一种靶向Trop-2的近红外二区荧光探针及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种靶向Trop

【技术实现步骤摘要】
一种靶向Trop
‑
2的近红外二区荧光探针及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种靶向Trop
‑
2的近红外二区荧光探针及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]乳腺癌居全球女性恶性肿瘤发病率及死亡率首位，保乳手术已成为早期乳腺癌的标准手术方式。保乳术成功的关键在于肿瘤的完整切除同时保留乳房，并能兼顾术后美观。当前，术中冰冻病理是较为成熟的评价肿瘤切缘的病理技术手段，但是术中冰冻病理为非连续取材，容易导致漏检且耗时长。导致保乳手术切缘阳性的另一主要原因是术中术者仅能通过“眼看、手触”等主观感受评估切缘状态，因此，如何精准、实时判定保乳术切缘状况是避免二次手术的关键。
[0003]目前临床上主要采用术中钼靶进行辅助切缘判定，该方法容易遗漏非钙化病灶、敏感性较低；术中超声对深部肿物诊断符合率低，且对微钙化灶检测不敏感。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供一种靶向Trop
‑
2的近红外二区荧光探针及其制备方法和应用用于解决上述问题。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0006]一种靶向Trop
‑
2的近红外二区荧光探针，所述探针为ICG
‑
SG。
[0007]一种靶向Trop
‑
2的近红外二区荧光探针的制备方法，该方法包括以下步骤：
[0008]S1、取10mg戈沙妥珠单抗药物溶于1ml的生理盐水中，获得10mg/ml的戈沙妥珠单抗药物溶液；
[0009]S2、取1.7mg吲哚菁绿马莱酰亚胺溶于200μlN,N
‑
二甲基亚酰胺，定溶获取浓度为0.01mol/L的吲哚菁绿马莱酰亚胺溶液；
[0010]S3、将2ml磷酸盐缓冲液、1ml戈沙妥珠单抗药物溶液、200ul吲哚菁绿马莱酰亚胺溶液依次加入棕色避光反应瓶中；
[0011]S4、控制反应瓶内反应体系的PH值，将反应瓶置于室温避光环境搅拌过夜，然后进行透析，去除未反应的吲哚菁绿马来酰亚胺，中途换水一次；
[0012]S5、冷冻干燥后得到探针ICG
‑
SG，并将其置于4℃的冰箱中保存。
[0013]优选地，步骤S4中所述反应瓶内反应体系的PH值控制在7.0～7.4。
[0014]优选地，步骤S4所述透析过程具体为：采用10KDa透析膜室温透析48h。
[0015]一种靶向Trop
‑
2的近红外二区荧光探针作为应用于引导肿瘤手术切缘的荧光导航试剂。
[0016]一种靶向Trop
‑
2的近红外二区荧光探针作为应用于体外乳腺组织良恶性的判断试剂。
[0017]采用上述技术方案后，本专利技术与
技术介绍
相比，具有如下优点：
[0018]本专利技术提供一种靶向Trop
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2的近红外二区荧光探针及其制备方法和应用，采用ICG作为发光元件，特异性靶向Trop
‑
2的SG抗体为靶向元件，利用ICG在近红外二区的拖尾峰成像解决近红外一区穿透深度浅、信噪比低及分辨率差的问题，并克服近红外二区探针如量子点、稀土元素、单壁碳纳米管毒性大的缺点，通过与抗体结合提高ICG的光稳定性，从而制备表面改性及优化靶向Trop
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2的ICG
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SG荧光分子探针。将ICG
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SG探针应用到引导肿瘤手术切缘的荧光导航，实现保乳边界的可视化，旨在建立NIR
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II荧光引导的乳腺肿瘤精准切除的手术导航体系，区分乳腺肿瘤与正常组织，精确识别肿瘤边界，提高乳腺癌保乳切缘的精准度。此外，ICG
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SG探针还可通过体外标本浸泡成像，快速有效地判断乳腺肿物的良恶性，为术中决策提供指导意见，进一步提高乳腺癌手术的精准度，降低手术切缘阳性率，提高患者的生活质量并延长总生存期，对改善患者预后具有重要临床意义，为提高我国乳腺癌患者生存率、降低死亡率提供理论及技术依据。
附图说明
[0019]图1为本专利技术探针ICG
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SG的构建结构示意图；
[0020]图2为本专利技术实施例中探针ICG
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SG的光学特征表征图；
