抗CD25抗体、其抗原结合片段及其医药用途制造技术

本公开涉及抗CD25抗体、其抗原结合片段及其医药用途。具体地，本公开涉及抗CD25抗体及其制备抗肿瘤药物的用途。其制备抗肿瘤药物的用途。

【技术实现步骤摘要】
抗CD25抗体、其抗原结合片段及其医药用途


[0001]本公开属于生物医药领域，特别是癌症免疫治疗领域，包括治疗癌症(例如实体瘤)的方法，涉及抗CD25抗体或其抗原结合片段的使用。

技术介绍

[0002]肿瘤免疫治疗是肿瘤治疗领域的热点，目前主要通过提高肿瘤内部CD4
+
和CD8
+
T细胞或者抑制肿瘤内部抑制型免疫细胞的数目和活性，例如，抑制调节性T细胞(Treg)、骨髓来源的抑制性细胞MDSC或肿瘤相关巨噬细胞。通过降低或消除肿瘤内部Treg细胞的治疗策略已经得到临床验证。
[0003]CD25是由272个氨基酸组成的I型膜蛋白，其在T细胞上的表达受TCR信号的调控，因此常作为T细胞激活的标志。IL
‑
2具有免疫激活作用，是肿瘤治疗的免疫调节剂，其通过细胞表面的IL
‑
2受体(IL
‑
2R)发生作用。IL
‑
2R包括三个亚基，IL
‑
2Rα(即CD25)、IL
‑
2Rβ(即CD122)和IL
‑
2Rγ(即CD132)。三个亚基可以形成三种受体形式：高结合力受体包含所有三个亚基IL
‑
2Rα/β/γ，中结合力受体包含IL
‑
2Rβ/γ，低结合力受体为IL
‑
2Rα。IL
‑
2Rα(即CD25)单独与IL
‑
2的亲和力较低(Kd为10
‑8M)，并且不传导细胞内信号。IL
‑
2Rβ和IL
‑
2Rγ是IL
‑
2激活下游信号通路所必需的，当IL
‑
2同时结合IL
‑
2Rβ和IL
‑
2Rγ时，两个受体亚基形成异源二聚体。当IL
‑
2Rα(即CD25)与IL
‑
2Rβ和IL
‑
2Rγ形成高亲和力受体(Kd为10
‑
11
M)时，能激活下游JAK
‑
STAT，PI3K
‑
AKT和MAPK信号通路，从而促进T细胞、NK细胞等淋巴细胞的增殖与活性。
[0004]部分已有的抗CD25抗体阻断或抑制IL
‑
2与CD25结合，例如参见WO2004/045512、WO2006/108670、WO1993/011238、WO1990/007861和WO2017/174331。巴利昔单抗(basiliximab)和达利珠单抗(daclizumab，DAC)均是抑制IL
‑
2与CD25结合的IgG1型抗人CD25抗体，基于CD25介导IL
‑
2的免疫激活功能，均被开发用于减少效应T细胞(Teff)的活化。巴利昔单抗是目前被批准用于移植物抗宿主疾病(GVHD)的嵌和型抗CD25抗体，而达利珠单抗是被批准用于治疗多发性硬化症的人源化抗CD25抗体。
[0005]由于CD25在Treg上的表达丰度远高于其它免疫细胞，因此CD25也可以作为Treg特异性标记物用于开发抗体，通过抗体介导的细胞毒作用(ADCC)和抗体介导的细胞吞噬作用(ADCP)来去除肿瘤内部的Treg细胞，解除Treg对于肿瘤内部T细胞的抑制，从而促进抗肿瘤免疫。但CD25同时也介导IL
‑
2对效应T细胞的激活，如果CD25抗体抑制了IL
‑
2信号通路，将会抑制Teff，拮抗其抗肿瘤活性。一些文献提到抗CD25单独或组合用于癌症或与Treg消耗有关的用途(WO 2004/074437、WO 2006/108670、WO 2006/050172、WO 2011/077245、WO 2016/021720、WO 2004/045512)，因此需要允许IL
‑
2与CD25结合的抗CD25抗体。临床前研发的CD25抗体包括7D4(大鼠抗小鼠CD25，例如参见Malek et al.PNAS，1983Sep；80(18):5694
‑
8；Onizuka S et al.,Cancer Res.1999Jul 1；59(13):3128
‑
33)、7G7B6(抗人CD25，例如参见Zhang et al.，Cancer Biother Radiopharm.2009Jun；24(3):303
‑
309)、PC61(大鼠抗小鼠CD25，例如参见Yulius Y Setiady et al.，Eur J Immunol.2010Mar；40(3):780
‑
6)，在小鼠癌症模型中进行测试时，PC61由于其对CD25和IL2结合抑制作用，未能显示出抗肿瘤活性，而7D4由于其不影响IL2对CD25的结合，显示出优于PC61的抗肿瘤活性。此外，WO2019/175216中提供了罗氏公司和TUSK公司联合开发的靶向CD25的抗体RG6292，已经进入临床I期，以检测其在实体瘤中的安全性及药效。WO2018167104中也提供了不影响IL
‑
2与CD25结合的抗CD25抗体。
[0006]开发抑制肿瘤效果更优的、安全性更高的、不抑制IL
‑
2与CD25的结合的、能够通过ADCC和ADCP效应消除Treg，同时避免抑制Teff活性的抗CD25抗体仍然是本领域亟需的。

