一种与细胞侵袭能力相关的组合物及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种与细胞侵袭能力相关的组合物及其用途。本发明专利技术以BCSG1作为靶标，制备并获得了BCSG1单克隆抗体，该抗体能够特异性的结合BCSG1蛋白而不与其他蛋白结果表现了极好的特异性，同时经过亲和力鉴定，本发明专利技术的单抗具有较好的亲和活性。通过与癌细胞共培养，发现改单抗能够特异性的抑制癌细胞中的BCSG1蛋白的表达并且能够抑制癌细胞的侵袭能力。白的表达并且能够抑制癌细胞的侵袭能力。白的表达并且能够抑制癌细胞的侵袭能力。

【技术实现步骤摘要】
一种与细胞侵袭能力相关的组合物及其用途


[0001]本申请涉及生物领域，更具体的涉及一种与细胞侵袭能力相关的组合物及其用途。

技术介绍

[0002]乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,据统计20世纪末全球每年有130万新发病例，因此探讨乳腺癌的发生、发展及转移机制，寻找新的生物分子靶标，对乳腺癌的预防和治疗都具有重要意义。已有许多基因被认为是与乳腺癌转移和(或)预后有关的标记物,如组织蛋白酶D(CathepsinD)、CEA、CK19、P53等。尽管这些基因在乳腺正常组织和癌肿中有不同程度表达,但它们并不是乳腺组织所特有的。
[0003]BCSG1定位于人类染色体10q23，DNA分子量约5kb，含5个外显子，转录得1kbmRNA，编码一条含127个氨基酸的蛋白。比较该人类蛋白序列发现，BC2SG1分别与SNCs家族另两个成员SNCA、SNCB有55.9％和54.3％的相似序列，最保守区在蛋白质N2末端，包含着有KTKEGV序列变异的重复结构区。目前国内外的关于乳腺癌特异基因1(BCSG1)已经认识到是一种特异的在乳腺癌中有选择性表达的基因，利用原位杂交方法和RNA印迹分析法检测乳腺癌细胞株以及少量乳腺组织标本中的BCSG1mRNA表达，发现在不同乳腺组织中，其基因表达存在明显差异。报道BCSG1在正常乳腺组织中不表达，在乳腺良性增生或纤维腺瘤中低表达(11.1％)，在乳腺癌组织中高表达(85.0％)。BCSG1阳性乳腺癌细胞其转移及成瘤能力明显高于BCSG1阴性乳腺癌细胞。BCSG1在纤维腺瘤、增生症和非典型增生阳性表达率分别为20％、76％及92.3％，提示BCSG1的表达与乳腺组织的增生程度相关。III/IV期乳腺癌细胞BCSG1表达明显高于I/II期乳腺癌，BCSG1可能是乳腺癌分级的特异基因，是乳腺癌侵袭和转移的预测指标，潜在的基因治疗靶点。对BCSG1进行检测，有助于对乳腺癌侵袭转移能力的评估，为更准确地确定增生程度分级及预测其进展提供重要信息，同时，通过比较治疗前后乳腺癌细胞中BCSG1的水平，可评估治疗效果。近年来研究发现的乳腺癌特异性基因1(Breast Cancer Specific Gene 1，BCSG1)被证实与γ突触核蛋白(γ
‑
synuclein，SNCG)是同一蛋白，其与乳腺癌和卵巢癌密切相关，在多数进展期的乳腺癌和卵巢癌中特异性的高表达，而与其他肿瘤的关系报道相对较少。
[0004]BCSG1高表达与淋巴结转移状况及临床分期呈正相关，与疗效及预后呈负相关，与患者年龄、月经状况、雌/孕激素受体等无关，与相关研究结果一致，提示BCSG1可作为评估乳腺癌疗效及预后的指标。本研究结果还显示，BCSG1高表达患者治疗后出现复发、转移概率明显高于低表达者，差异有统计学意义，提示BCSG1表达可能与增加乳腺癌细胞对化疗药物的耐受性有关，从而降低疗效。提示可将BCSG1作为一个新的治疗靶点，通过下调BCSG1在乳腺癌中的表达，从而降低乳腺癌治疗后的复发、转移率。
[0005]尽管BCSG1染色体定位、序列以及结构已经明确,但对其功能和致病机制知之甚少。影响肿瘤发生和发展的基因可分为两类：一类由DNA发生突变等原因直接导致肿瘤形成,如BRCA1、BRCA2、p53等；另一类由于原癌基因扩增和(或)过度表达促使肿瘤生成和进
展,如HER22 neu、mammaglobin等。乳腺癌的发生和发展是受到来自以上两类多种基因共同调控的结果。研究结果没有显示persyn基因存在肿瘤特异性突变，但在该基因mRNA或外显子、均发现相关多行性编码区，说明乳腺癌的进展与野生型persyn过度表达有关。persyn基因过度表达主要受到基因转录水平和(或)mRNA稳定性的调节。因此，目前针对BCSG1进行特异性的研究，特别是开发相应的BCSG1特异性抑制剂进而研究该基因对细胞的影响是重要的研究方向。

