OTUD6A蛋白在制备预防或治疗牙周炎的药物中的用途制造技术

本发明专利技术公开了OTUD6A蛋白在制备预防或治疗牙周炎的药物中的用途，本发明专利技术通过构建OTUD6A敲除的小鼠模型，发现敲除OTUD6A会加重小鼠牙周炎模型中炎症及组织破坏，基于OTUD6A在牙周炎中的作用功能，其为研制预防或治疗牙周炎疾病药物提供了靶标，通过建立OTUD6A敲除或过表达细胞模型，OTUD6A过表达后可降低抑制巨噬细胞炎症和线粒体损伤以及抑制巨噬细胞破骨向分化，OTUD6A敲除后加剧了抑制巨噬细胞炎症和线粒体损伤并促进了巨噬细胞破骨向分化，揭示了将OTUD6A促进剂用于制备预防和治疗牙周炎疾病的应用前景。牙周炎疾病的应用前景。牙周炎疾病的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
OTUD6A蛋白在制备预防或治疗牙周炎的药物中的用途


[0001]本专利技术属于生物医药领域，特别涉及OTUD6A蛋白用于治疗牙周炎的应用。

技术介绍

[0002]牙周炎是细菌感染引起，累及牙周组织慢性炎症性、破坏性疾病，以牙周软组织损伤和牙槽骨吸收为关键特征。牙周炎是成年人牙齿丧失的首要原因，影响全世界超过50％的成年人。牙周炎不仅影响口腔健康，同时作为动脉粥样硬化、糖尿病等系统疾病的风险因素，严重危害全身健康。鉴于牙周炎的严重性和危险性，对牙周炎进行防治研究具有重要意义。
[0003]OTU家族蛋白是一类去泛素化蛋白，通过去除蛋白质上的多泛素链从而稳定蛋白质。研究表明OTU家族包括OTUD1、OTUD3、OTUD5以及OTUD7B等蛋白可调节多种原癌基因和抑癌基因的蛋白质稳定性。近年来，研究发现OTU亚家族成员能特异性识别不同泛素链类型，从而调控多种重要信号通路，如OTUD7B可通过泛素化TRAF3调控NF
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kB信号，OTUB1可抑制非经典的DNA损伤修饰依赖的泛素化，OTULIN调控LUBAC介导的线性泛素化控制细胞死亡、炎症反应和血管发生。
[0004]目前对OTU亚家族成员OTUD6A的研究主要集中在其在前列腺癌、膀胱癌、胶质瘤等肿瘤中的调控，但对OTUD6A在牙周炎中的功能和作用机制目前尚未见报道。

