一种新型融合胶原蛋白肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种新型融合胶原蛋白肽，所述新型融合胶原蛋白肽包括透皮肽、人源Ⅲ型胶原保守肽段和活性功能肽。本发明专利技术还公开了一种新型融合胶原蛋白肽的制备方法及其和表达新型融合胶原蛋白的应用。本发明专利技术新型融合胶原蛋白肽具有良好的美白、保湿、抗炎以及屏障修复功能。通过质粒能够表达来源纯净的胶原蛋白肽，不存在含抗原的异源蛋白，产品稳定。产品稳定。产品稳定。

【技术实现步骤摘要】
一种新型融合胶原蛋白肽及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种新型融合胶原蛋白肽及其表达质粒、制备方法和应用。

技术介绍

[0002]胶原蛋白是人体内最丰富的蛋白质，约占体内蛋白质总量的25
‑
33％。对于人体皮肤而言，胶原蛋白的含量占比更高，约占皮肤总重量的75％和总体积的90％。胶原蛋白分子有多个种类，在真皮层中常见的是Ⅰ型胶原蛋白和III型胶原蛋白。其中，Ⅰ型胶原蛋白是较大的结构蛋白，用于支撑皮肤硬度；III型胶原蛋白较细小，用于支撑皮肤柔嫩度，使皮肤细腻和富有弹性，对于皮肤而言，发生创伤后，III型胶原蛋白可以更好地让伤口恢复，不容易留疤痕，是良好的美容产品成分。
[0003]然而，III型胶原蛋白存在功能单一的问题，并且作为一种生物大分子，其透皮性能不足，难以深入肌肤底层发挥作用。另一方面，由于胶原蛋白的来源物种多样，容易存在抗原引起敏感，并且通过提取获得的胶原蛋白，片段不均一，分子量不等，产品质量难以保证。