技术实现思路

[0006]本专利技术基于现有技术的启示，提供了一种新的BCSG1抑制活性物质。
[0007]进一步的，本专利技术的抑制活性物质是BCSG1单克隆抗体。
[0008]具体的，所述BCSG1单克隆抗体为免疫球蛋白分子和免疫球蛋白(Ig)分子的免疫活性部分，即含有免疫结合抗原的抗原结合位点的分子。抗体包括但不限于多克隆、单克隆、嵌合、dAb(结构域抗体)、单链、Fab、Fab
′
和F(ab
′
)2片段、单链Fv片段(scFv)和Fab表达文库。已知抗体基本结构单元包括四聚体。每个四聚体由2对相同的多肽链组成，每一对具有一条“轻”链(约25kDa)和一条“重”链(约50
‑
70kDa)。每条链的氨基端部分包括约100至110个或更多个主要负责抗原识别的氨基酸的可变区。每条链的羧基端部分限定了主要负责效应子功能的恒定区。通常，从人获得的抗体分子涉及任何类别IgG、IgM、IgA、IgE和IgD，分子中存在的重链的性质互不相同。某些类别也具有子类，例如IgG1、IgG2和其它。而且，在人体中，轻链可为κ链或λ链。
[0009]具体的，本专利技术的的单克隆抗体或者抗体或者免疫球蛋白分子或其其片段的轻链可变区序列如序列表的SEQ ID NO：1所示，重链可变区序列如序列表的SEQ ID NO：2所示。
[0010]进一步的，本专利技术的单克隆抗体或者抗体或者免疫球蛋白分子或其其片段还可以被氨基酸改变或者替换。
[0011]抗体或免疫球蛋白分子的氨基酸序列的变化涵盖于本专利技术中，条件是氨基酸序列的变化保持至少75％，更优选至少80％、90％、95％和最优选99％。包括其间的某些百分比，例如75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性。尤其，包括保守性氨基酸置换。保守性置换是在与侧链相关的氨基酸家族中发生的置换。遗传编码的氨基酸通常分为以下家族：(1)酸性氨基酸为天冬氨酸、谷氨酸；(2)碱性氨基酸为赖氨酸、精氨酸、组氨酸；(3)非极性氨基酸为丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸，和(4)不带电的极性氨基酸为甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸。亲水性氨基酸包括：精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、组氨酸、赖氨酸、丝氨酸和苏氨酸。疏水性氨基酸包括丙氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸。其它氨基酸家族包括(i)为脂肪族羟基家族的丝氨酸和苏氨酸；(ii)为含有酰胺的家族的天冬酰胺和谷氨酰胺；(iii)为脂肪族的丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸；和(iv)为芳香族的苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸。例如，有理由期望用异亮氨酸或缬氨酸单独置换亮氨酸，用谷氨酸单独置换天冬氨酸，用丝氨酸单独置换苏氨酸，或用结构相关的氨基酸对氨基酸进行相似置换对所得分子的结合或性质无较大影响本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种BCSG1单克隆抗体B22F5，其特征在于所述抗体的轻链可变区序列如序列表的SEQ ID NO：1所示，重链可变区序列如序列表的SEQ ID NO：2所示。2.一种用于抑制细胞内BCSG1蛋白高表达的药物组合物，其特征在于所述药物组合物中含有权利要求1所述的BCSG1单克...

【专利技术属性】
技术研发人员：马亮，王树清，
申请(专利权)人：广州谢芃科技有限公司，
类型：发明
国别省市：