[0021]图3为本专利技术实施例中探针ICG
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SG的细胞毒性测试结果；
[0022]图4为本专利技术实施例中探针ICG
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SG细胞靶向性测试结果；
[0023]图5为本专利技术实施例中探针ICG
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SG的安全性测试结果；
[0024]图6为本专利技术实施例中ICG
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SG荧光分子探针在MDA
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MB
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231荷瘤小鼠的动物靶向性测试结果；
[0025]图7为本专利技术实施例中ICG
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SG荧光分子探针在体导引乳腺癌精准切除测试结果；
[0026]图8为本专利技术实施例中探针ICG
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SG与人体乳腺癌体外标本共孵育测试结果。
具体实施方式
[0027]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0028]实施例
[0029]如图1所示，本专利技术公开了一种靶向Trop
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2的近红外二区荧光探针，探针为ICG
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SG。
[0030]本专利技术还公开一种靶向Trop
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2的近红外二区荧光探针的制备方法，该方法包括以下步骤：
[0031]S1、取10mg戈沙妥珠单抗药物(SacituzumabGovitecan)溶于1ml的生理盐水中，获得10mg/ml的戈沙妥珠单抗药物溶液；
[0032]S2、取1.7mg吲哚菁绿马莱酰亚胺溶于200μlN,N
‑
二甲基亚酰胺，定溶获取浓度为0.01mol/L的吲哚菁绿马莱酰亚胺溶液；
[0033]S3、将2ml磷酸盐缓冲液、1ml戈沙妥珠单抗药物溶液、200ul吲哚菁绿马莱酰亚胺溶液依次加入棕色避光反应瓶中；
[0034]S4、控制反应瓶内反应体系的PH值，将反应瓶置于室温避光环境搅拌过夜，然后进
行透析，去除未反应的吲哚菁绿马来酰亚胺，中途换水一次；
[0035]S5、冷冻干燥后得到探针ICG
‑
SG，并将其置于4℃的冰箱中保存。
[0036]步骤S4中反应瓶内反应体系的PH值控制在7.0～7.4。
[0037]步骤S4透析过程具体为：采用10KDa透析膜室温透析48h。
[0038]本专利技术还公开一种靶向Trop
‑
2的近红外二区荧光探针作为应用于引导肿瘤手术切缘的荧光导航试剂。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种靶向Trop
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2的近红外二区荧光探针，其特征在于：所述探针为ICG
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SG。2.一种权利要求1所述的靶向Trop
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2的近红外二区荧光探针的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：S1、取10mg戈沙妥珠单抗药物溶于1ml的生理盐水中，获得10mg/ml的戈沙妥珠单抗药物溶液；S2、取1.7mg吲哚菁绿马莱酰亚胺溶于200μlN,N
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二甲基亚酰胺，定溶获取浓度为0.01mol/L的吲哚菁绿马莱酰亚胺溶液；S3、将2ml磷酸盐缓冲液、1ml戈沙妥珠单抗药物溶液、200ul吲哚菁绿马莱酰亚胺溶液依次加入棕色避光反应瓶中；S4、控制反应瓶内反应体系的PH值，将反应瓶置于室温避光环境搅拌过夜，然后进行透析，去除未反应的吲哚菁绿...

【专利技术属性】
技术研发人员：张国君，陈伟玲，张莉欣，张永渠，朱媛媛，黄文河，王佳铮，
申请(专利权)人：厦门术利康医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：