一种吖啶酯标记物稳定剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种吖啶酯标记复合物稳定剂，组分包含氨基酸0.1

【技术实现步骤摘要】
一种吖啶酯标记物稳定剂及其制备方法


[0001]本专利技术涉及吖啶酯标记物，尤其涉及一种吖啶酯标记物稳定剂及其制备方法。

技术介绍

[0002]吖啶酯是一类可用作化学发光标记物的化学物质，目前广泛应用于体外诊断技术当中。在碱性条件下，吖啶酯分子受到过氧化氢攻击生成二氧乙烷，分解为二氧化碳和电子激发态的N
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甲基吖啶酮，当其回到基态时会发出波长为430nm的光。利用这一性质，用吖啶酯标记抗原或抗体后，在碱性条件下以一个稳定的酰胺键与蛋白质结合形成吖啶化合物，加激发剂激活后发光，通过标准光度计收集光子来检测标记化合物。吖啶酯化学发光体系用属于直接发光闪光型，发光时间短小于2秒，可以实现快速检测且背景低、标记效率高，但是在具体实施过程中，吖啶酯标记物并没有想象的稳定，在一般的缓冲液中易水解，出现试剂不稳定的情况。结合物稀释至工作浓度时，由于结合物在稀释液中浓度的降低所引起的试剂稳定性下降，从而导致试剂的保存期缩短。由于保存稀释液效果不好，在长期保存过程中，保护性降低，试剂的稳定性也大大降低。从体外诊断试剂行业市场来看，吖啶酯标记物的稳定性好坏直接影响试剂盒整体的性能指标，因此研制一种合适的稳定剂至关重要。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的之一提供一种吖啶酯标记复合物稳定剂，能够解决吖啶酯在溶液中易水解、不稳定的问题，对吖啶酯标记复合物起到保护作用，提高了稳定性，同时延长了使用的有效期，并且该稳定剂能够应用到体外诊断试剂盒中。
[0004]本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现：一种吖啶酯标记复合物稳定剂，其组分包含氨基酸0.1
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1％、蛋白稳定剂0.1
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2.0％、防腐剂0.01
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0.1％、添加剂0.01
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0.1％、螯合剂0.01
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0.1％、表面活性剂0.05
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0.2％，缓冲液余量。
[0005]所述氨基酸为赖氨酸、丝氨酸或甘氨酸，用于降低吖啶酯复合物降解。
[0006]所述蛋白稳定剂为质量百分比为0.5
‑
2.0％的牛血清白蛋白、0.1
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1.0％的酪蛋白以及牛IgG中的一种或两种的混合物。
[0007]所述防腐剂为Bro、Proclin 300和洗必泰其中的一种或两种以上的混合物。
[0008]所述添加剂为0.9％的氯化钠、和0.1
‑
1％的聚乙二醇6000其中的一种或两种混合物。其中，NaCl提供离子强度，聚乙二醇6000含羟基化合物有稳定蛋白质作用。
[0009]所述螯合剂为乙二胺四乙酸二钠(EDTA
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2Na)、和二乙基三胺五乙酸(DTPA)中的一种或两种的混合物。其中，螯合剂能螯合金属离子，防止蛋白质变性。
[0010]所述表面活性剂为吐温
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20(Tween
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20)、乙基苯基聚乙二醇(NP
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40)、和曲拉通X
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100(Triton X
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100)中的一种或两种以上的混合物。其中，表面活性剂还能降低吖啶酯复合物的碰撞聚集，起稳定性作用。
[0011]所述缓冲液为浓度0.2mol/L的磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、MES缓冲液或Tris
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HCl缓冲液。
[0012]本专利技术目的之二是提供吖啶酯标记复合物稳定剂的制备方法。
[0013]具体地，吖啶酯标记复合物稳定剂的制备方法，包括以下步骤：
[0014](1)按以下取氨基酸0.1
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1％、蛋白稳定剂0.1
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2.0％、防腐剂0.01
