一种贺兰山女蒿玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化方法技术

本发明专利技术公开了一种贺兰山女蒿玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化的方法，通过使用无菌镊子在超净工作台内将贺兰山女蒿组织培养过程中产生的玻璃化愈伤组织和不定芽与正常组织分离开来，转移到去玻璃化的培养基中进行组织培养。待部分玻璃化愈伤组织和不定芽恢复正常状态后，再转移至相同培养基中继续培养，最后将生长良好的再生苗取出放入生根培养基中进行生根培养。应用本技术可以使贺兰山女蒿组织培养过程中产生的玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化，再经继代培养形成正常的再生植株。再经继代培养形成正常的再生植株。

【技术实现步骤摘要】
一种贺兰山女蒿玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化方法


[0001]本专利技术属于生物
，尤其涉及一种贺兰山女蒿玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化的方法。

技术介绍

[0002]贺兰山女蒿(Hippolytia alashanensis)是菊科女蒿属的植物，具有较强的耐旱、耐寒、耐瘠薄性，为我国特有植物，主要分布在甘肃、内蒙古、宁夏等地，生长于海拔1900米至2250米的地区，多生长于石缝、草原、山坡或荒漠草原。其开花期的粗蛋白质含量较高，粗纤维含量较低，无氟浸出物较高，是冬季荒漠草原放牧场上的重要饲用植物。在对贺兰山女蒿组培快繁的研究中发现其具有较好的再生能力，容易诱导出愈伤组织并分化出大量不定芽，但是分化出的不定芽及无菌苗叶片出现肿胀、皱缩以及水浸半透明状等玻璃化现象，这不仅造成了人力，物力、财力的浪费，也阻碍了后续大规模育苗及其开发利用。因此十分有必要开展对其组培苗去玻璃化技术的研究。
[0003]玻璃化是外植体在组织培养过程中常见的现象，属于植物组织培养三大难题之一。目前，对玻璃化产生的原因，尚未形成统一定论。多数学者认为，可能是由本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种贺兰山女蒿玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）贺兰山女蒿玻璃化愈伤组织和不定芽处理：在超净工作台内将贺兰山女蒿组织培养过程中产生的愈伤组织和不定芽与正常组织分离开，分成适宜大小，转移至去玻璃化培养基上进行组织培养，直至玻璃化愈伤组织和不定芽恢复正常状态；（2）处理后的愈伤组织和不定芽培养：将步骤（1）中恢复正常状态的贺兰山女蒿愈伤组织和不定芽在超净台内转移至相同培养基上继续培养25
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30天后，将生长状态良好的再生苗转移到生根培养基中培养；（3）如果在后续培养过程中贺兰山女蒿的愈伤组织和不定芽再次出现玻璃化迹象，重复步骤（1）和（2）。2.根据权利要求1所述的一种贺兰山女蒿玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化的方法，其特征在于，步骤（1）中，培养条件为温度(25
±
2)℃，相对湿度为60％，光照时间14 h/d，光强为1500~2000 lx。3.根据权利要求1所述的一种贺兰山女蒿玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述的去玻璃化培养基成分如下：4.43g/L MS培养基，30g/L蔗糖，0.25 mg/L 6
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BA，0.01 mg/L NAA，7.5g/L琼脂，余量为蒸馏水，培养基的pH值为5.8
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5.9。4.根据权利要求1所述的一种贺兰山女蒿玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化的方法，其特征在于，步骤（2）中，所述的生根培养基成分如下：1/2 MS培养基，30g/L蔗糖，0.3 mg/L NAA，7.0g/L琼脂，余量为蒸馏水，培养基的PH调整为5.8
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5.9。5.根据权利要求1至4任一项所述的一种贺兰山女蒿玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔大祥，周园园，
申请(专利权)人：上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司，
类型：发明
国别省市：