抗GPRC5D抗原结合蛋白及其用途制造技术

本申请涉及一种分离的抗原结合蛋白，所述抗原结合蛋白以1.0μg/mL的EC

【技术实现步骤摘要】
抗GPRC5D抗原结合蛋白及其用途


[0001]本申请涉及生物医药领域，具体的涉及一种抗GPRC5D抗原结合蛋白，包含所述抗原结合蛋白的嵌合抗原受体，以及它们在治疗肿瘤中的用途。

技术介绍

[0002]多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)是第二常见的恶性血液病，并且在癌症致死率中居于第2位。MM属于浆细胞恶性肿瘤，常伴有多发性溶骨性损害、肾脏功能损害、骨髓浸润、高钙血症和贫血。MM在目前的主要治疗方法是副作用严重的全身化疗，并且无法彻底治愈。
[0003]G蛋白偶联受体家族C组5成员D(GPRC5D)蛋白，是一种非典型的表面孤儿受体。 GPRCD5与其他C5家族受体一样拥有过短的氨基末端，因此在构象上与C4家族十分类似。其在正常组织中表达仅限于毛囊，但在MM患者的骨髓中也有特异性高表达，并与浆细胞肿瘤负荷与遗传畸变高度相关。
[0004]随着蛋白酶抑制剂(PI)、免疫调节药物(IMiD)和单克隆抗体(mAb)等新型药物的介入，MM的治疗方式得到扩充，但依然有着极高的复发率并产生耐药性。而嵌合抗原受体T 细胞(CAR
‑
T)治疗对MM产生了显著疗效和可控的毒性，其中主流的以B细胞成熟抗原 (BCMA)为靶点的CAR
‑
T细胞疗法对于BCMA阴性或BCMA低表达的MM病患存在靶向逃逸问题。GPRC5D在浆细胞上的特异性高表达，使其成为了MM的理想治疗靶点，但以其为靶点的药物治疗产品尚未成熟。