技术实现思路

[0005]针对现有技术存在的不足，本专利技术旨在于提供一种OTUD6A蛋白的新用途。
[0006]为实现上述目的，
[0007]本专利技术提供OTUD6A蛋白作为药物靶标在筛选预防或治疗牙周炎的药物中的用途，所述的预防或治疗牙周炎的药物是增加OTUD6A蛋白表达的药物。
[0008]本专利技术提供OTUD6A蛋白促进剂在制备预防或治疗牙周炎的药物中的用途，所述的OTUD6A蛋白促进剂是增加OTUD6A蛋白表达的药物。
[0009]作为优选的，所述药物具有抑制牙周炎炎症的功能。
[0010]作为优选的，所述药物具有抑制破骨细胞分化的功能。
[0011]作为优选的，所述药物具有减少牙槽骨吸收的功能。
[0012]作为优选的，所述药物为通过恢复线粒体功能减少牙周炎炎症和/或抑制破骨细胞分化和/或牙槽骨吸收药物。
[0013]本专利技术药物的剂型可以是口服剂的形式，也可以是局部注射给药的剂型，所有使用的剂型形式都是药学领域普通技术人员所熟知的。
[0014]本专利技术的药物可以本领域已知的途径施用于受试者，施用的剂量将取决于接受者的年龄、健康和体重，联用药物的种类，治疗频率，给药途径等。
[0015]本专利技术提供一种牙周炎小鼠模型的制备方法，其步骤如下：
[0016]第一步、制备OTUD6A敲除的小鼠；
[0017]第二步、用OTUD6A敲除的小鼠通过牙龈卟啉单胞菌内毒素涂抹结合丝线结扎建立牙周炎模型。
[0018]作为优选的，采用5
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6周龄OTUD6A敲除的小鼠，实验前一周在小鼠饮水中加1mg/ml卡那霉素，实验前一天无菌6
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0结扎丝线在厌氧环境下置于含有牙龈卟啉单胞菌内毒素(P.g
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LPS)的培养基中孵育1天备用，对小鼠腹腔注射氯胺酮和甲苯噻嗪混合物麻醉，丝线结扎双侧上颌第二磨牙构建牙周炎模型，丝线结扎14天后去除丝线。本专利技术具有如下优点：
[0019]本专利技术通过构建OTUD6A敲除的小鼠模型，并在其基础上构建牙周炎模型，通过检测其牙周组织破坏程度和炎症水平，发现与野生型小鼠构建的牙周炎相比，敲除OTUD6A的小鼠牙周炎的组织破坏显著加重。基于OTUD6A在牙周炎中的作用功能，其为研制预防或治疗牙周炎疾病药物提供了靶标。同时，可通过敲除或过表达OTUD6A来制备牙周炎动物模型或者细胞模型为研制预防或治疗牙周炎疾病药物提供了实验基础。
[0020]本专利技术通过建立OTUD6A的过表达细胞模型，发现过表达OTUD6A可抑制巨噬细胞炎症、线粒体损伤以及破骨向分化。通过建立OTUD6A敲除细胞模型，发现OTUD6A敲除加剧巨噬细胞炎症及线粒体损伤、并促进巨噬细胞破骨向分化。本专利技术揭示了OTUD6A在调控牙周炎发生发展中的重要作用，以及将OTUD6A促进剂用于制备预防和治疗牙周炎疾病的应用前景。
附图说明
[0021]图1a.OTUD6A
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小鼠和WT对照小鼠进行了基因鉴定电泳图；
[0022]图1b.OTUD6A
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小鼠和WT对照小鼠牙周组织中OTUD6A基因表达水平，*P<0.05。
[0023]图2a.OTUD6A
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小鼠和WT对照小鼠牙周炎模型牙槽骨的Micro
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CT三维重建图和矢状面图，红色区域表示上颌骨第二磨牙釉牙骨质界到牙槽嵴顶的区域范围；
[0024]图2b.OTUD6A
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小鼠和WT对照小鼠釉牙骨质界到牙槽嵴顶的区域范围结果及统计分析，**P<0.01，***P<0.001；
[0025]图2c.OTUD6A
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小鼠和WT对照小鼠牙周炎模型牙槽骨骨密度结果及统计分析，*P<0.05，**P<0.01；
[0026]图2d.OTUD6A
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小鼠和WT对照小鼠牙周炎模型牙槽骨骨量与总体积比值(BV/TV)结果及统计分析，***P<0.001。
[0027]图3.OTUD6A
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小鼠和WT对照小鼠牙周炎模型牙槽骨苏木素
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伊红染色(HE)染色结果。
[0028]图4.OTUD6A
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小鼠和WT对照小鼠牙周炎模型牙槽骨酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)染色结果。
[0029]图5a.OTUD6A在P.g
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LPS诱导的牙周炎体外模型中蛋白表达情况及结果，*P<0.05，****P<0.0001；
[0030]图5b.OTUD6A在RANKL诱导的牙周炎体外模型中蛋白表达情况及结果，**P<0.01。
[0031]图6a.OTUD6A敲除的巨噬细胞中P.g
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LPS诱导的牙周炎体外模型TNF
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a蛋白表达量统计分析，****P<0.0001；
[0032]图6b.OTUD6A敲除的巨噬细胞中P.g
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LPS诱导的牙周炎体外模型IL
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6蛋白表达量统计分析，*P<0.05，**P<0.01；
[0033]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.OTUD6A蛋白作为药物靶标在筛选预防或治疗牙周炎的药物中的用途，其特征在于：所述的预防或治疗牙周炎的药物是增加OTUD6A蛋白表达的药物。2.OTUD6A蛋白促进剂在制备预防或治疗牙周炎的药物中的用途，其特征在于：所述的OTUD6A蛋白促进剂是增加OTUD6A蛋白表达的药物。3.根据权利要求2所述OTUD6A蛋白促进剂在制备预防或治疗牙周炎的药物中的用途，其特征在于：所述药物具有抑制牙周炎炎症的功能。4.根据权利要求2所述OTUD6A蛋白促进剂在制备预防或治疗牙周炎的药物中的用途，其特征在于：所述药物具有抑制破骨细胞分化的功能。5.根据权利要求2所述OTUD6A蛋白促进剂在制备预防或治疗牙周炎的药物中的用途，其特征在于：所述药物具有减少牙槽骨吸收的功能。6.根据权利要求2所述OTUD6A蛋白促进剂在制...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙晓瑜，林天门，陈书虹，吴彤，赵浙妤，黄盛斌，梁广，
申请(专利权)人：温州医科大学附属口腔医院，
类型：发明
国别省市：