一种分离的抗原结合蛋白及其用途制造技术

本申请涉及一种分离的抗原结合蛋白，其包含氨基酸序列如SEQ ID NO:53所示的VH中的至少一个CDR；且其包含氨基酸序列如SEQ ID NO:49所示的VL中的至少一个CDR。本申请还涉及编码所述分离的抗原结合蛋白的核酸、包含所述分离的核酸的载体、包含所述核酸或所述载体的细胞、制备所述分离的抗原结合蛋白的方法以及所述分离的抗原结合蛋白的用途。述分离的抗原结合蛋白的用途。

【技术实现步骤摘要】
一种分离的抗原结合蛋白及其用途
[0001]本申请是申请日为2020年08月14日，申请号为2020108200514，专利技术名称为“一种分离的抗原结合蛋白及其用途”的中国专利申请的分案申请。


[0002]本申请涉及生物医药领域，具体的涉及一种分离的抗原结合蛋白及其用途。

技术介绍

[0003]肿瘤是一种严重威胁人类健康的疾病，其中肝癌是危害很广泛的一种恶性肿瘤。由乙肝病毒引起的肝癌具有潜伏期长的特点，一旦发现往往已至晚期，而且发病后进展快速、治疗预后差。
[0004]磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican3,GPC3)是一种细胞膜表面的硫酸乙酰肝素蛋白多糖，存在于多种肿瘤之中，在肝癌中尤为常见。近年来，随着分子生物学、基因组学及蛋白质组学的进展，陆续问世了一系列的分子靶向药物，用于肝癌的救治。分子靶向治疗是以肿瘤细胞过度表达的某些标志性分子为靶点，选择针对性的阻断剂，进行有效地干预，从而达到抑制肿瘤生长、进展及转移的效果。相对于手术、放疗、化疗三大传统治疗手段，分子靶向治疗能高效并选择性地杀伤肿瘤细胞，减少对正常组织的损伤。但是目前利用分子靶向技术进行肿瘤治疗的效果仍不尽人意，有较多需要改进之处。

