一种抗IL-17/VEGF双功能融合蛋白及其用途制造技术

本发明专利技术涉及融合蛋白技术领域，特别是涉及一种抗IL

【技术实现步骤摘要】
一种抗IL
‑
17/VEGF双功能融合蛋白及其用途


[0001]本专利技术涉及融合蛋白
，特别是涉及一种抗IL
‑
17/VEGF双功能融合蛋白及其用途。

技术介绍

[0002]白细胞介素17(IL
‑
17)是一种炎症细胞因子，主要由辅助型T细胞(Th17)分泌，其它T细胞及先天性免疫细胞如肥大细胞、嗜中性粒细胞也会少量分泌。IL
‑
17家族包括6个成员(A、B、C、D、E、F以及A/F)，以同源或异源二聚体形式存在。IL
‑
17受体包含IL
‑
17RA、IL
‑
17RB、IL
‑
17RC、IL
‑
17RD、IL
‑
17RE及SEF。其中同源二聚体IL
‑
17A、IL
‑
17F及异源二聚体IL
‑
17A/F为主要存在形式，共同作用于IL
‑
17RA和IL
‑
17RC。IL
‑
17A在正常生理状态下表达极低，在病理状态下，IL
‑
17A被大量分泌，与细胞表面的IL
‑
17R结合并通过信号转导复合体IL
‑
17R
‑
Act1
‑
TRAF6激活下游NF
‑
kB、JNK等信号通路，参与炎症反应，在炎症及自身免疫性疾病(如银屑病，类风湿关节炎)病理反应中发挥重要作用。目前抗IL
‑
17的单克隆抗体药物，已成为治疗银屑病的重要手段。
[0003]银屑病是一种常见的复发性、炎症性皮肤病。以角质形成细胞(KC)过度增生、炎症细胞浸润、新生血管形成为其组织病理三要素。目前研究表明：银屑病皮损处的真皮乳头层微血管扩张迂曲，通透性增高，血管数量增多，并认为这种变化主要发生在毛细血管后微静脉。银屑病中最先发生的病理改变是血管的分布和形成的改变。在银屑病患者非皮损皮肤中亦常能见到异常扩张的血管。并且有研究表明，在银屑病患者皮损中，血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA及蛋白表达水平都较正常人皮肤中的水平明显增加。因此，抗血管生成药物或可成为治疗银屑病的有效途径，而同时靶向IL
‑
17和VEGF的药物，对银屑病的治疗很可能具有加成性的疗效。
[0004]此外多个研究表明，在糖尿病性视网膜病变，脉络膜新生血管性疾病(CNV)以及黄斑病中，IL
‑
17含量显著增高。在激光诱导的CNV模型中，注射抗IL
‑
17抗体，或抗VEGF抗体，均可显著减少新生血管生成及渗漏。因此同时靶向IL
‑
17和VEGF的药物，有望成为黄斑病等视网膜病变的创新性新疗法。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种新的抗IL
‑
17/VEGF双功能融合蛋白，能同时阻断IL
‑
17和VEGF信号通路。本专利技术的目的还在于提供编码所述双功能融合蛋白的核酸分子；提供包含所述核酸分子的表达载体；提供包含所述表达载体的宿主细胞；提供所述双功能融合蛋白的制备方法；提供包含所述双功能融合蛋白的药物组合物；提供所述双功能融合蛋白或所述药物组合物在制备治疗IL
‑
17和/或VEGF过表达的疾病的药物中的应用；提供所述融合蛋白或所述药物组合物用于治疗IL
‑
17和/或VEGF过表达的疾病的方法。
[0006]为了达到上述目的，本专利技术提供了以下技术方案：
[0007]本专利技术的第一个方面提供了一种抗IL
‑
17/VEGF双功能融合蛋白，包含抗IL
‑
17抗
体和与VEGF特异结合的蛋白，所述与VEGF特异结合的蛋白为VEGFR；所述与VEGF特异结合的蛋白直接或通过连接子与抗IL
‑
17抗体连接。
[0008]所述VEGFR可以是完整的受体蛋白，也可以是VEGFR的胞外区。
[0009]在一个优选的实施方案中，所述与VEGF特异结合的蛋白为VEGFR的胞外区。示例性的VEGFR的胞外区例如VEGFR1的D2结构域或D3结构域；VEGFR2的D2结构域、D3结构域或D4结构域；VEGFR3的D1结构域、D2结构域或D3结构域。
[0010]在一个优选的实施方案中，所述与VEGF特异结合的蛋白为VEGFR1的胞外区。
[0011]在一个优选的实施方案中，所述与VEGF特异结合的蛋白为VEGFR1的D2结构域。
[0012]抗IL
‑
17抗体可以是任何抗IL
‑
17抗体，只要该抗体能够抑制或减少IL
‑
17与其配体结合。优选的，抗IL
‑
17抗体为608抗体。
[0013]具体的，所述抗IL
‑
17抗体重链包含互补决定区HCDR1
‑
3，其中HCDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO：14所示，HCDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO：15所示，HCDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO：16所示；所述抗IL
‑
17抗体轻链包含互补决定区LCDR1
‑
3，其中LCDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO：17所示，LCDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO：18所示，LCDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO：19所示。
