核酸提取试剂、试剂盒及其应用，以及核酸提取方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，尤其涉及核酸提取试剂、试剂盒及其应用，以及核酸提取方法。本发明专利技术提供了核酸提取试剂，包括：抗凝剂、CSB、LMP、红细胞裂解液、白细胞裂解液、溶菌酶、蛋白酶K、RNase、溶胶酶和透析缓冲液。本发明专利技术提供了一种针对血流感染病原菌的长短片段共提取试剂或试剂盒，该试剂或试剂盒的效果可以达到：短至100bp左右的cfDNA，直到长至大于2Mb的病原菌gDNA在同一提取管中共同提取，实现了长度跨度极大的长短片段共同提取，比现有只能分相提取的方案节省一半的时间及样本量，且因操作简便而可减少污染的可能。简便而可减少污染的可能。

【技术实现步骤摘要】
核酸提取试剂、试剂盒及其应用，以及核酸提取方法


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及核酸提取试剂、试剂盒及其应用，以及核酸提取方法。

技术介绍

[0002]感染是威胁人类健康的重要因素之一，可产生产生不同的临床症状甚至危及生命。病原微生物鉴定是感染类疾病的诊断治疗中不可缺少的重要环节。由于传统金标准
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病原微生物培养的耗时长，鉴定困难等弊端，宏基因组高通量测序技术自2014年首例用于诊断中枢神经系统钩体病患者以来逐步用于临床。血液标本是该技术的重要应用领域，为解决临床疑难感染患者的诊断难题提供了有效的解决方案。目前血液样本的NGS检测与组织、痰液等不同，其主要是检测血浆中，长度约为200bp的游离核酸，即cfDNA。然而白细胞的吞噬并不能破坏掉结核杆菌、伤寒杆菌、产单核李斯特菌等细胞壁比较坚韧的细菌，因而这些菌会在白细胞内生长繁殖形成胞内菌，并随之扩散到其他部位。因此必须充分全面地提取血浆和血细胞中全部病原菌的DNA才有助于全面的诊断疾病。
[0003]与此同时，生物微环境的改变、全球抗生素滥用等原因，导致本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.核酸提取试剂，其特征在于，包括：抗凝剂、CSB、LMP、红细胞裂解液、白细胞裂解液、溶菌酶、蛋白酶K、RNase、溶胶酶和透析缓冲液。2.如权利要求1所述的核酸提取试剂，其特征在于，所述溶菌酶以溶菌酶溶液的形式添加，所述溶菌酶溶液包括：溶菌酶、溶葡球菌酶和Tris
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HCl缓冲液。3.如权利要求1或2所述的核酸提取试剂，其特征在于，所述透析缓冲液包括：KCl、EDTA、Tris
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HCl、CaCl2、MgCl2、四盐酸精胺和三盐酸精胺。4.如权利要求3所述的核酸提取试剂，其特征在于，所述四盐酸精胺或所述三盐酸精胺的的终浓度为1～4mM。5.核酸提取试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1至4任一项所述的核酸提取试剂以及其他可接受的助剂或载体。6.核酸的提取方法，其特征在于，以如权利要求1至4任一项所述的核酸提取试剂或如权利要求5所述的核酸提取试剂盒与待测样本混合。7.如权利要求6...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨启文，盖伟，杨帆，宋翠丹，
申请(专利权)人：中国医学科学院北京协和医院，
类型：发明
国别省市：