一种柽柳组织快繁方法技术

本发明专利技术公开了一种柽柳组织快繁方法，包括以下步骤：S1.外植体消毒：将切段后的柽柳外植体依次采用酒精、氯化汞消毒；S2.接种：然后将消毒后的外植体接入培养基上，薄膜封口，于24～26℃、光暗交替条件下培养至少60d，获得无菌苗；S3.炼苗移栽：将所述无菌苗置于带有小拱棚的日光温室中炼苗3～5d，然后去掉封口膜，加入适量无菌水，再炼苗3～5d，移栽于沙土苗床上，保持在温度为23～26℃、湿度70～80％下培养，待长出新根后，去掉小拱棚，正常管理，翌年移栽至苗圃地。本申请大大简化了组织培养步骤，同时通过延长无菌苗培养时间，大大提高了移栽成活率，适宜用于柽柳大规模生产育苗。适宜用于柽柳大规模生产育苗。适宜用于柽柳大规模生产育苗。

【技术实现步骤摘要】
一种柽柳组织快繁方法


[0001]本专利技术属于植物组织培养
，具体涉及了一种柽柳组织快繁方法。

技术介绍

[0002]柽柳(Tamarix chinensis)，是柽柳科、柽柳属植物，花为两性花，花小密集，春、夏、秋三季均可开花。花色为红色、粉红色，少白色。全世界共存有约90种，多分布于干旱盐碱地区，具有抗干旱、耐盐碱的特性，在干旱、半干旱的沙荒地和盐碱地区作为优势物种分布广泛，是防止水土流失及改良盐碱地的优良树种。
[0003]生产上柽柳的育苗主要采用扦插育苗和种子繁殖技术，除此之外，有关柽柳组织培养的方法也有少量报道，如王方琳等公开的“长穗柽柳组织培养即植株再生研究”，但是研究重点集中在组织培养阶段，未解决从组培到田间移栽的问题，采用传统方法移栽成活率不到40％，而且其涉及的组织培养包括愈伤组织诱导、不定芽诱导和增殖培养三个阶段，工序复杂，所需时间相对较长。
[0004]因此，本申请针对上述技术问题，提出一种柽柳组织培养时间短、田间移栽成活率高的快繁方法。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的就在于为解决现有技术的不足，而提供一种柽柳组织快繁方法。
[0006]本专利技术的目的是以下述技术方案实现的：
[0007]一种柽柳组织快繁方法，包括以下步骤：
[0008]S1.外植体消毒：将切段后的柽柳外植体依次采用酒精、氯化汞消毒；
[0009]S2.接种：然后将消毒后的外植体接入培养基上，薄膜封口，于24～26℃、光暗交替条件下培养至少60d，获得无菌苗；所述培养基为添加了吲哚乙酸的1/2MS培养基，所述吲哚乙酸添加量为0.08～0.12mg/L培养基；
[0010]S3.炼苗移栽：将所述无菌苗置于带有小拱棚的日光温室中炼苗3～5d，然后去掉封口膜，加入适量无菌水，加水量以没过培养基为宜，再炼苗3～5d，移栽于沙土苗床上，保持在温度为23～26℃、湿度70～80％下培养，待长出新根后，去掉小拱棚，正常管理，翌年移栽至苗圃地。
[0011]优选的，所述外植体通过下述方式采集获得：采集野外柽柳无病虫害、健康的成熟枝条，剪成10～15cm插穗，于营养钵中扦插，以其生长出的嫩枝作为外植体。
[0012]优选的，步骤S1所述切段长度为1.5～2.5cm。
[0013]优选的，步骤S1采用所述酒精消毒的浓度以体积分数计为70～75％，时间为20～40s。
[0014]优选的，采用所述氯化汞消毒的浓度以质量分数计为0.08～0.12％，消毒时间为2～3min。
[0015]优选的，步骤S2所述光暗交替培养周期为12h/12h。
[0016]优选的，步骤S2所述光暗交替培养过程中光照培养光强为1500～2500Lx。
[0017]优选的，步骤S2所述无菌苗培养时间为60～90d。
[0018]优选的，步骤S3所述沙土苗床中的沙土预先采用质量百分含量为0.15～0.25％的高锰酸钾消毒。
[0019]因此，本申请通过选用适宜的培养基及生长因子，大大简化了组织培养步骤，同时通过延长无菌苗培养时间，大大提高了移栽成活率，适宜用于柽柳大规模生产育苗。
附图说明
[0020]图1是获得的外植体照片示意图；
[0021]图2是外植体切段和消毒过程示意图；
[0022]图3是外植体接种培养初始示意图；
[0023]图4是外植体在1/2MS培养基上获得的无菌苗示意图(左图培养25d左右，右图培养40d左右)；
[0024]图5是图4右图中无菌苗底部生根示意图；
[0025]图6是炼苗过程示意图；
[0026]图7是移栽过程示意图；
[0027]图8是移栽后60d左右无菌苗成活情况图(其中，左图是培养40d无菌苗移栽后的图片，右图是培养90d无菌苗移栽后的图片)。
