一种可用于检测多种致病性弧菌的显色培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种可用于检测多种致病性弧菌的显色培养基。所述培养基含有蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、氯化钾、氯化镁、丙酮酸钠、蔗糖、长链烷基硫酸盐阴离子表面活性剂、亚碲酸盐、β

【技术实现步骤摘要】
一种可用于检测多种致病性弧菌的显色培养基


[0001]本专利技术属于微生物检测
，具体涉及一种可用于检测多种致病性弧菌的显色培养基。

技术介绍

[0002]副溶血性弧菌、创伤弧菌和霍乱弧菌均是革兰氏阴性细菌，呈弯曲杆状，除霍乱弧菌外其它嗜盐生长，兼性厌氧，非孢子形成，具有极生鞭毛和鞘，能运动，氧化酶阳性。它们是人类最主要的致病性弧菌，也均是人类重要的食源性致病菌。生食或食用未充分加热处理的受这些细菌污染的海产品，可导致人发生急性肠胃炎的食物中毒。此外，这些细菌，尤其是创伤弧菌，也能通过伤口感染人；如感染后未得到及时有效处理，患者有可能会发生迅速恶化为严重的组织坏死、甚至死亡。因此，检测副溶血性弧菌、创伤弧菌和霍乱弧菌，对于预防这些致病菌带来的危害具有重要意义。
[0003]TCBS(Thiosulfate citrate bile salt sucrose)培养基是检测弧菌常用的培养基。然而，它对副溶血性弧菌、创伤弧菌和霍乱弧菌的检测特异性差。在TCBS培养基上，副溶血性弧菌和创伤弧菌均不发酵蔗糖，均显绿色而不能区分开来，并且它们也容易受到不发酵蔗糖的铜绿假单胞菌等非弧菌细菌的假阳性干扰；霍乱弧菌和溶藻弧菌均发酵蔗糖，均显黄色而不能区分开来，并且它们也容易受到发酵蔗糖的嗜水气单胞菌等非弧菌细菌的假阳性干扰。尽管已有一些能更加特异地检测副溶血性弧菌的弧菌显色培养基被研发出来，例如CHROMagar Vibrio medium和Bio
‑
Chrome Vibrio medium，但是它们均不能将创伤弧菌与霍乱弧菌区分开来。并且，有文献(Di Pinto et al.Food Control,2011,22,124
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127；Su et al.Journal of Food Protection,2005,68,1454
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145)报道，CHROMagar Vibrio medium和Bio
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Chrome Vibrio medium显色培养基的生长选择性不够高，一些耐胆盐、耐亚碲酸钾的革兰氏阳性菌如粪肠球菌等也能在上面生长并给出疑似副溶血性弧菌的显色假阳性干扰；此外，这两种培养基在检测副溶血性弧菌时也存在一定比例的非显色结果，即假阴性结果，导致检测灵敏度降低。因此，研发能用于更加特异、灵敏地检测副溶血性弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌这些主要致病性弧菌的显色培养基，是十分必要的。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于根据现有培养基技术中存在的上述不足，提供一种选择性更高，可用于相对更高特异、灵敏地检测副溶血性弧菌、创伤弧菌等多种主要致病性弧菌的显色培养基。
[0005]本专利技术通过以下技术方案来实现：
[0006]一种可用于检测多种致病性弧菌的显色培养基，含有蛋白胨5～20g/L、牛肉浸粉3～15g/L、氯化钠10～25g/L、氯化钾0.5～6g/L、氯化镁0.1～10g/L、丙酮酸钠0.05～2g/L、蔗糖3～40g/L、长链烷基硫酸盐阴离子表面活性剂0.1～2g/L、亚碲酸盐0.1～3.5mg/L、β
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葡萄糖苷酶或β
‑
半乳糖苷酶显色底物0.01～0.3g/L、酸碱指示剂0.005～0.1g/L、琼脂10～
20g/L，溶剂为水。
[0007]优选的，所述的显色培养基，含有蛋白胨8～15g/L、牛肉浸粉3～10g/L、氯化钠10～20g/L、氯化钾1～5g/L、氯化镁0.5～6g/L、丙酮酸钠0.1～0.5g/L、蔗糖20～35g/L、长链烷基硫酸盐阴离子表面活性剂0.1～0.75g/L、亚碲酸盐0.2～3mg/L、β
‑
葡萄糖苷酶或β
‑
