波茨坦短芽孢杆菌HHL-001及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种波茨坦短芽孢杆菌HHL

【技术实现步骤摘要】
波茨坦短芽孢杆菌HHL
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001及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体而言，涉及一种波茨坦短芽孢杆菌HHL
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001及其应用。

技术介绍

[0002]愈创木酚是一种挥发性酚类化合物，又称邻甲氧基苯酚，无色或淡黄色晶体,或淡黄色油状液体,具有特有的尖刺的木香和药香香气,带酚类的特殊气息，其是决定白酒、啤酒、葡萄酒和酱油等食品品位及质量的一个重要风味物质。同时，其不仅可以作为白酒等中的重要风味物质，也能作为一种天然自由基清除剂而被大家视为重要健康因子，其具有促进微循环，增强人体免疫力的作用，且可抗氧化和预防心血管等多种疾病的发生。
[0003]目前，化学合成法是生产愈创木酚的常用方法，但随着人们对绿色食品要求的日益提高，利用生物技术生产愈创木酚的方法因具有产品绿色天然、安全可靠、反应条件温和、环境污染小等优点而逐渐受到人们的重视。我国是白酒生产大国，随着菌种筛选、诱变等技术的成熟，我国各地区先后筛选出了可应用于实际生产愈创木酚的菌株。随着菌种筛选技术的不断成熟，菌种库的不断扩大，越来越多的高产愈创木酚的菌株被进一步研究，但目前的高产愈创木酚的菌株的数量仍在少数，并且现有的菌株存在菌种活力不稳定的问题，十分影响菌株产愈创木酚的能力。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在解决现有技术中产愈创木酚的菌株的数量少，以及现有的产愈创木酚的菌株存在菌种活力不稳定的问题，提供一株波茨坦短芽孢杆菌HHL
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001，并提供了该菌株在白酒发酵等领域的应用。
[0005]为解决上述问题，本专利技术第一方面提供一株波茨坦短芽孢杆菌HHL
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001，保藏编号为CCTCC M 20221275，于2022年8月15日保藏于湖北省武汉市武昌区武汉大学中国典型培养物保藏中心。
[0006]本专利技术第二方面提供一种茨坦短芽孢杆菌HHL
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001的筛选方法，包括如下步骤：
[0007]配制清香型白酒大曲的菌悬液；
[0008]将所述菌悬液梯度稀释后，得到稀释液，将所述稀释液均匀涂布于固体培养基上培养，根据所述固体培养基上菌落的形态和透明圈，挑选目标菌落，将所述目标菌落进行划线纯化，制备得到纯化后的单菌落；
[0009]从所述单菌落中筛选出透明圈最大的菌株，并将所述透明圈最大的菌株接种于半固态发酵培养基中，培养完成后，筛选出愈创木酚产量最高的菌株，保藏备用，得到所述茨坦短芽孢杆菌HHL
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001。
[0010]进一步地，所述根据所述固体培养基上菌落的形态和透明圈，挑选目标菌落包括：先挑选所述固体培养基上有明显透明圈的菌落，再挑选出不同形态的菌落，作为目标菌落。
[0011]进一步地，所述从所述单菌落中筛选出透明圈最大的菌株包括：将所述单菌落单
独点至所述固体培养基中培养，并测量各菌的透明圈比值，选取透明圈最大的菌株。
[0012]进一步地，所述固体培养基包括：牛肉膏1.25g/250mL、蛋白胨2.5g/250mL、氯化钠1.25g/250mL、琼脂5g/250mL和脱脂奶粉6.25g/250mL、制霉菌素500μL/250mL，所述固体培养基为自然pH。
[0013]进一步地，所述稀释液在所述固体培养基上的培养温度为35℃～37℃，培养时间为24h～48h。
[0014]进一步地，所述半固态发酵培养基包括：高粱50g、淀粉酶(4万μ/g)0.25g、糖化酶(10万μ/g)2g和水60mL，所述半固态发酵培养基为自然pH，所述半固态发酵培养基的糖度为8BX至10BX。
[0015]进一步地，所述单菌落在所述半固态发酵培养基上的培养温度为35℃，培养时间为24h至48h。
[0016]本专利技术第三方面提供了如上所述的茨坦短芽孢杆菌HHL
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001在白酒发酵中的应用。
[0017]进一步地，所述茨坦短芽孢杆菌HHL
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001用于生产愈创木酚和酸，所述酸包括柠檬酸和乳酸。
[0018]本专利技术的有益效果：
[0019]1、本专利技术提供的茨坦短芽孢杆菌HHL
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001能够生产愈创木酚、对乙烯基愈创木酚、柠檬酸和乳酸，将其用于白酒中能够提高白酒中的挥发性组分和功能性组分，从而有利于提高白酒的风味和品质，并提高白酒的优品率；
