物病原菌的方法。
[0011]本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
[0012]本专利技术从湖南永州烟草种植地土壤筛选获得一株多功能蒙氏假单胞菌(Pseudomonas monteilii)Pm12菌株，该菌株已于2022年6月20日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，菌种保藏号为GDMCC No：62556。Pm12菌株在LB平板上形成圆形、边缘整齐的不透明灰白色菌落，为革兰氏阴性菌，最适生长温度为30℃，营养要求不高，在普通培养基及烟碱培养基上均生长良好。本专利技术在进行烟碱降解试验显示，施用Pm12菌液组在2g/L的烟碱培养基中烟碱含量在5h内下降了90％，在10h内全部烟碱被降解。在含2g/L的LB培养基中烟碱在2.5h开始降解，在7.5h内降解90％以上，表明Pm12菌株具有高效降解烟碱的能力；并且Pm12菌株具有产嗜铁素能力，对多种病原菌具有强烈的抑制效果；同时，采用Pm12菌株进行了种子催芽实验，显示Pm12菌株能够促进种子发芽，其相比于对照组，发芽率上涨了30％，表明Pm12菌株能促进种子萌发。
[0013]因此，本专利技术提供蒙氏假单胞菌Pm12菌株或其菌液的以下应用：
[0014]在促进种子萌发和/或制备种子萌发促进剂中的应用。
[0015]在降解烟碱和/或制备烟碱降解剂中的应用。
[0016]在制备嗜铁素中的应用。
[0017]在抑制植物病原菌和/或制备植物病原菌抑制剂中的应用。
[0018]优选地，所述植物病原菌为稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)、香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.Cubense，FOC4)、菜心炭疽病菌(Colletotrichum higginsianum Sacc.)、水鬼蕉叶斑病菌(Botrytis cinerea)、番茄酸腐病菌(Geotrichum candidum)和番石榴果腐病菌(Pstalotiopsis cocuuli Guba)。
[0019]本专利技术提供一种烟碱降解剂或植物病原菌抑制剂，含蒙氏假单胞菌Pm12菌株或菌液。
[0020]优选地，所述菌液为发酵液，菌液浓度为1
×
108～1
×
10
10
cfu/mL。
[0021]本专利技术提供一种促进种子萌发的方法，采用蒙氏假单胞菌Pm12菌株或其菌液进行浸种处理。
[0022]本专利技术提供一种抑制植物病原菌的方法，采用蒙氏假单胞菌Pm12菌株或其菌液对植株进行处理。
[0023]优选地，以浓度为1
×
108～1
×
10
10
cfu/mL的蒙氏假单胞菌Pm12菌株的菌液对植株进行灌根或喷施处理。
[0024]本专利技术具有以下有益效果：
[0025]本专利技术提供了一株蒙氏假单胞菌Pm12菌株及其应用，所述菌株于2022年6月20日
monteilii，保藏地址为广东省广州市先烈中路100号。
[0055]实施例3Pm12菌株对烟碱的降解
[0056]1、Pm12菌株对烟碱培养基中烟碱的降解本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株蒙氏假单胞菌(Pseudomonas monteilii)Pm12菌株，其特征在于，所述菌株于2022年6月20日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，菌种保藏号为GDMCC NO：62556。2.权利要求1所述蒙氏假单胞菌Pm12菌株或其菌液在促进种子萌发和/或制备种子萌发促进剂中的应用。3.权利要求1所述蒙氏假单胞菌Pm12菌株或其菌液在降解烟碱和/或制备烟碱降解剂中的应用。4.权利要求1所述蒙氏假单胞菌Pm12菌株或其菌液在制备嗜铁素中的应用。5.权利要求1所述蒙氏假单胞菌Pm12菌株或其菌液在抑制植物病原菌和/或制备植物病原菌抑制剂中的应用。6.根据权利要求5所述应用，其特征在于，所述植物病原菌为稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)、香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.Cubense，FOC4)、菜心炭疽病菌(C...

【专利技术属性】
技术研发人员：金丰良，许小霞，张舒昊，黄玲，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：