血清miRNA在辅助诊断脑卒中后认知障碍中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物学诊断技术领域，公开了一种辅助诊断脑卒中后认知障碍的miRNA标志物，其特征在于，所述miRNA选自以下组中的至少一种：miRNA

【技术实现步骤摘要】
血清miRNA在辅助诊断脑卒中后认知障碍中的应用


[0001]本专利技术属于生物学诊断
，尤其涉及一种血清miRNA在辅助诊断脑卒中后认知障碍中的应用。

技术介绍

[0002]脑卒中后认知障碍是指在卒中这一临床事件发生以后出现的达到认知障碍诊断标准的一系列综合征。脑卒中极易导致认知功能障碍，从而严重影响患者的生活质量及生存时间。但是目前脑卒中后认知障碍的临床诊断主要依赖临床评估、神经认知功能测试及神经影像学检查，但这些方法存在主观性强、特异性差的缺点，目前尚缺乏被广泛认可的统一诊断标准。因此，寻找客观且灵敏的早期诊断方法具有重要的临床意义。
[0003]近年来，研究发现miRNA是用于诊断多种疾病，如阿尔茨海默症，血管性认知障碍，帕金森等，被认为是一种新颖且有价值的生物标志物。miRNA有望成为脑卒中后认知障碍诊断的潜在生物标志物，但何种miRNA可用于诊断脑卒中后认知障碍尚有待研究。

技术实现思路

[0004]针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种血清miRNA在辅助诊断脑卒中后认知障碍中的应用。
[0005]本专利技术是这样实现的，一种辅助诊断脑卒中后认知障碍的miRNA标志物，其特征在于，所述miRNA选自以下组中的至少一种：miRNA
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34、miRNA
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21、miRNA
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135。
[0006]进一步，所述miRNA
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34、miRNA
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21、miRNA
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135的核苷酸序列分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示。
[0007]miRNA
‑
34、miRNA
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21、miRNA
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135作为辅助诊断脑卒中后认知障碍的分子标志物的应用，所述辅助诊断产品为基因芯片或试剂盒；
[0008]所述基因芯片包括固相载体以及固定在所述固相载体上的寡核苷酸探针；
[0009]所述试剂盒包括用于检测所述miRNA
‑
34、miRNA
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21、miRNA
‑
135的表达水平的试剂和用于配制反转录反应体系的试剂。
[0010]进一步，所述寡核苷酸探针包括特异性地对应于所述miRNA
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34、miRNA
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21、miRNA
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135的部分或全部序列。
[0011]进一步，所述寡核苷酸探针是固定在尼龙膜上的。
[0012]进一步，所述试剂盒的检测样品为患者血样。
[0013]进一步，所述试剂盒使用SYBRGREEN系统通过定量实时PCR检测miRNA的表达。
[0014]进一步，所述定量实时PCR反应条件为：95℃预变性4min后，按照95℃15s、60℃30s、72℃30s为一个循环，共进行40循环。
[0015]本专利技术另一目的在于提供一种所述的一种辅助诊断脑卒中后认知障碍的miRNA标志物的制备方法，所述辅助诊断脑卒中后认知障碍的miRNA标志物的制备方法具体包括：
[0016]S1：选取成熟miRNA
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34、miRNA
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21、miRNA
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135为辅助诊断脑卒中后认知障碍miRNA
NO：2和SEQ ID NO：3所示。
[0031]miRNA
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34、miRNA
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21、miRNA
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135作为辅助诊断脑卒中后认知障碍的分子标志物的应用，所述辅助诊断产品为基因芯片或试剂盒；
[0032]所述基因芯片包括固相载体以及固定在所述固相载体上的寡核苷酸探针；
[0033]所述试剂盒包括用于检测所述miRNA
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34、miRNA
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21、miRNA
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135的表达水平的试剂和用于配制反转录反应体系的试剂。
[0034]所述寡核苷酸探针包括特异性地对应于所述miRNA
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34、miRNA
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21、miRNA
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135的部分或全部序列。
[0035]所述寡核苷酸探针是固定在尼龙膜上的。
[0036]所述试剂盒的检测样品为患者血样。
[0037]所述试剂盒使用SYBRGREEN系统通过定量实时PCR检测miRNA的表达。
[0038]所述定量实时PCR反应条件为：95℃预变性4min后，按照95℃15s、60℃30s、72℃30s为一个循环，共进行40循环。
[0039]二、应用实施例。为了证明本专利技术的技术方案的创造性和技术价值，该部分是对权利要求技术方案进行具体产品上或相关技术上的应用的应用实施例。
[0040]如图1所示，本专利技术将一种辅助诊断脑卒中后认知障碍的miRNA标志物的制备方法应用于辅助诊断脑卒中后认知障碍的miRNA标志物，所述辅助诊断脑卒中后认知障碍的miRNA标志物的制备方法具体包括：
[0041]S1：选取成熟miRNA
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34、miRNA
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21、miRNA
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135为辅助诊断脑卒中后认知障碍miRNA标记物；
[0042]S2：分别确定miRNA
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34、miRNA
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21、miRNA
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135与脑卒中后认知障碍的相关性，利用高通量测序技术检测外周全血中关于miRNA
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34、miRNA
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21、miRNA
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135的表达水平；
[0043]S3：制备脑卒中后认知障碍中产品：基因芯片或试剂盒。
[0044]本专利技术将一种利用所述辅助诊断脑卒中后认知障碍的miRNA标志物的制备方法制备的缺血性脑卒中miRNA标记物产品，应用于辅助诊断脑卒中后认知障碍检测。
[0045]以上所述，仅为本专利技术的具体实施方式，但本专利技术的保护范围并不局限于此，任何熟悉本
的技术人员在本专利技术揭露的技术范围内，凡在本专利技术的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本专利技术的保护范围之内。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种辅助诊断脑卒中后认知障碍的miRNA标志物，其特征在于，所述miRNA选自以下组中的至少一种：miRNA
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34、miRNA
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21、miRNA
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135。2.根据权利要求1所述的辅助诊断脑卒中后认知障碍的miRNA标志物，其特征在于，所述miRNA
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34、miRNA
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21、miRNA
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135的核苷酸序列分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示。3.miRNA
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34、miRNA
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21、miRNA
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135作为辅助诊断脑卒中后认知障碍的分子标志物的应用，其特征在于，所述辅助诊断产品为基因芯片或试剂盒；所述基因芯片包括固相载体以及固定在所述固相载体上的寡核苷酸探针；所述试剂盒包括用于检测所述miR
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21、miR
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132和miR
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200b的表达水平的试剂和用于配制反转录反应体系的试剂。4.根据权利要求3所述的miRNA
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34、miRNA
‑
21、miRNA
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135作为辅助诊断脑卒中后认知障碍的分子标志物的应用，其特征在于，所述寡核苷酸探针包括特异性地对应于所述miRNA
‑
34、miRNA
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21、miRNA
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135的部分或全部序列。5.根据权利要求3所述的miRNA
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34、miRNA
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21、miRNA
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135作为辅助诊断脑卒中后认知障碍的分子标志物的应用，其特征在于，所述寡核苷酸探针是固定在尼龙膜上的。6.根据权利要求3所述的miRNA
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34、mi...

【专利技术属性】
技术研发人员：李亚梅，余茜，冯荣建，牟杨，黄林，张晶，
申请(专利权)人：四川省医学科学院，
类型：发明
国别省市：