一种负载金丝桃苷的乳清蛋白-魔芋葡甘聚糖纳米颗粒及其制备方法技术

本发明专利技术属于生物材料与医药制剂领域，涉及一种负载金丝桃苷的乳清蛋白

【技术实现步骤摘要】
一种负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒及其制备方法


[0001]本专利技术属于生物材料与医药制剂
，涉及一种负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒及其制备方法。

技术介绍

[0002]金丝桃苷是一种脂溶性黄酮，存在于多种植物中，如花椒叶、山楂、胡椒和连翘。最近的研究表明，金丝桃苷作为黄酮类化合物具有较强生物活性，如抗氧化、保护肝脏、抗抑郁、抗肿瘤和抗菌作用等。然而，金丝桃苷的低水溶性、低化学稳定性、体内快速的代谢消除率和低生物利用度严重限制了其在食品和药品方面的应用。已有研究表明，基于生物聚合物(蛋白质和多糖)的复合纳米颗粒可用于封装、保护和传递生物活性化合物。然而，目前负载着金丝桃苷的纳米颗粒的研究还较少。因此，开发和设计安全且生物利用率高的负载金丝桃苷纳米颗粒，对于改善金丝桃苷利用的局限性和扩大其在功能食品和医药方面的应用具有重要意义。
[0003]乳清蛋白是牛乳经酸化(pH 4.6)沉淀分离酪蛋白后，乳清中蛋白质的总称，约为牛乳蛋白的18
‑
20％。乳清蛋白具有细密的折叠结构，在乳中以高度分散状态存在，热稳定性差。根据纯度的不同，乳清蛋白可分为乳清浓缩蛋白，乳清分离蛋白以及乳清水解蛋白。研究发现乳清蛋白具有良好的结合疏水性物质的能力，然而，因其强的疏水性使其冻干后的纳米颗粒很难在水中复溶，且在胃肠环境条件下易于聚集并容易释放其包封的生物活性物质，这极大的限制了其在递送生物活性物质方面的应用。
[0004]魔芋葡甘聚糖是与淀粉和纤维素同为可再生的天然高分子多糖，具有水溶性、持水性、胶凝吸附性、成膜性及生物可降解等多种特性，可用于开发凝胶类相关产品，如果冻、软糖、布丁和果酱等，市场前景广阔。在众多优良特性中，其良好的胶凝性最为突出，乙酰基是魔芋葡甘聚糖分子链上的特征基团，在碱性条件下加热会发生脱乙酰基，形成热不可逆的凝胶，在食品研发中应用广泛。但魔芋葡甘聚糖凝胶在形成阶段易出现析水多，包裹性能较差，机械性能偏弱等缺陷，制约了其在食品领域的研发与应用。从目前研究来看，尝试将魔芋葡甘聚糖与不同物质进行复配，来改善凝胶体系的性能是食品领域研究的热点。
[0005]乳清蛋白与水溶性多糖相互作用形成的复合纳米颗粒递送载体为改善生物活性化合物的水分散性、生物利用度以及递送效率提供了有效的策略。有研究发现，多糖涂覆的乳清蛋白纳米颗粒递送载体可以显著改善疏水性化合物(如黄酮类化合物)的水分散性、生物活性以及释放特性。因此，开发并探究负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒，改善金丝桃苷的水分散性和生物利用率，为扩大其在食品、医药领域的应用具有重要的意义。

