高效液相色谱法检测氨磷汀中间体纯度及其有关物质的方法技术

本发明专利技术属于药物分析检测领域，涉及一种氨磷汀中间体

【技术实现步骤摘要】
高效液相色谱法检测氨磷汀中间体纯度及其有关物质的方法


[0001]本专利技术属于药物分析检测领域，具体涉及一种高效液相色谱法检测氨磷汀中间体纯度及其有关物质的方法
。

技术介绍

[0002]氨磷汀
(amifostine)
，
CLINIGEN
公司开发的有机硫化磷酸化合物细胞保护剂，在组织中被碱性磷酸酶水解脱磷酸后，代谢为含巯基的活性代谢物
(H2N
‑
(CH2)3‑
NH
‑
(CH2)2‑
SH)
，因巯基具有清除组织中的自由基的作用，故能降低顺铂
、
环磷酰胺及丝裂霉素等的毒性
。
氨磷汀是一种广谱的正常细胞保护剂，主要用于各种癌症的辅助治疗
。
减轻化疗引起的肾脏
、
骨髓
、
心脏
、
耳及神经系统的毒性，及放疗前使用可显著减少口腔干燥和粘膜炎的发生
。
[0003]现有技术公开的氨磷汀合成方法中，通常采用
N
‑
(2
‑
溴乙基
)
‑
1,3
‑
丙二胺二氢溴酸盐
(
简称
M2)
作为氨磷汀合成过程中的重要中间体，其分子式
C5H
15
Br3N2，分子量
342.90
，化学结构如下式：
[0004][0005]由于中间体<br/>M2
是合成氨磷汀产品的前一步骤，因此中间体
M2
的纯度
、
杂质直接影响氨磷汀的质量，从而也直接影响该药物的安全性和疗效
。
因此，在中间体
M2
工艺过程中监控中间体
M2
纯度和其杂质的含量对氨磷汀质量的控制具有非常重要的作用
。
[0006]在氨磷汀的合成过程中，其中间体
M2
可能会存在关键的副反应产物
、
反应原料残留的杂质
。
氨磷汀中间体
M2
合成过程中控制的有关物质有三个，分别如下：
[0007]中间体
M1
，
N
‑
(2
‑
羟乙基
)
‑
1,3
‑
丙二胺二氢溴酸盐，反应原料残留的杂质，化学结构如下式：
[0008][0009]高哌嗪，
1,4
‑
二氮环庚烷，副反应产物，化学结构如下式：
[0010][0011]M2
‑
A
，
N,N
‑
二
(2
‑
溴乙基
)
‑
1,3
‑
丙二胺二氢溴酸盐，副反应产物，化学结构如下式：
[0012][0013]对于上述提到的杂质，特别是
M2
‑
A
杂质，其结构含有卤代烷烃结构，为警示结构，因此
M2
‑
A
为潜在基因毒性杂质
。
根据
ICH M7
指导原则规定，杂质含有警示结构
、
与原料药结构无关以及无致突变性数据，判断为3类致突变杂质，则该类杂质的含量控制在可接受的限度以下
(
合适的
TTC
，其中
TTC
是指开发毒理学关注阈值，用以确定所有未经研究的化学物质
的无致癌性或其他毒性作用的风险的可接受的摄入量
)。
[0014]由于氨磷汀适用于治疗卵巢癌
、
头颈癌放疗
、
非小细胞肺癌，治疗周期均小于
10
年，因此根据
ICH M7
指导原则的要求，氨磷汀用药在
10
年以内，杂质的
TTC
可接受摄入量为
10
μ
g/
天
。
原研说明书中规定的用药量为
910mg/m2，结合欧洲药典中的细菌内毒素指导原则，最大人体皮肤表面积为
1.8m2，计算得出
API
最大日剂量为
1.638g/day。
则
M2
‑
A
在氨磷汀中的安全限度为
(10
μ
g/
天
)/(1.638g/
天
)
＝
6ppm。
[0015]经检索，目前还没有一种分离上述已知杂质检测方法的报道，但有文献
(2014
年大连理工大学硕士学位论文“氨磷汀及其中间体新分析方法研究”)
报道采用色谱柱为
Phenomenex Luna C18(4.6mm
×
250mm
，5μ
m)
，以甲醇
‑
0.94g/L
己烷磺酸钠水溶液
(
磷酸调
pH
值至
2.5)
为
40
：
60
，二极管阵列检测器，检测波长为
220nm
，流速为
1ml/min
，进样量为
10
μ
l
的反向高效液相色谱条件，建立了中间体
M2
的分析方法
。
本专利技术人尝试采用上述的色谱条件，且对流动相甲醇
‑
0.94g/L
己烷磺酸钠水溶液
(
磷酸调
pH
值至
2.5)
比例调整为5：
95
，对中间体
M2
的纯度和其有关物质进行检测，发现仅有一个出峰时间，经分析，
M2
‑
A
与
M2
结构相似，其游离态均没有紫外吸收的官能团，推测是溴离子的出峰时间，专利技术人在对比例1证实了上述表明的结果，因此说明文献实际是通过检测中间体
M2
中溴离子含量，然后根据溴离子含量间接计算
M2
含量的方法，该方法并不适用于中间体
M2
纯度和其有关物质的检测
。
[0016]因此，现迫切需要一种不仅可以快速
、
简单且准确地检测中间体
M2
的纯度，而且能够检测中间体
M2
中基因毒性杂质
M2
‑
A
以及其它有关物质含量的方法
。

技术实现思路

[0017]本专利技术第一个目的在于提供一种快速
、
准确地检测中间体
M2
的纯度的方法
。
[0018]本专利技术第二个目的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
高效液相色谱法测定氨磷汀中间体
N
‑
(2
‑
溴乙基
)
‑
1,3
‑
丙二胺二氢溴酸盐纯度以及其有关物质的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用未键合的硅胶颗粒为填充剂的色谱柱，流动相
A
为乙腈，流动相
B
为
50
±
5mmol/L
甲酸铵溶液且用甲酸调
pH
值至
2.2
±
0.1
，将流动相
A
和
B
按一定比例进行梯度洗脱；所述梯度洗脱比例为：0～
2min
，
80
％
A
；2～
30min
，
80
％
→
50
％
A
；
30
～
30.1min
，
50
％
→
80
％
A
；
30.1
～
35min
，
80
％
A。2.
根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱为
Waters Altantis HILIC Slica
，规格：
4.6mm
×
250mm
×5μ
m。3.
根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相
B
为
50mmol/L
甲酸铵溶液且用甲酸调
pH
值至
2.2。4.
根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相的流速为
0.8
～

【专利技术属性】
技术研发人员：段浪，钟蕾，周飞，付李，胡和平，丁兆，
申请(专利权)人：四川汇宇海玥医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：