技术实现思路

[0004]为了克服现有技术的不足，本专利技术的第一个目的在于提供一种新型融合胶原蛋白肽，其能解决人源III型胶原蛋白功能单一的问题。
[0005]本专利技术的第二个目的在于提供一种新型融合胶原蛋白肽的制备方法，其能解决新型融合胶原蛋白肽产品质量的问题。
[0006]本专利技术的第三个目的在于提供一种新型融合胶原蛋白肽的应用，其能解决该新型融合胶原蛋白肽的在化妆品和药品的应用问题。
[0007]本专利技术的第一个目的采用以下技术方案实现：
[0008]一种新型融合胶原蛋白肽，为透皮肽、人源Ⅲ型胶原保守肽段和活性功能肽依次串联形成融合多肽。
[0009]进一步地，所述透皮肽的氨基酸序列如SEQ NO.5所示；所述透皮肽的氨基端具有肠激酶识别位点肽段。
[0010]进一步地，所述人源Ⅲ型胶原保守肽段为第一保守肽段或第二保守肽段中的一种。
[0011]进一步地，所述第一保守肽段的氨基酸序列如SEQ NO.8所示；所述第二保守肽段的氨基酸序列如SEQ NO.9所示。
[0012]进一步地，所述活性功能肽为活性十肽或芋螺肽中的一种。
[0013]进一步地，所述活性十肽的氨基酸序列如SEQ NO.6所示；所述芋螺肽的氨基酸序列如SEQ NO.7所示。
[0014]进一步地，所述新型融合胶原蛋白肽的氨基酸序列如SEQ NO.1
‑
SEQ NO.4所示。
[0015]本专利技术的第二个目的采用以下技术方案实现
[0016]一种新型融合胶原蛋白肽的制备方法，包括以下步骤：
[0017]步骤1、构建新型融合胶原蛋白肽的表达质粒；
[0018]步骤2、将步骤1所述新型融合胶原蛋白肽的表达质粒转化到大肠杆菌，构建新型融合胶原蛋白肽的表达菌株；
[0019]步骤3、对新型融合胶原蛋白肽的表达菌株进行活化培养；
[0020]步骤4、诱导新型融合胶原蛋白肽表达菌株进行蛋白表达；
[0021]步骤5、对成功表达新型融合胶原蛋白肽的表达菌株进行离心，收集菌体后进行纯化，完成新型融合胶原蛋白肽的制备。
[0022]进一步地，所述步骤1中，根据新型融合胶原蛋白肽的氨基酸序列进行反向设计和密码子优化得到用于其核苷酸序列后，再进行质粒的构建。
[0023]本专利技术的第三个目的采用以下技术方案实现：
[0024]一种新型融合胶原蛋白肽在制备化妆品或药品的应用。
[0025]相比现有技术，本专利技术的有益效果在于：
[0026]1.本专利技术的一种新型融合胶原蛋白肽，依托人III型胶原蛋白的保守肽段并结合活性功能肽和透皮肽，在确保胶原蛋白发挥自身功能的同时，提供更多皮肤保健功能。本专利技术构建的胶原蛋白具有良好的保湿及屏障修复功能外，还兼具其他皮肤护理功能，如美白，修护等。
[0027]2.本专利技术的一种新型融合胶原蛋白肽，根据皮肤吸收的分子量特性，优化胶原蛋白可变序列，构建分子量更小的胶原蛋白，并在胶原蛋白一端进行修饰，使之具有良好的透皮性，能够将人源三型胶原蛋白肽和其他功能肽一同透过皮肤角质层到达肌肤底层发挥作用。
[0028]2.本专利技术的一种新型融合胶原蛋白肽的制备方法，通过人工合成新型融合胶原蛋白肽的核酸序列后进行密码子优化，并选择合适的质粒导入大肠杆菌中进行表达。能够得到来源纯净的胶原蛋白肽，不存在含抗原的异源蛋白。产品稳定且不会造成皮肤的敏感或者感染。
[0029]3.本专利技术一种新型融合胶原蛋白肽的表达质粒能够应用于融合胶原蛋白的表达，相比提取手段获得的胶原蛋白，片段均一，产品质量稳定，并且将胶原蛋白从结构蛋白变为功能性融合蛋白，溶解度高。
附图说明
[0030]图1
‑
4为本专利技术新型融合蛋白表达图。
[0031]图5为本专利技术新型融合蛋白透皮性能测试图。
具体实施方式
[0032]下面将结合具体实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术的部分实施例，而不是全部实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0033]胶原蛋白是人体内最丰富的蛋白质，存在于人体的皮肤、骨骼、肌腱中。依据氨基酸序列和功能的差异，胶原蛋白可分为28种亚型，常见类型为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、
Ⅴ
型和
Ⅺ
型。在人体皮肤及粘膜中，胶原蛋白占干重的70％至80％，主要以Ⅰ型和Ⅲ型分布最广泛。成年人皮肤以Ⅰ型胶原蛋白为主，而婴幼儿皮肤以Ⅲ型胶原蛋白为主。作为人体重要细胞外基质，胶原蛋白与皮肤的年轻程度、创伤修复、细胞支撑与再生等行为紧密相关，其应用领域极其广泛。其中胶原蛋白Ⅰ型和III型的比例，决定着皮肤的硬度和柔嫩度，也决定创伤愈合后的留疤程度。胶原蛋白Ⅰ型较粗大，用于支撑皮肤硬度，使皮肤坚固。但是如果含量过多，则会使皮肤僵硬，创伤愈合后，也容易形成疤痕。胶原蛋白III型较细小，用于支撑皮肤柔嫩度，使皮肤细腻和富有弹性。含量越高，越能使皮肤细腻柔嫩，创伤后III型胶原蛋白可以更好地让伤口恢复，不容易留疤痕。
[0034]然而无论是哪种胶原蛋白，本身除了支撑作用外，没有其他功能，只能算是一种结构蛋白质，同时作为一种大分子的物质，也难以透过皮肤角质层，起效量过高。因此，为解决以上问题，本专利技术提供一种新型融合胶原蛋白肽。
[0035]一种新型融合胶原蛋白肽，为透皮肽、人源Ⅲ型胶原保守肽段和活性功能肽依次串联形成融合多肽。
[0036]所述透皮肽为透皮肽TD
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1，氨基酸序列为ACSSSPSKHCG，其能够克服皮肤屏障，快速穿透细胞，并且能够保留原有结构和功能，且不依赖于胞吞作用进入细胞。不仅可以自身穿透细胞，也可以与其他肽段连接并促进其的细胞渗透，从而提高生物大分子透皮效率。人源Ⅲ型胶原保守肽本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种新型融合胶原蛋白肽，其特征在于，所述新型融合胶原蛋白肽包括透皮肽、人源Ⅲ型胶原保守肽段和活性功能肽依次串联形成融合多肽。2.根据权利要求1所述一种新型融合胶原蛋白肽，其特征在于，所述透皮肽的氨基酸序列如SEQ NO.5所示；所述透皮肽的氨基端具有肠激酶识别位点肽段。3.根据权利要求1所述一种新型融合胶原蛋白肽，其特征在于，所述人源Ⅲ型胶原保守肽段为第一保守肽段或第二保守肽段中的一种。4.根据权利要求3所述一种新型融合胶原蛋白肽，其特征在于，所述第一保守肽段的氨基酸序列如SEQ NO.8所示；所述第二保守肽段的氨基酸序列如SEQ NO.9所示。5.根据权利要求1所述一种新型融合胶原蛋白肽，其特征在于，所述活性功能肽为活性十肽或芋螺肽中的一种。6.根据权利要求5所述一种新型融合胶原蛋白肽，其特征在于，所述活性十肽的氨基酸序列如SEQ NO.6所示；所述芋螺肽的氨基酸序列如SEQ NO.7所示。7.根据权利要求1所述一种新型融合胶原蛋白肽，其特征在于，所述新型融合胶原蛋白肽的...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘忠，陈雅丽，鞠振宇，
申请(专利权)人：百世美生物技术浙江有限公司，
类型：发明
国别省市：