一种阿扎胞苷杂质的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种阿扎胞苷杂质的检测方法，属于阿扎胞苷的质量控制技术领域。本发明专利技术提供了一种阿扎胞苷杂质的检测方法，采用液相色谱法，固定相为未封端的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为水相

【技术实现步骤摘要】
一种阿扎胞苷杂质的检测方法


[0001]本专利技术涉及一种阿扎胞苷杂质的检测方法，属于阿扎胞苷的质量控制


技术介绍

[0002]阿扎胞苷，又称5
‑
氮杂胞嘧啶核苷、5
‑
氮胞苷，是一种有机化合物，化学式为C8H
12
N4O5，分子量为244.205，化学名为1
‑
(β
‑
D
‑
呋喃核糖基)
‑4‑
氨基
‑
1,3,5
‑
三嗪
‑
2(1H)
‑
酮。阿扎胞苷是一种胞嘧啶类似物，主要用作抗肿瘤药，临床上用于治疗乳腺癌、肠癌、黑色素瘤、急性粒细胞性白血病等。其结构式为：
[0003][0004]杂质检测是控制药物纯度，提高药品质量的一个非常重要的环节。注射药物不纯会引起多种药物不良反应，如过敏、药物热等，口服药物不纯可能会增加不良反应的发生率，如恶心、呕吐、腹痛、腹泻等，不仅如此，还可能会影响药物的吸收，从而影响药物疗效。因此，对药物杂质的检测方法进行研究尤为重要。
[0005]在阿扎胞苷的合成及贮存过程中，不可避免地会产生一些杂质，其中常见的包括结构如下所示的杂质C、杂质G和杂质K：
[0006][0007]杂质C(呋喃核糖
‑3‑
脒基脲)为阿扎胞苷降解产生的水解杂质，被收载于美国药典USP43(5)In
‑
Process Revision阿扎胞苷质量标准草案中。
[0008]杂质G(6
‑
氨基
‑5‑
氮杂胞嘧啶)为阿扎胞苷合成起始物料5
‑
氮杂胞嘧啶中常见的杂质，产生途径如下：
[0009][0010]由于6
‑
氨基
‑
5氮杂胞嘧啶为起始物料5
‑
氮杂胞嘧啶中的主要杂质，溶解性与5
‑
氮杂胞嘧啶相似，精制过程中不易去除，专利技术人在多批5
‑
氮杂胞嘧啶中均有检出，提示有残留风险。而且，6
‑
氨基
‑
5氮杂胞嘧啶溶解性极差，在HMDS上保护过程中可能反应不完全，在成品中以6
‑
氨基
‑5‑
氮杂胞嘧啶原型的形式残留(杂质G)或参与反应产生衍生杂质4,6
‑
二氨基
‑1‑
β
‑
D
‑
1,3,5
‑
三嗪
‑
2(1H)
‑
酮(杂质K)，反应历程如下：
[0011][0012]中国专利申请CN104672289A披露了杂质G和杂质K的结构，并提及在对阿扎胞苷原料药进行质量研究时，需对原料药中相应的杂质进行含量检测，以确保制备得到符合药用标准、能够用于制备安全有效的药物制剂的原料药，但该专利申请并没有公开任何检测方法。
[0013]目前有关阿扎胞苷杂质的检测方法报道较少，尤其针对杂质K，经检索，迄今尚未见关于其检测方法的研究报道，提供一种能够有效检测阿扎胞苷杂质K的方法，对于阿扎胞苷的质量控制具有重要意义。美国药典USP43(5)In
‑
Process Revision阿扎胞苷质量标准草案中收载了阿扎胞苷杂质C的检测方法，方法如下：以Atlantis HILIC Silica 4.6*250mm，5μm为色谱柱；以乙腈
‑
甲醇
‑
0.77g/L乙酸铵缓冲盐溶液(75:20:5，v/v)为流动相，流动相用冰醋酸调节pH至4.0；流速为每分钟1.0ml；检测波长为223nm；柱温为30℃；进样体积为20μl；供试品浓度50mg/ml。上述方法并不适用于杂质K和杂质G的分析检测，而且专利技术人经实验发现，即使是采用该药典方法检测阿扎胞苷杂质C，也存在峰形差、柱效低、基线不平滑、灵敏度低等问题，导致在测量杂质色谱峰面积时的结果不准确，从而影响供试品中杂质含量检测的准确度；此外，药典方法中供试品浓度高，导致色谱柱耐受性差、色谱柱损耗较大。

