抗PD-L1抗体及其用途制造技术

提供与PD

【技术实现步骤摘要】
抗PD
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L1抗体及其用途
[0001]本申请是申请日为2018年8月27日、申请号为201880044363.1、专利技术名称为“抗PD
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L1抗体及其用途”的中国专利申请的分案申请。


[0002]本申请涉及生物医药领域，具体涉及一种抗PD
‑
L1抗体，还涉及其与抗CD137抗体联合用药用于治疗癌症的方法，还涉及其与抗CD137抗体形成的双特异抗体。

技术介绍

[0003]程序性死亡蛋白
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1(programmed death
‑
1,PD
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1，又名CD279)与其配体PD
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L1(又名B7
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H1，CD274)和PD
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L2(又名B7
‑
DC，CD273)共同提供负性共刺激信号调节T细胞活化。缺乏共刺激信号时，T细胞难以感受抗原刺激，不能产生有效免疫应答，还可导致对异源抗原的衰竭或耐受。PD
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1可在T细胞、B细胞、自然杀伤T细胞、激活的单核细胞和树突状细胞(DCs)上表达。PD
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1可由被活化的，但未被刺激的人CD4
+
和CD8
+
T细胞、B细胞和骨髓细胞表达。PD
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L1和PD
‑
L2在表达模式上有所不同。PD
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L1可表达于造血细胞，也可在多种非造血细胞表达，而PD
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L2的表达主要限于树突状细胞和巨噬细胞。B7.1(CD80)也是PD
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L1的受体，它表达于激活的B细胞，T细胞，巨噬细胞和树突状细胞。作为PD
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1和B7.1的配体，PD
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L1还选择性表达于多种肿瘤细胞。抑制PD
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L1信号转导，包括阻断PD
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L1与PD
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1、B7.1任一或两者的相互作用，从而阻止PD
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L1发送负性共刺激信号给T细胞和其它抗原呈递细胞，这可能增强对感染(如急性和慢性)应答的免疫以及肿瘤免疫。
[0004]CD137(又名4
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1BB，TNFRSF9等)是肿瘤坏死因子受体超家族(TNFRS)的一种跨膜蛋白质。研究表明CD137激动型单克隆抗体在许多模型中增加共刺激分子表达，并且显著增强细胞溶解性T淋巴细胞应答，发挥抗肿瘤作用。CD137靶向疗法的抗肿瘤作用通过利用激动型抗小鼠CD137单克隆抗体的小鼠体内抗肿瘤疗效研究证实。
[0005]目前已批准的PD
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L1抗体可用于治疗部分癌症，已有的CD137抗体展示出治疗多种肿瘤的潜力。已有报道利用荷瘤小鼠动物模型研究了PD
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1抗体和CD137抗体的组合抗肿瘤疗效，结果表明两种抗体联合应用显示出比两者单用显著增强的抑瘤活性，但从顺应性和疼痛的角度给患者带来不便，并且增加了治疗费用。研制这两种单克隆抗体的双特异抗体(Bispecific antibody，BsAb)因其含有两种特异性抗原结合位点可解决以上问题。因此，亟待开发新的抗PD
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L1抗体使其具有更加的药效和更低的免疫原性，以及PD
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L1/CD137双特异性抗体以获得更好的抗肿瘤效果。