半乳糖苷酶显色底物0.05～0.25g/L、酸碱指示剂0.01～0.08g/L、琼脂10～15g/L，溶剂为水。
[0008]优选的，所述的β
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葡萄糖苷酶显色底物为吲哚酚基β
‑
葡萄糖苷；所述的β
‑
半乳糖苷酶显色底物为吲哚酚基β
‑
半乳糖苷。
[0009]优选的，所述的吲哚酚基β
‑
葡萄糖苷为5
‑
溴
‑4‑
氯
‑3‑
吲哚基
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖苷或5
‑
溴
‑6‑
氯
‑3‑
吲哚基
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖苷；所述的吲哚酚基β
‑
半乳糖苷为5
‑
溴
‑4‑
氯
‑3‑
吲哚基
‑
β
‑
D
‑
吡喃半乳糖苷或5
‑
溴
‑6‑
氯
‑3‑
吲哚基
‑
β
‑
D
‑
吡喃半乳糖苷。
[0010]优选的，所述的酸碱指示剂为甲酚红、苯酚红、中性红、溴百里香酚蓝、百里香酚蓝中的一种或两种组合。
[0011]优选的，当所述的β
‑
葡萄糖苷酶显色底物为5
‑
溴
‑4‑
氯
‑3‑
吲哚基
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖苷或β
‑
半乳糖苷酶显色底物为5
‑
溴
‑4‑
氯
‑3‑
吲哚基
‑
β
‑
D
‑
吡喃半乳糖苷时，酸碱指示剂为甲酚红、苯酚红或中性红；当所述的β
‑
葡萄糖苷酶显色底物为5
‑
溴
‑6‑
氯
‑3‑
吲哚基
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖苷或β
‑
半乳糖苷酶显色底物为5
‑
溴
‑6‑
氯
‑3‑
吲哚基
‑
β
‑
D
‑
吡喃半乳糖苷时，酸碱指示剂为溴百里香酚蓝和百里香酚蓝。
[0012]优选的，所述的长链烷基硫酸盐阴离子表面活性剂为十至十八碳长链烷基硫酸盐阴离子表面活性剂。
[0013]优选的，所述的长链烷基硫酸盐阴离子表面活性剂为十二烷基硫酸钠。
[0014]优选的，所述的亚碲酸盐为亚碲酸钾。
[0015]优选的，所述的显色培养基中含有的显色底物为β
‑
半乳糖苷酶显色底物时，所述的显色培养基还含有异丙基
‑
β
‑
D
‑
硫代半乳糖苷0.03～0.15g/L、乳糖0.1～0.5g/L。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种可用于检测多种致病性弧菌的显色培养基，其特征在于，含有蛋白胨5～20g/L、牛肉浸粉3～15g/L、氯化钠10～25g/L、氯化钾0.5～6g/L、氯化镁0.1～10g/L、丙酮酸钠0.05～2g/L、蔗糖3～40g/L、长链烷基硫酸盐阴离子表面活性剂0.1～2g/L、亚碲酸盐0.1～3.5mg/L、β
‑
葡萄糖苷酶或β
‑
半乳糖苷酶显色底物0.01～0.3g/L、酸碱指示剂0.005～0.1g/L、琼脂10～20g/L，溶剂为水。2.根据权利要求1所述的显色培养基，其特征在于，含有蛋白胨8～15g/L、牛肉浸粉3～10g/L、氯化钠10～20g/L、氯化钾1～5g/L、氯化镁0.5～6g/L、丙酮酸钠0.1～0.5g/L、蔗糖20～35g/L、长链烷基硫酸盐阴离子表面活性剂0.1～0.75g/L、亚碲酸盐0.2～3mg/L、β
‑
葡萄糖苷酶或β
‑
半乳糖苷酶显色底物0.05～0.25g/L、酸碱指示剂0.01～0.08g/L、琼脂10～15g/L，溶剂为水。3.根据权利要求1或2所述的显色培养基，其特征在于，所述的β
‑
葡萄糖苷酶显色底物为吲哚酚基β
‑
葡萄糖苷；所述的β
‑
半乳糖苷酶显色底物为吲哚酚基β
‑
半乳糖苷。4.根据权利要求3所述的显色培养基，其特征在于，所述的吲哚酚基β
‑
葡萄糖苷为5
‑
溴
‑4‑
氯
‑3‑
吲哚基
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖苷或5
‑
溴
‑6‑
氯
‑3‑
吲哚基
‑
β
‑
D
‑
吡喃葡萄糖苷；所述的吲哚酚基β
‑
半乳糖苷为5
‑
溴
‑4‑
氯
‑3‑
吲哚基
‑
β
‑
D
‑
吡喃半乳糖苷或5
‑
溴
‑6‑
氯
‑3‑...

【专利技术属性】
技术研发人员：韦献虎，吴清平，赵辉，叶青华，陈谋通，卢勉飞，张菊梅，徐环，李琦，古其会，李滢，张友雄，冯颖，丁郁，王涓，万强，
申请(专利权)人：广东环凯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：