技术实现思路

[0014]本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术的第一个目的在于提供一种能够有效检测阿扎胞苷杂质K的方法。本专利技术的第二个目的在于提供一种能够同时分离检测阿扎胞苷杂质C、杂质G和杂质K的方法。
[0015]本专利技术提供了一种阿扎胞苷杂质的检测方法，采用液相色谱法，固定相为未封端的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为水相
‑
乙腈＝(85～92):(8～15)，v/v，所述水相中添加了离子对试剂辛烷磺酸钠。在上述条件下，能够准确检测阿扎胞苷杂质K。
[0016]本专利技术检测方法中固定相为未封端的十八烷基硅烷键合硅胶。“封端”是指使用试剂对键合相填料进行封端以得到去活的硅胶表面。本专利技术固定相填料未进行封端，其表面存在裸露的硅醇基。
[0017]进一步地，流动相为水相
‑
乙腈＝(87～90):(10～13)，v/v。
[0018]优选地，流动相为水相
‑
乙腈＝(87～89):(11～13)，v/v。在上述条件下，能够同时分离检测阿扎胞苷杂质C、杂质G和杂质K。
[0019]进一步优选地，流动相为水相
‑
乙腈＝88:12，v/v。在上述条件下，保留时间合适且分离度较好。
[0020]进一步地，采用上述流动相进行等度洗脱。
[0021]进一步地，水相中辛烷磺酸钠溶液的浓度为8～12mmol/L。
[0022]优选地，水相中辛烷磺酸钠溶液的浓度为9～11mmol/L。
[0023]进一步优选地，水相中辛烷磺酸钠溶液的浓度为10mmol/L。
[0024]进一步地，水相调节pH至2.5～2.7。
[0025]优选地，水相调节pH至2.6。
[0026]进一步优选地，用磷酸调节所述水相的pH。
[0027]进一步地，固定相为Agilent InfinityLab Poroshell 120SB
‑
C18或其等效色谱柱。
[0028]优选地，Agilent InfinityLab Poroshell 120SB
‑
C18的填料粒径为1.9～4μm。
[0029]进一步优选地，Agilent InfinityLab Poroshell 120SB
‑
C18的填料粒径为4μm。
[0030]优选地，Agilent InfinityLab Poroshell 120SB
‑
C18的内径为2.1～4.6mm。
[0031]进一步优选地，Agilent InfinityLab Poroshell 120SB
‑
C18的内径为4.6mm。
[0032]优选地，A本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种阿扎胞苷杂质的检测方法，其特征是：采用液相色谱法，固定相为未封端的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为水相
‑
乙腈＝(85～92):(8～15)，v/v，所述水相中添加了离子对试剂辛烷磺酸钠。2.如权利要求1所述的检测方法，其特征是：流动相为水相
‑
乙腈＝(87～90):(10～13)，v/v；优选地，流动相为水相
‑
乙腈＝(87～89):(11～13)，v/v；进一步优选地，流动相为水相
‑
乙腈＝88:12，v/v；和/或，采用所述流动相进行等度洗脱。3.如权利要求1所述的检测方法，其特征是：所述水相中辛烷磺酸钠的浓度为8～12mmol/L；优选地，所述水相中辛烷磺酸钠的浓度为9～11mmol/L；进一步优选地，所述水相中辛烷磺酸钠的浓度为10mmol/L。4.如权利要求1所述的检测方法，其特征是：所述水相调节pH至2.5～2.7；优选地，所述水相调节pH至2.6；进一步优选地，用磷酸调节所述水相的pH。5.如权利要求1所述的检测方法，其特征是：所述固定相为Agilent InfinityLab Poroshell 120SB
‑
C18或其等效色谱柱；优选地，Agilent InfinityLab Poroshell 120SB
‑
C18的填料粒径为1.9～4μm，更优选4μm；优选地，Agilent InfinityLab Poroshell 120SB...

【专利技术属性】
技术研发人员：许敏，胡和平，牛坡，伍卓雪，樊星，张利，
申请(专利权)人：四川汇宇海玥医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：