一种胶体金标记方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种胶体金标记方法及其应用，该方法提出了将待标记蛋白与大分子物质BSA和/或Casein先以一定的比例混合后再加入到已经调节至胶体金标记该待标记蛋白的最佳pH值的胶体金溶液中进行胶体金标记，通过该方法进行胶体金标记，能有效提高标记的灵敏度和稳定性。稳定性。

【技术实现步骤摘要】
一种胶体金标记方法及其应用


[0001]本专利技术属于医药生物
，具体是一种胶体金标记方法及其应用。

技术介绍

[0002]胶体金即胶体纳米金，因纳米金颗粒在水溶液中呈胶体状，又被称为胶体金。胶体金免疫标记技术是以胶体金作为示踪标记物应用于抗原抗体反应检测，目前在免疫层析分析中应用非常广泛。胶体金免疫标记的实质是蛋白质等高分子物质被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程，胶体金与蛋白质主要依靠三种作用力结合：静电作用力、疏水作用力和金硫键。影响胶体金对待标记蛋白的吸附的主要因素是pH值，不同的标记pH会影响标记效率和结合物的稳定性。当胶体金的pH值接近待标记蛋白的等电点(pI)或略偏碱性的条件时，胶体金和待标记蛋白容易形成牢固的结合物；当胶体金的pH值低于待标记蛋白的等电点时，胶体金和待标记蛋白会发生聚集，导致死金；当胶体金的pH值远大于待标记蛋白的等电点时，胶体金和待标记蛋白的结合能力变弱，胶体金和待标记蛋白均呈游离状态，难以形成金标复合物。另外,胶体金颗粒粒径的均一性对结合物稳定性也起重要作用，在标记蛋白的时，不同粒径的胶体金溶液调整至相同的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种胶体金标记方法，其特征在于，所述方法包括：将待标记蛋白与大分子物质混合得到混合物，再将所述混合物加入胶体金溶液中以制备胶体金标记的蛋白；所述胶体金溶液的pH值为胶体金标记所述待标记蛋白的最佳pH值。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述大分子物质选自BSA、Casein中一种或两种；优选地：大分子物质选自BSA，BSA与待标记蛋白的质量比为0.1～200:1，优选为10～100:1，更优选为20～50:1；和/或大分子物质选自Casein，Casein与待标记蛋白的质量比为0.1～100:1，优选为1～50:1，更优选为1～20:1。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，胶体金标记待标记蛋白的最佳pH值等于该待标记蛋白的等电点pI或大于该待标记蛋白的等电点pI，更优选地，pI≤pH≤pI+0.8。4.根据权利要求1
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3中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)选取粒径大小均一的纳米金颗粒配制胶体金溶液，调节胶体金溶液的pH值至胶体金标记待标记蛋白的最佳pH值；(2)将待标记蛋白与大分子物质混合得到大分子物质与待标记蛋白的混合物；(3)将步骤(2)得到的大分子物质与待标记蛋白的混合物加入到步骤(1)的胶体金溶液中，进行标记反应；(4)反应完成后往步骤(3)的反应液中加入封闭剂，进行封闭反应；(5)对步骤(4)封闭反应得到的溶液进行离心后去除上清液，收集到的沉淀物经胶体金复溶液复溶后即得到胶体金标记的蛋白。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中纳米金颗粒的平均粒径为30nm～50nm...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖乐，梁向红，龙胜娟，
申请(专利权)人：迈克生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：