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0.1％、添加剂0.01
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0.1％、螯合剂0.01
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0.1％、表面活性剂0.05
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0.2％，缓冲液余量；
[0015](2)将防腐剂、添加剂、氨基酸、蛋白稳定剂、螯合剂以及表面活性剂依次加入缓冲液中，搅拌使其充分溶解混匀；
[0016](3)加入浓盐酸或氢氧化钠调节PH值至7.4
±
0.1；
[0017](4)用滤膜过滤后得到稳定剂，置于2℃～8℃保存。
[0018]有益效果：
[0019]1.本专利技术能够使吖啶酯标记物保持稳定，延长试剂的保存期，并且不易水解，解决了试剂盒使用效期短的问题，保证了试剂盒整体的性能指标。
[0020]2.本专利技术成分少但效果好，制备方法简单，氨基酸、蛋白稳定剂、防腐剂、添加剂、螯合剂和表面活性剂混合使用，同时配合缓冲液，各组分之间起到了相互增效和协同的作用，对吖啶酯标记物的保护效果更好，可长期保存，能为标记物提供良好的阻断性与保护性，降低非特异性反应。
[0021]3.本专利技术节约物料成本，且试剂的特异性、稳定性、重复性等性能不受影响，适合推广使用。
具体实施方式
[0022]下面结合具体实施方式对本专利技术作进一步说明。
[0023]实施例一
[0024]磷酸缓冲液：1000mL；
[0025]赖氨酸：1.0mL；
[0026]氯化钠：29.0g；
[0027]牛血清白蛋白：10.0g；
[0028]酪蛋白：2.0g；
[0029]EDTA
‑
2Na：1.0g
[0030]Bro：0.2mL；
[0031]Proclin300：1.0mL；
[0032]吐温
‑
20：1.0mL；
[0033]曲拉通X
‑
100：1.0mL。
[0034]按配方量取各个组分备用，将Bro、Proclin300、氯化钠、赖氨酸、牛血清白蛋白、酪蛋白钠、EDTA
‑
2Na、吐温
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20和曲拉通X
‑
100依次加入磷酸缓冲液中，搅拌充分溶解混匀。将得到的混合液搅拌混匀后加入氢氧化钠调节PH值到PH7.4
±
0.1，用滤膜过滤后即得到稳定剂。
[0035]实施例二
[0036]Tris
‑
HCl缓冲液：1000mL；
[0037]甘氨酸：1.0mL；
[0038]氯化钠：29.0g；
[0039]酪蛋白：15.0g；
[0040]EDTA
‑
2Na：1.0g；
[0041]Bro：0.2mL；
[0042]Proclin300：1.0mL；
[0043]曲拉通X
‑
100：1.0mL。
[0044]按配方量取各个组分备用，将Bro、Proclin300、氯化钠、甘氨酸、酪蛋白、EDTA
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2Na和曲拉通X
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100依次加入Tris
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种吖啶酯标记复合物稳定剂，其特征是，组分包含氨基酸0.1
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1％、蛋白稳定剂0.1
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2.0％、防腐剂0.01
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0.1％、添加剂0.01
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0.1％、螯合剂0.01
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0.1％、表面活性剂0.05
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0.2％，缓冲液余量。2.根据权利要求1所述的吖啶酯标记复合物稳定剂，其特征是，所述氨基酸为赖氨酸、丝氨酸或甘氨酸。3.根据权利要求1所述的吖啶酯标记复合物稳定剂，其特征是，所述蛋白稳定剂为质量百分比为0.5
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2.0％的牛血清白蛋白、0.1
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1.0％的酪蛋白以及牛IgG中的一种或两种的混合物。4.根据权利要求1所述的吖啶酯标记复合物稳定剂，其特征是，所述防腐剂为Bro、Proclin 300和洗必泰其中的一种或两种以上的混合物。5.根据权利要求1所述的吖啶酯标记复合物稳定剂，其特征是，所述添加剂为0.9％的氯化钠、和0.1
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1％的聚乙二醇6000其中的一种或两种混合物。6.根据权利要求1所述的吖啶酯标记复合物稳定剂，其特征是，所述螯合剂为乙二胺四乙酸二钠、和二乙基三胺五乙酸中...

【专利技术属性】
技术研发人员：李冰，董亚玲，
申请(专利权)人：郑州凌思生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：