一株通过代谢葛根素提升其功效的两歧双歧杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株通过代谢葛根素提升其功效的两歧双歧杆菌及其应用，属于微生物技术领域。本发明专利技术提供的两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)CCFM1262可通过转化葛根素产生更强活性分子显著提高解酒功效，具体体现在：(1)可将葛根素转化为包含大豆苷元在内的多种活性小分子物质；(2)转化后发酵液较发酵前能提高HepG2酒精性细胞损伤的细胞增殖能力与抗氧化能力；(3)葛根素与菌株复合预处理肝细胞可提高其应对酒精损伤的能力。本发明专利技术将两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)CCFM1262应用至含葛根素产品，具有巨大的应用前景。大的应用前景。大的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一株通过代谢葛根素提升其功效的两歧双歧杆菌及其应用


[0001]本专利技术涉及一株通过代谢葛根素提升其功效的两歧双歧杆菌及其应用，属于微生物


技术介绍

[0002]中国酒文化历史悠久，但饮酒过量会导致酒精中毒。目前，西医对急性酒精中毒的治疗多采用注射50％葡萄糖，对预防、治疗宿醉及酒后保健缺乏对应有效药物。而从中药草本植物中寻找解酒药物具有巨大的潜力。
[0003]葛根始载于汉代《神农本草经》，具有悠久的药食两用历史。其主要成分有异黄酮类、三萜类、皂苷类和多糖类等。其中，葛根异黄酮类是主要的药理活性成分，存在形式一般为游离型苷元和结合型糖苷，前者主要是大豆苷元，后者主要为葛根素(C
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O9)，大豆苷等。研究表明，葛根异黄酮具有广泛的抗氧化活性，在抑制酒精吸收、加速酒精代谢及排泄等方面有着巨大潜力。但是糖苷型异黄酮在人体内的吸收度很低，真正起效的是异黄酮的其他代谢物。因此，通常肠道菌群复杂的代谢基因是葛根素转化的关键，但是依然存在以下问题：
[0004]一、有的人群缺乏能够转化葛根素的菌群，因此在食用含葛根素膳食时，功效发挥作用差；二、食品和医药领域缺乏能够通过转化葛根素与其协同增效的菌株。
[0005]两歧双歧杆菌是人体肠道菌群之一，两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)，从属于双歧杆菌属，由于其对人类健康的潜在益处，已受到一定的关注。同时，它还是一种少有的可以改善过敏体质，预防过敏反复发作的益生菌菌株，其功能为调整过敏体质。虽已有其各种益生功能研究，但均未发现其能通过转化葛根素并协同增效缓解肝细胞损伤。因此，挖掘此类菌株，实现菌株与富含葛根素膳食的协同增效具有广泛的应用前景。

