【技术实现步骤摘要】
一种高通量生物样本DNA的提取试剂盒和提取方法
[0001]本专利技术属于生物
,具体涉及一种高通量生物样本DNA的提取试剂盒和提取方法。
技术介绍
[0002]定植在胃肠道的细菌、古生菌以及真菌的集合被称为肠道菌群,肠道菌群在成千上万年的时间里与宿主共同进化,形成了复杂而又互利的关系。有越来越多的证据表明这些菌群与宿主的多种慢性疾病密切相关,加强肠道菌群的研究对防治、治疗和疾病预后都有重要的意义。肠道菌群研究使用最多的方法是对粪便微生物DNA检测,样本量大且易获得,抽提得到的DNA结合二代测序技术可以获得大量的微生物群落信息,从而反映出宿主的健康状况。
[0003]然而粪便样本复杂多样,通常核酸提取步骤主要包括细胞裂解、核酸纯化回收。常用的微生物DNA提取方法有过柱法(中国专利技术专利:CN201811636712.7,公开日:20190319)、探针法(中国专利技术专利:CN201810942556.0,公开日:20181207)、磁珠法(中国专利技术专利:CN201810812474.4,公开日:20181123)等,由于适用范围受限、操作步骤较多等导致通量无法提高,难以适配自动化生产,因此有必要开发一种除杂彻底、提取得率高、操作简单且能自动化操作的粪便DNA提取方案。
技术实现思路
[0004]为了解决现有技术中存在的问题,本专利技术的目的在于提供一种高通量生物样本DNA的提取试剂盒。
[0005]为了达到上述目的,本专利技术采用如下技术手段:
[0006]本专利
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种高通量生物样本DNA的提取试剂盒,其特征在于,包括裂解液、磁珠、溶菌酶、蛋白酶、RNA酶、漂洗液a、漂洗液b、漂洗液c和洗脱液;其中,裂解液包括Tris
‑
HCl、EDTA、NaCl、SDS、PVP和无菌水;漂洗液a包括盐酸胍、乙醇和无菌水;漂洗液b包括Tris
‑
HCl、乙醇和无菌水,其中乙醇的体积分数为b;漂洗液c包括Tris
‑
HCl、乙醇和无菌水,其中乙醇的体积分数为c;洗脱液包括Tris
‑
HCl和无菌水。2.根据权利要求1所述的一种高通量生物样本DNA的提取试剂盒,其特征在于,所述裂解液中Tris
‑
HCl的浓度为0.05
‑
0.1M、EDTA的浓度为0.01
‑
0.1M、NaCl的浓度为0.1
‑
0.7M、SDS的浓度为1
‑
5wt%、PVP的浓度为1
‑
5wt%。3.根据权利要求1所述的一种高通量生物样本DNA的提取试剂盒,其特征在于,所述磁珠为硅基磁珠;所述溶菌酶的浓度为0.5
‑
1.5mg/mL;所述蛋白酶为蛋白酶K,浓度为0.5
‑
1mg/mL;所述RNA酶为RNA酶A,浓度为0.05
‑
0.1mg/mL。4.根据权利要求1所述的一种高通量生物样本DNA的提取试剂盒,其特征在于,漂洗液a中盐酸胍的浓度为10
‑
50wt%、乙醇的体积分数为20
‑
60%;漂洗液b中Tris
‑
HCl的浓度为0.02M
‑
0.1M、乙醇的体积分数为70
‑
90%;漂洗液c中Tris
‑
HCl的浓度为0.02M
‑
0.1M、乙醇的体积分数为75
‑
85%;洗脱液中Tris
‑
HCl的浓度为0.005M
‑
0.02M。5.一种权利要求1所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员:李振,蒙艳婷,陈秀雯,李晓萌,
申请(专利权)人:杭州联川生物技术股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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