[0020]2、本专利技术提供的茨坦短芽孢杆菌HHL
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001分离于清香型白酒曲中，将其应用于白酒酿造中，易于与酿酒过程中的原有微生物共生共存，对原有微生态的影响较小，其使用对环境是无害的。
附图说明
[0021]为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0022]图1为波茨坦短芽孢杆菌HHL
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001在固体培养基中培养24h后的菌落形态图；
[0023]图2为波茨坦短芽孢杆菌HHL
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001在100倍油镜显微镜下的结果图；
[0024]图3为波茨坦短芽孢杆菌HHL
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001的系统进化树。
具体实施方式
[0025]下面将结合具体实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0026]需要说明的是，在不冲突的情况下，本专利技术中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。另外，术语“包括”、“含有”、“具有”的含义是非限制性的，即可加入不影响结果的其
它步骤和其它成分。如无特殊说明的，材料、设备、试剂均为市售。
[0027]本申请实施例的第一方面提供了一种波茨坦短芽孢杆菌，具体为波茨坦短芽孢杆菌(Brevibacillus borstelensis)，菌株号为HHL
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001，保藏编号为CCTCC M 20221275，于2022年8月15日保藏于湖北省武汉市武昌区武汉大学中国典型培养物保藏中心。
[0028]本实施例中的波茨坦短芽孢杆菌(Brevibacillus borstelensis)HHL
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001分离于湖北黄鹤楼有限公司的清香型白酒曲，其能够生产愈创木酚、对乙烯基愈创木酚、柠檬酸和乳酸，将其用于白酒中能够提高白酒中的挥发性组分和功能性组分，从而有利于提高白酒的风味和品质，并提高白酒的优品率。
[0029]波茨坦短芽孢杆菌(Brevibacillus borstelensis)HHL
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001的特性如下：
[0030]形态特征：菌株革兰氏阳性，需氧，可水解淀粉，V<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种茨坦短芽孢杆菌HHL
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001，其特征在于，保藏编号为CCTCC M20221275。2.一种茨坦短芽孢杆菌HHL
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001的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：配制清香型白酒大曲的菌悬液；将所述菌悬液梯度稀释后，得到稀释液，将所述稀释液均匀涂布于固体培养基上培养，根据所述固体培养基上菌落的形态和透明圈，挑选目标菌落，将所述目标菌落进行划线纯化，制备得到纯化后的单菌落；从所述单菌落中筛选出透明圈最大的菌株，并将所述透明圈最大的菌株接种于半固态发酵培养基中，培养完成后，筛选出愈创木酚产量最高的菌株，保藏备用，得到所述茨坦短芽孢杆菌HHL
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001。3.根据权利要求2所述的茨坦短芽孢杆菌HHL
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001的筛选方法，其特征在于，所述根据所述固体培养基上菌落的形态和透明圈，挑选目标菌落包括：先挑选所述固体培养基上有明显透明圈的菌落，再挑选出不同形态的菌落，作为目标菌落。4.根据权利要求2所述的茨坦短芽孢杆菌HHL
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001的筛选方法，其特征在于，所述从所述单菌落中筛选出透明圈最大的菌株包括：将所述单菌落单独点至所述固体培养基中培养，并测量各菌的透明圈比值，选取透明圈最大的菌株。5.根据权利要求2所述的茨坦短芽孢杆菌HHL
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【专利技术属性】
技术研发人员：董孝元，李俊薇，李良，方尚玲，张玉，刘占奇，凌荔，
申请(专利权)人：黄鹤楼酒业有限公司，
类型：发明
国别省市：