技术实现思路

[0005]本申请提供一种分离的抗原结合蛋白，其能够特异性结合G蛋白偶联受体家族C组5成员D(GPRC5D)蛋白。本申请还提供了包含所述抗原结合蛋白的嵌合抗原受体，以及包含和 /或表达该嵌合抗原受体的细胞，所述细胞具有以下一种或多种特点：(1)扩增能力强，(2) 能够杀伤表达GPRC5D的靶细胞，(3)在靶细胞刺激下分泌细胞因子，(4)在靶细胞刺激下有较强的增殖能力，以及，(4)抑制肿瘤生长。
[0006]一方面，本申请提供了一种分离的抗原结合蛋白，其能够以低于1.0μg/mL的EC50值结合G蛋白偶联受体家族C组5成员D(GPRC5D)蛋白。
[0007]在某些实施方式中，所述的抗原结合蛋白包括抗体或其抗原结合片段。
[0008]在某些实施方式中，所述抗原结合片段包括Fab、Fab
’
、F(ab)2、Fv片段、F(ab
’
)2、scFv、 di
‑
scFv、VHH和/或dAb。
[0009]在某些实施方式中，所述抗原结合片段为VHH。
[0010]在某些实施方式中，所述抗体选自下组：单克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体。
[0011]在某些实施方式中，所述的抗原结合蛋白能够与参比抗体竞争结合GPRC5D蛋白，其中所述参比抗体包含抗体重链可变区VH，所述参比抗体的VH包含HCDR1、HCDR2和HCDR3，
NO:24、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:32、SEQ IDNO:34、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:38、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:44、 SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:54、SEQ IDNO:56、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:66、 SEQ ID NO:68和SEQ ID NO:70中任一项所示的氨基酸序列。
[0047]在某些实施方式中，所述的抗原结合蛋白包括HCDR3，且所述HCDR3包含SEQ ID NO: 215或SEQ ID NO:218所示的氨基酸序列。
[0048]在某些实施方式中，所述的抗原结合蛋白包括HCDR3，且所述HCDR3包含SEQ ID NO: 97、SEQ ID NO:104、SEQ ID NO:107、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:115、SEQ ID NO:118、 SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:125、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:132、SEQ ID NO:135、 SEQ ID NO:137、SEQ ID NO:140、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:147、SEQ ID NO:150、 SEQ ID NO:154、SEQ ID NO:156、SEQ ID NO:158、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:163、 SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:168、SEQ ID NO:170、SEQ ID NO:172、SEQ ID NO:176、SEQ ID NO:179、SEQ ID NO:182、SEQ ID NO:185、SEQ ID NO:188、SEQ ID NO:191、 SEQ ID NO:195和SEQ ID NO:198中任一项所示的氨基酸序列。
[0049]在某些实施方式中，所述的抗原结合蛋白包括HCDR2，且所述HCDR2包含 X1X2X3X4X5X6X7T所示的氨基酸序列，其中，X1为I或T，X2为N、S或T，X3为A、P、 R、S或W，X4为G、R、S、T或不存在，X5为D或G，X6为G或S，且X7为D、G、I、 N、R、S、T或V。
[0050]在某些实施方式中，所述的抗原结合蛋白包括HCDR2，且所述HCDR2包含SEQ ID NO: 96、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:106、SEQ ID NO:110、SEQ ID NO:114、SEQ ID NO:117、 SEQ ID NO:120、SEQ ID NO:124、SEQ ID NO:128、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:134、SEQ ID NO:139、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:149、SEQ ID NO:153、 SEQ ID NO:155、SEQ ID NO:160、SEQ ID NO:162、SEQ ID NO:164、SEQ ID NO:167、 SEQ ID NO:171、SEQ ID NO:175、SEQ ID NO:178、SEQ ID NO:181、SEQ ID NO:187、 SEQ ID NO:190、SEQ ID NO:192、SEQ ID NO:194和SEQ ID NO:197中任一项所示的氨基酸序列。
[0051]在某些实施方式中，所述的抗原结合蛋白包括HCDR1，且所述HCDR1包含 GX2X3X4SX6X7X8所示的氨基酸序列，其中，X2为F、G、I、L、N、R、S或Y，X3为I或 T，X4为F或L，X6为I、L、N、R、S、T或Y，X7为D、N或Y，且X8为A本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.分离的抗原结合蛋白，其能够以低于1.0μg/mL的EC
50
值结合G蛋白偶联受体家族C组5成员D(GPRC5D)蛋白，所述抗原结合蛋白包括源自抗体重链可变区VH中的至少一个CDR，所述VH包含SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:38、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:68和SEQ ID NO:70中任一项所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的抗原结合蛋白，其包括HCDR1、HCDR2、HCDR3，且所述HCDR1、HCDR2、HCDR3包含选自下组的任意一组氨基酸序列：(1)HCDR1：SEQ ID NO:102，HCDR2：SEQ ID NO:103，和HCDR3：SEQ ID NO:104；(2)HCDR1：SEQ ID NO:105，HCDR2：SEQ ID NO:106，和HCDR3：SEQ ID NO:107；(3)HCDR1：SEQ ID NO:109，HCDR2：SEQ ID NO:110，和HCDR3：SEQ ID NO:111；(4)HCDR1：SEQ ID NO:105，HCDR2：SEQ ID NO:114，和HCDR3：SEQ ID NO:115；(5)HCDR1：SEQ ID NO:116，HCDR2：SEQ ID NO:117，和HCDR3：SEQ ID NO:118；(6)HCDR1：SEQ ID NO:119，HCDR2：SEQ ID NO:120，和HCDR3：SEQ ID NO:121；(7)HCDR1：SEQ ID NO:123，HCDR2：SEQ ID NO:124，和HCDR3：SEQ ID NO:125；(8)HCDR1：SEQ ID NO:127，HCDR2：SEQ ID NO:128，和HCDR3：SEQ ID NO:129；(9)HCDR1：SEQ ID NO:130，HCDR2：SEQ ID NO:131，和HCDR3：SEQ ID NO:132；(10)HCDR1：SEQ ID NO:95，HCDR2：SEQ ID NO:96，和HCDR3：SEQ ID NO:97；(11)HCDR1：SEQ ID NO:133，HCDR2：SEQ ID NO:134，和HCDR3：SEQ ID NO:135；(12)HCDR1：SEQ ID NO:136，HCDR2：SEQ ID NO:134，和HCDR3：SEQ ID NO:137；(13)HCDR1：SEQ ID NO:138，HCDR2：SEQ ID NO:139，和HCDR3：SEQ ID NO:140；(14)HCDR1：SEQ ID NO:142，HCDR2：SEQ ID NO:143，和HCDR3：SEQ ID NO:144；(15)HCDR1：SEQ ID NO:145，HCDR2：SEQ ID NO:146，和HCDR3：SEQ ID NO:147；(16)HCDR1：SEQ ID NO:148，HCDR2：SEQ ID NO:149，和HCDR3：SEQ ID NO:150；(17)HCDR1：SEQ ID NO:152，HCDR2：SEQ ID NO:153，和HCDR3：SEQ ID NO:154；(18)HCDR1：SEQ ID NO:123，HCDR2：SEQ ID NO:155，和HCDR3：SEQ ID NO:156；(19)HCDR1：SEQ ID NO:157，HCDR2：SEQ ID NO:153，和HCDR3：SEQ ID NO:158；(20)HCDR1：SEQ ID NO:159，HCDR2：SEQ ID NO:160，和HCDR3：SEQ ID NO:161；(21)HCDR1：SEQ ID NO:159，HCDR2：SEQ ...

【专利技术属性】
技术研发人员：何晓文，周金财，陈思晔，杨月，史中军，李霄培，
申请(专利权)人：原启生物科技上海有限责任公司，
类型：发明
国别省市：