具体实施方式
[0028]本专利技术提供了一种柽柳组织快繁方法，包括以下步骤：
[0029]S1.外植体消毒：将切段后的柽柳外植体依次采用酒精、氯化汞消毒。
[0030]优选采用采集野外柽柳无病虫害、健康的成熟枝条，剪成10～15cm插穗，于营养钵中扦插，以其生长出的嫩枝作为外植体，经研究，该方式得到的外植体萌芽率高，且容易消毒；切段长度优选为1.5～2.5cm。
[0031]消毒对外植体出芽率有重要影响，消毒不彻底，将导致培养过程中出现污染，消毒过度，虽然能抑制污染，但是将对外植体组织产生较大伤害，影响发芽率，经过优选，本申请采用酒精和氯化汞结合消毒的方式，首先采用毒性较低浸润性强的酒精对外植体进行短时间消毒，酒精消毒浓度为70～75％(体积分数)，时间为20～40s，可以对组织表面进行消毒，并降低后续毒性较强的氯化汞消毒时间，以达到尽可能消毒彻底同时又减轻对组织损伤的目的，氯化汞消毒浓度优选为0.08～0.12％(质量分数)，消毒时间为2～3min，消毒时间过长，将导致对植物组织损伤过大。
[0032]S2.接种：然后将消毒后的外植体接入培养基上，薄膜封口，于24～26℃、光暗交替条件下培养至少60d(从接种日开始计算)，获得无菌苗；培养基为添加了吲哚乙酸的1/2MS培养基，吲哚乙酸添加量为0.08～0.12mg/L培养基。光暗交替培养周期优选为12h/12h，光暗交替培养过程中光照培养光强为1500～2500Lx。
[0033]经研究发现，柽柳具有产生不定芽的特性，组织培养相对比较容易，结合适宜培养基和生长因子刺激，可以将愈伤组织诱导、不定芽诱导和增殖培养三步骤合在一个步骤完成，大大了简化组织培养步骤。经过优化，1/2MS培养基比较适合柽柳组培，且在加入0.08～
0.12mg/L吲哚乙酸时其愈伤组织、生根及无菌苗的生长均比较好。
[0034]S3.炼苗移栽：将培养至少60d的无菌苗置于带有小拱棚的日光温室中炼苗3～5d，然后去掉封口膜，加入适量无菌水，加水量以没过培养基为宜，再炼苗3～5d，移栽于沙土苗床上，沙土预先采用质量百分含量为0.15～0.25％的高锰酸钾消毒，防止污染，保持在温度为23～26℃、湿度70～80％下培养，待长出新根后，去掉小拱棚，正常管理，翌年移栽至苗圃地。
[0035]由于柽柳的容易产生不定芽的特性，组织培养相对比较容易，但是由无菌苗到大田移栽的过程却是制约柽柳组培的关键环节。申请人经过研究发现无菌苗的生长时间对移栽成活率具有关键作用，发现培养60d以上相比常规的30～40d成活率可显著提高，推测延长无菌苗培养时间，其根系发育比较完整，可更好对抗移栽后的环境变化，提高成活率。日光温室中搭建小拱棚也可以进一步保障炼苗移栽前后的温湿度适宜，提高移栽成活率。去掉封口膜后加入无菌水再进行炼苗，可降低炼苗污染、改善生根效果，进一步提高移栽成活率。
[0036]因此，本申请通过选用适宜的培养基及生长因子，大大简化了组织培养步骤，同时通过提高无菌苗培养时间，大大提高了移栽成活率，适宜用于柽柳大规模生产育苗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种柽柳组织快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.外植体消毒：将切段后的柽柳外植体依次采用酒精、氯化汞消毒；S2.接种：然后将消毒后的外植体接入培养基上，薄膜封口，于24～26℃、光暗交替条件下培养至少60d，获得无菌苗；所述培养基为添加了吲哚乙酸的1/2MS培养基，所述吲哚乙酸添加量为0.08～0.12mg/L培养基；S3.炼苗移栽：将所述无菌苗置于带有小拱棚的日光温室中炼苗3～5d，然后去掉封口膜，加入适量无菌水，加水量没过培养基，再炼苗3～5d，移栽于沙土苗床上，保持在温度为23～26℃、湿度70～80％下培养，待长出新根后，去掉小拱棚，正常管理，翌年移栽至苗圃地。2.如权利要求1所述的柽柳组织快繁方法，其特征在于，所述外植体通过下述方式采集获得：采集野外柽柳无病虫害、健康的成熟枝条，剪成10～15cm插穗，于营养钵中扦插，以其生长出的嫩枝作为外植体。3.如权利要求1所述的柽...

【专利技术属性】
技术研发人员：金娜，李栋，何彩，罗祥，张勤德，张斌，王鑫，刘伟，史星雲，陈岩辉，晋敏，胡芳，叶芳，曹虎，赵连鑫，张涛，张利年，赵三虎，董存元，任德全，高生春，姚元文，朱东虎，
申请(专利权)人：武威市林业科学研究院，
类型：发明
国别省市：