[0014]在一个优选的实施方案中，所述抗IL
‑
17抗体重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：20所示，所述抗IL
‑
17抗体轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：21所示。
[0015]在一个优选的实施方案中，所述抗IL
‑
17抗体为单克隆抗体。
[0016]在一个优选的实施方案中，所述抗IL
‑
17抗体为人源化抗体。
[0017]在一个优选的实施方案中，所述抗IL
‑
17抗体为IgG类抗体。例如IgG1、IgG2或IgG4型的全长抗体。
[0018]在一个优选的实施方案中，所述抗IL
‑
17抗体重链氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示，轻链氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。
[0019]在其他实施方案中，所述抗IL
‑
17抗体还可以是与608抗体竞争结合IL
‑
17的其他抗体。
[0020]在本专利技术某些具体实施方式中，所述抗IL
‑
17抗体也可以是在如SEQ ID NO：4所示的重链氨基酸序列，或如SEQ ID NO：1所示的轻链氨基酸序列上经过取代、缺失或者添加一个或多个(具体可以是1
‑
50、1
‑本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗IL
‑
17/VEGF双功能融合蛋白，其特征在于，包含抗IL
‑
17抗体和与VEGF特异结合的蛋白，所述与VEGF特异结合的蛋白为VEGFR；所述与VEGF特异结合的蛋白直接或通过连接子与抗IL
‑
17抗体连接。2.根据权利要求1所述的抗IL
‑
17/VEGF双功能融合蛋白，其特征在于，所述与VEGF特异结合的蛋白为VEGFR的胞外区；优选的，所述与VEGF特异结合的蛋白为VEGFR1的胞外区。3.根据权利要求2所述的抗IL
‑
17/VEGF双功能融合蛋白，其特征在于，所述与VEGF特异结合的蛋白为VEGFR1的D2结构域。4.根据权利要求1所述的抗IL
‑
17/VEGF双功能融合蛋白，其特征在于，所述抗IL
‑
17抗体重链包含互补决定区HCDR1
‑
3，其中HCDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO：14所示，HCDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO：15所示，HCDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO：16所示；所述抗IL
‑
17抗体轻链包含互补决定区LCDR1
‑
3，其中LCDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO：17所示，LCDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO：18所示，LCDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO：19所示。5.根据权利要求1所述的抗IL
‑
17/VEGF双功能融合蛋白，其特征在于，所述抗IL
‑
17抗体重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：20所示，所述抗IL
‑
17抗体轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：21所示。6.根据权利要求1所述的抗IL
‑
17/VEGF双功能融合蛋白，其特征在于，所述抗IL
‑
17抗体重链氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示，轻链氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。7.根据权利要求3所述的抗IL
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17/VEGF双功能融合蛋白，其特征在于，VEGFR1的D2结构域为野生型或突变体，野生型VEGFR1的D2结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO：34所示。8.根据权利要求7所述的抗IL
‑
17/VEGF双功能融合蛋白，其特征在于，VEGFR1的D2结构域的突变体为SEQ ID NO：34所示的氨基酸序列的138位突变形成的。9.根据权利要求7所述的抗IL
‑
17/VEGF双功能融合蛋白，其特征在于，VEGFR1的D2结构域的突变体为SEQ ID NO：34所示的氨基酸序列的138位取代突变形成的。10.根据权利要求7所述的抗IL
‑
17/VEGF双功能融合蛋白，其特征在于，VEGFR1的D2结构域的突变体选自138M/A、138M/P或138...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓岚，黄浩旻，朱祯平，刘利芬，王立花，孟运，
申请(专利权)人：三生国健药业上海股份有限公司，
类型：发明
国别省市：