一种纤连蛋白及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种纤连蛋白及其制备方法，该纤连蛋白分子量为

【技术实现步骤摘要】
一种纤连蛋白及其制备方法


[0001]本专利技术涉及纤连蛋白的
，具体涉及一种纤连蛋白及其制备方法
。

技术介绍

[0002]纤连蛋白
(fibronectin
，简称
Fn)
是一种细胞外基质中的高分子量糖蛋白，主要以三种形式存在，即由肝细胞或内皮细胞生成的血浆纤连蛋白，由成纤维细胞
、
早期间充质细胞分泌合成的细胞纤连蛋白，以及胎盘
、
羊膜组织中的胎儿纤连蛋白
。
[0003]FN
由肝脏及血管内皮细胞生成，广泛存在于动物组织和组织液中，是一种大分子糖蛋白，具有细胞再生修复的生物学功能，目前在医疗临床上已有所应用，包括用于治疗脊柱疾病
、
烧伤等
。
经验证纤连蛋白
FN
对敏感肌肤
、
红血丝
、
医美术后的肌肤损伤
、
痘痘
、
痤疮
、
晒后损伤
、
激素脸
、<br/>干燥
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种纤连蛋白，其特征在于，所述纤连蛋白的核苷酸序列如
SEQ ID NO:1
所示；其中，核苷酸序列中含有
His
标签和肝素结构域
。2.
权利要求1所述的纤连蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)
将含有
SEQ ID NO:1
核苷酸序列的表达载体转入大肠杆菌内，加入诱导剂，诱导完成后收集菌体，得到重组工程菌；
2)
对重组工程菌经破菌进行，得到裂解的蛋白液，即为纤连蛋白
。3.
权利要求2所述的纤连蛋白的制备方法，其特征在于，步骤
2)
中，对所述裂解的蛋白液中的目的蛋白进行纯化，得到纯化后的纤连蛋白
。4.
如权利要求2或3所述的纤连蛋白的制备方法，其特征在于，所述诱导剂为
IPTG
；所述诱导剂的加入量为
0.4
～
1mM
，诱导时间为2～
5h
，诱导温度为
30
～
35℃。5.
如权利要求4所述的纤连蛋白的制备方法，其特征在于，所述诱导剂的加入量为
0.8mM
，诱导时间为
4h
，诱导温度为
34℃。6.
如权利要求3所述的纤连蛋白的制备方法，其特征在于，纯化目的蛋白选用
Ni
亲和层析和肝素亲和层析纯化洗脱处理
。7.
如权利要求6所述的纤连蛋白的制备方法，其特征在于，所述
Ni
亲和层析的纯化洗脱方法，包括以下步骤：将
Ni
层析介柱用咪唑
‑
氯化钠
‑
PB
的混合溶液平衡后，用第一平衡缓冲液平衡后，裂解的蛋白液进行上样，上样后用第一洗杂缓冲液进行洗杂，去除掉结合到柱子上的杂蛋白，再用第一洗脱缓冲液洗脱，收集洗脱峰，进行下一步肝素亲和层析纯化洗脱处理
。8.
如权利要求7所述的纤连蛋白的制备方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘忠，陈雅丽，宋祥锐，方小霞，梁钦智，
申请(专利权)人：百世美生物技术浙江有限公司，
类型：发明
国别省市：