技术实现思路

[0006]本专利技术要解决的技术问题是：为了解决上述
技术介绍
中存在的问题，提供一种负
载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒及其制备方法，从而克服金丝桃苷应用的现有技术中存在的口服利用率低的问题。
[0007]本专利技术是通过以下技术手段来实现的：
[0008]一种负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒的制备方法包括如下步骤：
[0009](1)将魔芋葡甘聚糖粉末溶解在100mL蒸馏水中，在60℃下以600rpm磁力搅拌1.5h，制成2.1g/L的魔芋葡甘聚糖溶液；
[0010](2)将乳清蛋白溶于20mL蒸馏水中，在25℃下以500rpm磁力搅拌0.25h，制成0.9g/L的乳清蛋白溶液；
[0011](3)将步骤(2)得到的溶液缓慢滴入步骤(1)得到的溶液中，在60℃下以1000rpm磁力搅拌0.5h，超声0.4h，置于4℃冰箱保存，得到质量比为7：3的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒分散液；
[0012](4)将金丝桃苷粉末溶于乙醇中，按比例缓慢滴入步骤(3)得到的溶液，常温避光状态以400rpm磁力搅拌3h，均质10min，得到负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖复合物溶液；
[0013](5)冷冻离心步骤(4)得到的溶液，以除去游离的金丝桃苷，将沉淀冷冻干燥，得粉状负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖复合纳米颗粒。
[0014]本方案所述的负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒，其特征是所述的金丝桃苷活性成分的纯度在98％以上，为标准分析品。
[0015]本方案所述的负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒，其特征在于(3)中所述的超声条件为100W探头超声5
‑
10min，其中探头工作10s，间隙5s。
[0016]本方案所述的负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒，其特征在于(4)中所述的均质条件为5
‑
10min，其中探头工作30s，间隙5s。
[0017]本方案所述的负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒，所述步骤(4)中金丝桃苷与乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒分散液的质量比为1:60
‑
1:20(w/w)。
[0018]本专利技术所述的负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒，其包封率可以采用下述方法进行测定：
[0019]取搅拌均匀的负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖溶液分装到1.5ml的离心管中，10000r/min离心10min，取其上清液0.5mL分别置于10ml的容量瓶中，用95％的乙醇定容，乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖分散液的上清液(0.5ml，用95％的乙醇分别定容于10ml的容量瓶中)为对照，15min后用酶标仪(Synergy HT,BioTek,USA)在360nm波长下测其吸光值，并代入标准曲线方程，计算其所对应的金丝桃苷的质量作为游离药物浓度，按下计算公式计算包封率；包封率＝[包封药物浓度/(游离药物浓度+包封药物浓度)]×
100％。
[0020]本方案所述的负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒，其特征在于所述步骤S5中离心条件为1500
‑
3000rpm冷冻离心10
‑
20min。
[0021]本方案所述的负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒，其特征在于所述步骤(5)中冷冻干燥的真空冷冻温度为
‑
40～
‑
60℃，冷冻时间12
‑
24h。
[0022]本专利技术的积极效果在于：
[0023]1、本专利技术的一种负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒的制备方法
中，纳米颗粒的膜材主要成分与生物膜相似，具有在体内无毒无害、安全可靠的优点，本专利技术制备的负载金丝桃苷的乳清蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒的制备方法，其特征在于包括蛋白多糖复合物和黄酮活性成分组成，包括如下步骤：(1)将魔芋葡甘聚糖粉末溶解在100mL蒸馏水中，在60℃下以600rpm磁力搅拌1.5h，制成2.1g/L的魔芋葡甘聚糖溶液；(2)将乳清蛋白溶于20mL蒸馏水中，在25℃下以500rpm磁力搅拌0.25h，制成0.9g/L的乳清蛋白溶液；(3)将步骤(2)得到的溶液缓慢滴入步骤(1)得到的溶液中，在60℃下以1000rpm磁力搅拌0.5h，超声0.4h，置于4℃冰箱保存，得到质量比为7：3的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒分散液；(4)将金丝桃苷粉末溶于乙醇中，按比例缓慢滴入步骤(3)得到的溶液，常温避光状态以400rpm磁力搅拌3h，均质10min，得到负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖复合物溶液；(5)冷冻离心步骤(4)得到的溶液，以除去游离的金丝桃苷，将沉淀冷冻干燥，得粉状负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖复合纳米颗粒。2.根据权利要求1所述的一种负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒的制备方法，其特征在于，其特征在于所述的金丝桃苷活性成分的纯度在98％以上，为标准分析品。3.根据权利要求1所述的一种负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒的制备方法，其特征在于，其特征在于(3)中所述的超声条件为100W探头超声5
‑
10min，其中探头工作10s，间隙5s。4.根据权利要求1所述的一种负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒的制备方法，其特征在于，其特征在于(4)中所述的均质条件为5
‑
10min，其中探头工作30s，间隙5s。5.根据权利要求1所述的一种负载金丝桃苷的乳清蛋白
‑
魔芋葡甘聚糖纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中金丝桃苷与乳清蛋白
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：高峰，杜田娇，张铁华，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：