技术实现思路

[0006]本申请提供了一种PD
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L1抗体、其抗原结合片段或变体，其具有下列性质中的一种或多种：1)能够以较高的亲和力和特异性结合PD
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L1蛋白；2)能够抑制PD
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1蛋白与PD
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L1蛋白的结合；3)能够缓解或治疗肿瘤。本申请也提供了一种双特异性抗体具有下列性质中的一种或多种：1)能够以较高的亲和力和特异性结合PD
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L1蛋白；2)能够以较高的亲和力和特
异性结合CD137蛋白；3)能够增强T细胞功能；4)能够缓解或治疗肿瘤。本申请还提供了所述PD
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L1抗体、其抗原结合片段或变体、双特异性抗体的制备方法和应用。
[0007]一方面，本申请提供了一种抗体、其抗原结合片段或变体，其以3
×
10
‑9M或更低的K
D
与PD
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L1蛋白相结合。
[0008]在某些实施方式中，所述抗体包含抗体轻链或其片段，所述抗体轻链或其片段包含LCDR1，且所述LCDR1包含SEQ ID NO:53所示的氨基酸序列TGTX1SX2VGGYX3X4VS；其中X1是S、R或V；X2是D、E或S；X3是N或R；X4是Y或E，且其中所述LCDR1根据抗体Kabat编号的索引确定。
[0009]在某些实施方式中，所述LCDR1包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:54
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58。在某些实施方式中，所述抗体轻链或其片段包含LCDR2，且所述LCDR2包含SEQ ID NO:59所示的氨基酸序列X1NSX2RPS，其中X1是G或E；X2是N或I，且其中所述LCDR2根据抗体Kabat编号的索引确定。在某些实施方式中，所述LCDR2包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:60
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61。在某些实施方式中，所述抗体轻链或其片段包含LCDR3，且所述LCDR3包含SEQ ID NO:62所示的氨基酸序列：QSYDSSLSGX1V，其中X1是S或T，且其中所述LCDR3根据抗体Kabat编号的索引确定。
[0010]在某些实施方式中，所述抗体轻链或其片段还包括框架区L
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FR1，L
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FR2，L
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FR3，和L
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FR4。在某些实施方式中，所述框架区选自以下组：人共有框架序列和人种系序列。在某些实施方式中，所述L
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FR1的C末端与所述LCDR1的N末端直接或间接相连，所述L
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FR1包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:71。在某些实施方式中，所述L
‑
FR2位于所述LCDR1与所述LCDR2之间，所述L
‑
FR2包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:72。在某些实施方式中，所述L
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FR3位于所述LCDR2与所述LCDR3之间，所述L
‑
FR3包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:73
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75。在某些实施方式中，所述L
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FR4的N末端与所述LCDR3的C末端直接或间接相连，所述L
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FR4包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:76。
[0011]在某些实施方式中，所述抗体轻链或其片段包含轻链可变区VL，且所述轻链可变区VL包含选自以下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:11、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗体、其抗原结合片段或变体，其能够与CD137蛋白相结合，所述抗体包含抗体轻链或其片段，所述轻链或其片段包含LCDR1
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3，且所述LCDR1
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3的氨基酸序列依次如SEQ ID NO:80
‑
82所示。2.根据权利要求1所述的抗体、其抗原结合片段或变体，所述抗体轻链或其片段包含轻链可变区VL，且所述轻链可变区VL包含以下的氨基酸序列：SEQ ID NO:20。3.根据权利要求1
‑
2中任一项所述的抗体、其抗原结合片段或变体，所述抗体轻链或其片段包含以下的氨基酸序列：SEQ ID NO:23。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的抗体、其抗原结合片段或变体，所述抗体包含抗体重链或其片段，所述重链或其片段包含HCDR1
‑
3，所述HCDR1
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3的氨基酸序列依次如SEQ ID NO:77
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79所示。5.根据权利要求4所述的抗体、其抗原结合片段或变体，所述抗体重链或其片段包含重链可变区VH，且所述重链可变区VH包含选自以下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:25。6.根据权利要求4
‑
5中任一项所述的抗体、其抗原结合片段或变体，所述抗体重链或其片段包含选自以下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:27。7.抗体、其抗原结合片段或变体，其能够以3
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‑9M或更低的K
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值与PD
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L1蛋白相...

【专利技术属性】
技术研发人员：李博华，王华菁，何晓文，
申请(专利权)人：原启生物科技上海有限责任公司，
类型：发明
国别省市：