技术实现思路

[0007]本公开提供抗CD25抗体、其抗原结合片段，及其编码核酸、载体、宿主细胞、药物组合物、用于治疗癌症(特别是实体瘤)的方法和制药用途。
[0008]抗CD25抗体、其抗原结合片段
[0009]本公开提供抗CD25抗体或其抗原结合片段，包含重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，其中：
[0010]1)所述VH含有SEQ ID NO:1中的HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述VL含有SEQ ID NO:2中的LCDR1、LCDR2和LCDR3；
[0011]2)所述VH含有SEQ ID NO：3中的HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述VL含有SEQ ID NO:4中的LCDR1、LCDR2和LCDR3；
[0012]3)所述VH含有SEQ ID NO:5中的HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述VL含有SEQ ID NO:6中的LCDR1、LCDR2和LCDR3；
[0013]4)所述VH含有SEQ ID NO:7中的HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述VL含有SEQ ID NO:8中的LCDR1、LCDR2和LCDR3；
[0014]5)所述VH含有SEQ ID NO:9中的HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述VL含有SEQ ID NO:10中的LCDR1、LCDR2和LCDR3；
[0015]6)所述VH含有SEQ ID NO:11中的HCD本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗CD25抗体或其抗原结合片段，包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，其中：1)所述VH含有SEQ ID NO：59中的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和所述VL含有SEQ ID NO：63中的LCDR1、LCDR2和LCDR3；2)所述VH含有SEQ ID NO：59中的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和所述VL含有SEQ ID NO：64中的LCDR1、LCDR2和LCDR3；所述CDR是根据Kabat、IMGT、Chothia、AbM或Contact编号系统定义的；优选地，所述CDR是根据Kabat编号系统定义的。2.一种抗CD25抗体或其抗原结合片段，包含VH和VL，其中：所述VH包含分别如SEQ ID NO：45、46、47所示的HCDR1、HCDR2、HCDR3，和所述VL包含分别如SEQ ID NO：65、49、50所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3，或所述VL包含分别如SEQ ID NO：66、49、50所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3；优选地，所述抗CD25抗体为鼠源抗体、嵌合抗体、人抗体或人源化抗体，优选为人源化抗体；优选地，所述VH包含选自IGHV3
‑
23*04的FR1至FR3、选自IGHJ1*01的FR4，和所述VL包含选自IGKV2
‑
28*01的FR1至FR3和选自IGKJ4*01的FR4；优选地，所述VH如SEQ ID NO：59所示或与之具有至少90％、至少95％序列同一性，和所述VL如SEQ ID NO：63或64任一所示或与之具有至少90％、至少95％序列同一性；优选地，所述抗CD25抗体或其抗原结合片段，包含重链和轻链，其中所述重链如SEQ ID NO：61所示或与之具有至少80％、至少90％、至少95％序列同一性，和所述轻链如SEQ ID NO：67或68任一所示或与之具有至少80％、至少90％、至少95％序列同一性；优选地，所述抗原结合片段为scFv、Fv、Fab或Fab
’
片段。3.如权利要求1
‑
2任一项所述的抗CD25抗体或其抗原结合片段，其中所述抗CD25抗体为IgG抗体，优选为IgG1、IgG2、IgG4；优选地，所述抗CD25抗体在Fc区具有去岩藻糖化位点，以增强与FcγRIIIa的结合能力，和/或降低与FcγRIIb的结合能力；更优选地，所述去岩藻糖化位点为297位。4.如权利要求1
‑
3中任一项所述的抗CD25抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗CD25抗体或其抗原结合片段具有下述特征中的至少一项：(a)结合人CD25的K
D
值小于1
×
10
‑7M；(b)不抑制或基本上不抑制IL
‑
2与CD25的结合；(c)消耗肿瘤浸润性Treg，不影响或基本上不影响Teff的功能；(d)以高于1的活化抑制率(A/I)结合Fcγ受体；(e)以比结合FcγRI、FcγRIIc和/...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈思萌，张伟，姜福伟，廖成，
申请(专利权)人：上海盛迪医药有限公司，
类型：发明
国别省市：