【技术实现步骤摘要】
一种核酸快速提取方法及组合物
[0001]本专利技术涉及生物
,具体涉及一种磁珠法病毒核酸快速提取的方法及组合物。
技术介绍
[0002]基于DNA和RNA分析的基因组学研究是现代分子生物学的一项热点。在临床医学诊断中,随着病毒核酸高通量提取需求日益增长,当前市面也应运产生多种病毒核酸提取试剂盒,其中以磁珠法核酸提取试剂盒应用最为广泛。磁珠法核酸提取主要采用超顺磁性硅基磁珠在高盐溶液中通过氢键和静电吸附核酸,而不吸附蛋白和其他杂质,吸附了核酸的磁珠经洗涤去除剩余的蛋白和盐离子,当使用低盐缓冲液时,磁珠释放核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的,该方法操作简便,不需要离心,适合高通量多样本自动化进行核酸的提取,获得的核酸可直接用于逆转录、PCR、荧光定量PCR、RT
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PCR、RT
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qPCR、二代测序、生物芯片分析等。磁珠法核酸提取试剂盒对病毒核酸的提取分为裂解、洗涤、漂洗和洗脱几个过程。
[0003]目前市面上的磁珠法的核酸提取试剂盒通常利用胍盐进行样本的裂解,胍盐促使细胞破 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种组合物,所述组合物包括聚丙烯酰胺、硫酸铝、甜菜碱、Tris、EDTA钠盐或其水合物、PEG8000、异硫氰酸胍、月桂醇聚氧乙烯醚、异丙醇和吐温。2.权利要求1的组合物,所述组合物中硫酸铝质量体积分数为0.1%
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10%、聚丙烯酰胺质量体积分数为0.001%
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0.1%、甜菜碱浓度为0.05mM
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5mM、Tris浓度为10mM
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1M、EDTA钠盐或其水合物为EDTA
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2Na
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2H2O、其浓度为1mM
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100mM、PEG8000质量体积分数为0.01%
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1%、异硫氰酸胍浓度为0.5M
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10M、月桂醇聚氧乙烯醚质量体积分数为0.01%
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1%、异丙醇体积分数为10%
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80%、吐温20体积比为0.001%
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0.1%。3.权利要求2的组合物,所述组合物中硫酸铝质量体积分数为1%、聚丙烯酰胺质量体积分数为0.025%、甜菜碱浓度为0.5mM、Tris浓度为100mM、EDTA
·
2Na
·
2H2O浓度为25mM、PEG8000质量体积分数为0.1%、异硫氰酸胍浓度为5M、月桂醇聚氧乙烯醚质量体积分数为0.1%、异丙醇体积分数为35%、吐温20体积分数为0.01%。4.权利要求1
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3任一项所述的组合物,所述组合物的pH范围为7
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9;优选所述组合物的pH为8。5.一种核酸提取方法,所述方法包括使用权利要求1
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4任一项所述组合物裂解核酸样本的步骤;优选所述核酸为病毒DNA或病毒RNA;更优选所述病毒DNA为ASFV,所述病毒RNA为PEDV。6.权利要求5的核酸提取方法,所述核酸样本选自血液样本、组织样本、口腔样本和粪便样本中的至少一种。7.权利要求5的核酸提取方法,其中使用磁珠提取样本裂解后的核酸;优选使用磁珠提取样本裂解后的病毒核酸。8.权...
【专利技术属性】
技术研发人员:聂俊伟,瞿志鹏,荆彦平,
申请(专利权)人:南京诺唯赞生物科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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