本发明专利技术公开了一种用于保护含巯基偶联物的稳定剂，包括以下质量比的组分：蛋白保护剂5
【技术实现步骤摘要】
一种用于保护含巯基偶联物的稳定剂
[0001]本专利技术涉及免疫金标记的试剂，具体地涉及一种用于保护含巯基偶联物的稳定剂。
技术介绍
[0002]胶体金常规的标记方法的原理是胶体金在弱碱环境下与标记蛋白质分子的正电荷基团通过静电吸附作用，形成胶体金标记复合物。但是，通过静电吸附生成的胶体金标记复合物的标记效率较低、稳定性较差。为改善这一缺陷，可通过含巯基的试剂对标记蛋白进行处理，使蛋白表面巯基化，表面的巯基与胶体金通过金硫键结合，形成更稳定的金标结合物，提升产品的灵敏度和稳定性。通常，胶体金标记复合物在经过离心纯化后，重悬在复溶液中，重悬后的胶体金标记复合物进行后续的标记物垫制备。
[0003]巯基的性质较为活泼，自身易被氧化而失活。常规的胶体金标记物复溶液中，主要的成分有缓冲液、蛋白保护成分、流动封闭成分、表面活性剂成分等，然而以上组分，缺少能够有效保护巯基的组分。因此，需要通过特殊组分的添加，来保护经巯基偶联的胶体金标记复合物。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的在于提供一种用于保护含巯基偶联物的稳定剂，可保护巯基不被氧化失活，保护巯基偶联物，提升含巯基偶联物的胶体金标记复合物稳定性，进而提升胶体金产品的稳定性。
[0005]本专利技术通过以下技术方案实现：一种用于保护含巯基偶联物的稳定剂，包括以下质量比的组分：
[0006]蛋白保护剂5
‑
20％、流动封闭剂0.05％
‑
1％、表面活性剂0.05％
‑
1％、抗氧化剂0.01％
‑
0.1％、含巯基试剂0.01％
‑
1％。
[0007]蛋白保护剂为双糖，作为本专利技术的一个实施例，双糖可选择蔗糖和海藻糖中的一种或两者的混合。
[0008]流动封闭剂包括牛血清白蛋白(BSA)、酪蛋白(Casein)、新生牛血清(NBCS)和脱脂奶粉中的一种或两种以上的组合。
[0009]表面活性剂包括吐温
‑
20(Tween
‑
20)、吐温
‑
80(Tween
‑
80)、辛基酚聚氧乙烯醚(Triton
‑
100)、苄泽(Brij)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等中的一种或两种以上的组合。
[0010]组分稳定剂包含抗氧化剂和含巯基试剂，可保护巯基不被氧化失活，保护巯基偶联物，提升含巯基偶联物的胶体金标记复合物稳定性。本专利技术中抗氧化剂包括抗坏血酸和氨基比林(ADP)中的一种或两种的组合。
[0011]含巯基试剂包括二硫苏糖醇、半胱氨酸和还原性谷胱甘肽中的一种或两种以上的组合。
[0012]与现有技术相比，本专利技术具有的有益效果为：
[0013]1.本专利技术提供的稳定剂中含有抗氧化剂和含巯基试剂，组分稳定剂的还原性强于巯基偶联物，当遇到氧化剂时优先被氧化，从而实现对巯基偶联物进行保护，提升含巯基偶联物的胶体金标记复合物稳定性，进而提升胶体金产品的稳定性。
[0014]2.本专利技术使用的化学试剂方便易得。
[0015]3.本专利技术提供的稳定剂在胶体金诊断试剂的研发和生产过程中易于推广，具有较高的实用意义，适于广泛推广。
具体实施方式
[0016]下文将结合具体实施方式和实施例，具体阐述本专利技术，本专利技术的优点和各种效果将由此更加清楚地呈现。本领域技术人员应理解，这些具体实施方式和实施例是用于说明本专利技术，而非限制本专利技术。
[0017]将降钙素原标记抗体用Traut
’
s处理后标记胶体金，得到胶体金增强标记复合物。进一步地，将胶体金标记复合物离心纯化后，分别用实施例1
‑
3以及对比例中的复溶液将其重悬复溶至相同浓度。随后分别制备四种胶体金标记物垫。
[0018]实施例1
[0019]0.01M PB缓冲溶液(pH7.4)+2％海藻糖+8％蔗糖+5
‰
BSA+5
‰
PVP
‑
K30 5
‰
Tween
‑
20+5
‰
氨基比林+1
‰
半胱氨酸。
[0020]实施例2
[0021]0.01M TB缓冲溶液(pH8.0)+10％蔗糖+3
‰
Casein+5
‰
Triton
‑
100+5
‰
抗坏血酸+1
‰
二硫苏糖醇。
[0022]实施例3
[0023]0.01M BB缓冲溶液(pH8.0)+5％蔗糖+5％海藻糖+1
‰
Casein+5
‰
BSA+5
‰
Triton
‑
100+5
‰
氨基比林+1
‰
还原型谷胱甘肽。
[0024]对比例
[0025]0.01M TB缓冲溶液(pH8.0)+10％蔗糖+3
‰
Casein+5
‰
Triton
‑
100+5
‰
PVP
‑
K30。
[0026]实施例1
‑
3及对比例，降钙素原增强标记抗体试纸条37℃热稳定性结果
[0027][0028]由此可见，实施例1
‑
3所制备的胶体金标记物垫，在37℃放置30天后，其性能仍能满足产品需求。而对比例所制备的胶体金标记物垫，在37℃放置30天后，当样本浓度低于0.1ng/mL时，标记效率降低，检测结果出现误差，甚至无法得到准确结果，说明性能已不能满足产品需求。
[0029]以上所述实施例仅表达了本专利技术的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本专利技术专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本专利技术的保护范围。因此，本专利技术专利的保护范围应以所附权利要求为准。
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于保护含巯基偶联物的稳定剂，其特征是，包括以下质量比的组分：蛋白保护剂5
‑
20％、流动封闭剂0.05％
‑
1％、表面活性剂0.05％
‑
1％、抗氧化剂0.01％
‑
0.1％、含巯基试剂0.01％
‑
1％。2.根据权利要求1所述的用于保护含巯基偶联物的稳定剂，其特征是，所述蛋白保护剂为双糖。3.根据权利要求2所述的用于保护含巯基偶联物的稳定剂，其特征是，所述双糖为蔗糖和海藻糖中的一种或两者的混合。4.根据权利要求1所述的用于保护含巯基偶联物的稳定剂，...
【专利技术属性】
技术研发人员：董亚玲，李冰，
申请(专利权)人：郑州凌思生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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