猪瘟间接血凝检测试剂盒及制备方法技术

本发明专利技术涉及一种重组蛋白制备方法及用这种蛋白制备猪瘟间接血凝检测试剂盒及方法。其蛋白制备方法是从猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）基因的保守区中选取一段与牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤＶ）基因同源性低于３５％对应氨基酸为Ａ１的核苷酸序列Ｓ１，再将其中的第４个氨基酸改变为亲水性氨基酸，得到氨基酸Ａ２，再对Ａ２对应的核苷酸序列Ｓ２进行改变，分别得到另外３段新的核苷酸序列，用联接核苷酸顺序串联，得到序列Ｓ９，其对应的氨基酸序列为Ａ３，经相应处理后得到核苷酸序列Ｓ１０，将Ｓ１０人工合成、酶切、与载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１连接，重组载体导入大肠杆菌诱导表达，从表达产物中分离纯化得到重组蛋白。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种猪瘟抗原重组蛋白的制备方法，其特征是从猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）基因的保守区中选取一段与牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤＶ）基因同源性低于３５％、其中至少包括１个能刺激动物机体产生中和抗体的抗原位点的６０个核苷酸的序列Ｓ１，其对应的氨基酸序列为Ａ１，且所选择的核苷酸序列Ｓ１中的密码子应尽可能地不存在稀有密码子或亚稀有密码子，再将其中的第４个氨基酸改变为亲水性氨基酸，得到氨基酸Ａ２，然后在不改变氨基酸序列的情况下对其对应的核苷酸序列Ｓ２进行改变分别得到另外３段与编码氨基酸Ａ２的密码子不同，并尽可能地避免了稀有密码子或亚稀有密码子出现的，而且为大肠杆菌所偏爱的新的核苷酸序列Ｓ３、Ｓ４、和Ｓ５，选用其...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：郑福英，邱昌庆，蔺国珍，周继章，曹小安，宫晓炜，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：62[中国|甘肃]