技术实现思路

[0005]本申请提供一种分离的抗原结合蛋白，其包含氨基酸序列如SEQ ID NO:53所示的VH中的至少一个CDR；且其包含氨基酸序列如SEQ ID NO:49所示的VL中的至少一个CDR。
[0006]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白具有下述性质中的一种或多种：
[0007]1)能够以6
×
10
‑9M或更低的K
D
与GPC3蛋白相结合，其中所述K
D
值通过Octet测定；
[0008]2)在FACS测定中，能够特异性结合HepG2细胞和/或Huh7细胞表面的GPC3蛋白；和，
[0009]3)能够抑制肿瘤生长和/或肿瘤细胞增殖。
[0010]在某些实施方式中，所述GPC3蛋白包含人GPC3蛋白。
[0011]在某些实施方式中，所述人GPC3蛋白包含如SEQ ID NO:74所示的氨基酸序列。
[0012]在某些实施方式中，所述肿瘤包括GPC3阳性的肿瘤。
[0013]在某些实施方式中，所述GPC3阳性的肿瘤包括肝癌。
[0014]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含氨基酸序列如SEQ ID NO:53所示的VH中的HCDR1。
[0015]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含氨基酸序列如SEQ ID NO:53所示的VH中的HCDR2。
[0016]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含氨基酸序列如SEQ ID NO:53所示的VH中的HCDR3。
[0017]在某些实施方式中，所述HCDR1包含X1YX2MH所示的氨基酸序列，其中X1可以为D或
A，X2可以为A或E。
[0018]在某些实施方式中，所述HCDR1包含SEQ ID NO:4和12中任一项所示的氨基酸序列。
[0019]在某些实施方式中，所述HCDR2包含SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列。
[0020]在某些实施方式中，所述HCDR2包含SEQ ID NO:5、10和13中任一项所示的氨基酸序列。
[0021]在某些实施方式中，所述HCDR3包含X1X2X3X4X5X6X7X8X9X
10
X
11
所示的氨基酸序列，其中X1可以为D或T，X2可以为H或R，X3可以为T或F，X4可以为I或Y，X5可以为G或S，X6可以为V或Y，X7可以为G或A，X8可以为A、Y或H，X9可以为F或空白，X
10
可以为D或空白，X
11
可以为I或空白。
[0022]在某些实施方式中，所述HCDR3包含SEQ ID NO:6、11和14中任一项所示的氨基酸序列。
[0023]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含氨基酸序列如SEQ ID NO:49所示的VL中的LCDR1。
[0024]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含氨基酸序列如SEQ ID NO:49所示的VL中的LCDR2。
[0025]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包含氨基酸序列如SEQ ID NO:49所示的VL中的LCDR3。
[0026]在某些实施方式中，所述LCDR1包含X1X2X3X4SX5VX6X7X8X9YX
10
X
11
X
12
X
13
所示的氨基酸序列，其中X1可以为T或R，X2可以为G或S，X3可以为T或S，X4可以为S或Q，X5可以为D或L，X6可以为G或H，X7可以为G或S，X8可以为Y或N，X9可以为N或G，X
10
可以为V或T，X
11
可以为S或Y，X
12
可以为空白或L，X
13
可以为空白或H。
[0027]在某些实施方式中，所述LCDR1包含SEQ ID NO:1和7中任一项所示的氨基酸序列。
[0028]在某些实施方式中，所述LCDR2包含X1X2SX3RX4S所示的氨基酸序列，其中X1可以为D或K，X2可以为V或G，X3可以为N、Y或Q，X4可以为P或G。
[0029]在某些实施方式中，所述LCDR2包含SEQ ID NO:2、8和15中任一项所示的氨基酸序列。
[0030]在某些实施方式中，所述LCDR3包含X1X2X3X4X5X6X7X8X9X
10
所示的氨基酸序列，其中X1可以为S或G，X2可以为S或Q，X3可以为Y或S，X4可以为A或G，X5可以为S或L，X6可以为G或T，X7可以为S或P，X8可以为T或P，X9可以为L或T，X
10
可以为V或空白。
[0031]在某些实施方式中，所述LCDR3包含SEQ ID NO:3和9中任一项所示的氨基酸序列。
[0032]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白包括抗体或其抗原结合片段。
[0033]在某些实施方式中，所述抗原结合片段包括Fab，Fab
’
，F(ab)2、Fv片段、F(ab
’
)2，scFv，di
‑
scFv和/或dAb。
[0034]在某些实施方式中，所述分离的抗原结合蛋白的所述VL包括框架区L
‑
FR1，L
‑
FR2，L
‑
FR3，和L
‑
FR4。
[0035]在某些实施方式中，所述L
‑
FR1的C末端与所述LCDR1的N末端直接或间接相连，且所述L
‑
FR1包含SEQ ID NO:22和30中任一项所示的氨基酸序列。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.分离的抗原结合蛋白，其能够与GPC3蛋白相结合，所述抗原结合蛋白包含抗体轻链或其片段和抗体重链或其片段，所述抗体轻链或其片段包含LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述抗体重链或其片段包含HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3包含选自下组的氨基酸序列：(1)HCDR1：SEQ ID NO:12、HCDR2：SEQ ID NO:13、HCDR3：SEQ ID NO:14、LCDR1：SEQ ID NO:7、LCDR2：SEQ ID NO:8、LCDR3：SEQ ID NO:9；(2)HCDR1：SEQ ID NO:12、HCDR2：SEQ ID NO:13、HCDR3：SEQ ID NO:14、LCDR1：SEQ ID NO:7、LCDR2：SEQ ID NO:15、LCDR3：SEQ ID NO:9；以及(3)HCDR1：SEQ ID NO:4、HCDR2：SEQ ID NO:5、HCDR3：SEQ ID NO:6、LCDR1：SEQ ID NO:1、LCDR2：SEQ ID NO:2、LCDR3：SEQ ID NO:3。2.根据权利要求1所述的分离的抗原结合蛋白，所述抗体轻链或其片段包含轻链可变区VL，且所述VL包含SEQ ID NO:46
‑
48中任一项所示的氨基酸序列。3.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：何晓文，郭昊，王华菁，杨月，杨棋，李慧姣，李霄培，李博华，杨焕凤，
申请(专利权)人：原启生物科技上海有限责任公司，
类型：发明
国别省市：