技术实现思路

[0006]为解决上述问题，本专利技术提供了一株能够代谢葛根素提升其功效的两歧双歧杆菌及应用。此方法提供一株可通过高度转化葛根素为活性小分子增强其功效的两歧双歧杆菌，并提供该两歧双歧杆菌在提高解酒功效方面的应用，利用此方法可成功实现解酒效果的提高。
[0007]本专利技术提供了一株能够提高葛根素解酒功效的两歧双歧杆菌CCFM1262，并于2022年04月06日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：62358，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，该菌株的分类学命名为：两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)，株名为CCFM1262；该菌株在改良MRS培养基上培养48h后菌落呈圆形、凸面或透镜状，微白，不透明，有平滑至粘液状的柔软表面，可高度转化葛根素为大豆苷元并提高解酒功效。
[0008]本专利技术还提供了含所述两歧双歧杆菌CCFM1262的组合物。
[0009]在一种实施方式中，所述组合物中所述两歧双歧杆菌CCFM1262的数量≥1
×
107CFU/mL或1
×
107CFU/g。
[0010]在一种实施方式中，所述组合物为食品、保健品或药物。
[0011]在一种实施方式中，所述组合物含有所述两歧双歧杆菌CCFM1262和含葛根素膳食。
[0012]在一种实施方式中，所述组合物含有所述两歧双歧杆菌CCFM1262和葛根粉。
[0013]在一种实施方式中，所述组合物是两歧双歧杆菌在含葛根素的发酵基料中发酵后的发酵液。
[0014]在一种实施方式中，所述组合物是按如下方法制备：将两歧双歧杆菌CCFM1262在MRS液体培养基中培养一段时间，转接至含葛根素的发酵基料中，35～40℃发酵24～48h，获得的菌液浓度为8
×
108CFU/mL的细胞培养物。
[0015]在一种实施方式中，所述细胞培养物经过高压均质破碎。
[0016]在一种实施方式中，所述发酵基料中的葛根素浓度≥0.1mg/mL。
[0017]本专利技术还提供了所述两歧双歧杆菌CCFM1262在转化葛根素中的应用。
[0018]在一种实施方式中，所述应用是将所述两歧双歧杆菌CCFM1262在含葛根素的培养基中培养一段时间。
[0019]在一种实施方式中，所述方法包括如下步骤：
[0020](1)将前述的两歧双歧杆菌在MRS固体培养基上划线，平板于37℃倒置培养48h。挑取单菌落接入5mL的MRS液体培养基中于37℃培养48h。
[0021](2)在富含葛根素的发酵基料中，加入5％(v/v)该两歧双歧杆菌的菌液，37℃恒温发酵48h。
[0022]在一种实施方式中，所述步骤(2)中富含葛根素的发酵基料中葛根素浓度为0.1～0.8mg/mL。
[0023]本专利技术还要求保护所述两歧双歧杆菌CCFM1262，所述组合物，或所述两歧双歧杆菌CCFM1262的细胞培养物在解酒方面的应用。
[0024]本专利技术还要求保护所述两歧双歧杆菌CCFM1262，所述组合物，或所述两歧双歧杆菌CCFM1262的细胞培养物在化学性肝损伤辅助保护方面的应用。
[0025]在一种实施方式中，所述细胞培养物包括两歧双歧杆菌CCFM1262在培养基中培养一段时间后的细胞培养液，或将所述细胞培养物均质破碎后的产物。
[0026]有益效果：
[0027](1)本专利技术提供了一株能够提高葛根素解酒功效的两歧双歧杆菌及应用，能够实现代谢葛根素转化为包含大豆苷元在内的多种活性小分子物质，并且在发酵完成后代谢产物中大豆苷元浓度高于20.16μg/mL(每代谢0.1mg/mL葛根素)；
[0028](2)本专利技术应用葛根素与两歧双歧杆菌CCFM1262复合预处理HepG2细胞，可提升其应对酒精损伤的能力，提高葛根素解酒功效。
[0029]生物材料保藏
[0030]两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)CCFM1262，分类学命名为Bifidobacterium bifidum，已于2022年04月06日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：62358，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。
附图说明
[0031]图1为各组别MDA含量比。
[0032]图2为各组别细胞活力比。
[0033]图3为各组别谷草转氨酶活性比。
[0034]图4为各组别谷丙转氨酶活性比。
具体实施方式
[0035]下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步的阐述，但本专利技术不受实施条例的限制。
[0036]下述实施例中涉及的葛根素(产品编号：P816259、CAS：3681
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0)购自麦克林公司；草本葛根粉购自北京同仁堂；大豆苷元(产品编号：SD8010、CAS：486
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8)购自索莱宝科技有限公司；DMEM培养液与胎牛血清购自gibco公司；无水乙醇购自国药集团化学试剂有限公司；谷草转氨酶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)CCFM1262，已于2022年04月06日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：62358。2.含有权利要求1所述两歧双歧杆菌CCFM1262的组合物。3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述两歧双歧杆菌CCFM1262的数量≥1
×
107CFU/mL或1
×
107CFU/g。4.根据权利要求2或3所述的组合物，其特征在于，所述组合物为食品、保健品或药物。5.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述组合物含有所述两歧双歧杆菌CCFM1262和含葛根素膳食。6.根据权利要求2所述的组合物，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔树茂，唐鑫，毛丙永，张秋香，陆文伟，赵建新，陈卫，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：