一种UBE3A突变体蛋白、UBE3A基因突变体、扩增引物、检测试剂及应用制造技术

本发明专利技术属于医学诊断技术领域，具体涉及一种UBE3A突变体蛋白、UBE3A基因突变体、扩增引物、检测试剂及应用。本发明专利技术所述UBE3A突变体蛋白包括p.N82Tfs*5的突变。本发明专利技术所述UBE3A突变体蛋白与野生型UBE3A基因编码的蛋白相比，第82位氨基酸由天冬酰胺(N)突变为苏氨酸(T)，并造成移码突变，在此后5位氨基酸后终止，即含有p.N82Tfs*5的突变。本发明专利技术首次发现了UBE3A突变体蛋白可以导致天使综合征发病，通过检测受试者是否携带有上述突变体蛋白，能够用于天使综合征的遗传学诊断，以及产前诊断和优生优育，为天使综合征患者的治疗提供全新的理论依据。据。据。

【技术实现步骤摘要】
一种UBE3A突变体蛋白、UBE3A基因突变体、扩增引物、检测试剂及应用


[0001]本专利技术属于医学诊断
，具体涉及一种UBE3A突变体蛋白、UBE3A基因突变体、扩增引物、检测试剂及应用。

技术介绍

[0002]天使综合征(angelmansyndrome，AS)(MIM 105830)又称快乐木偶综合征，是一种遗传异常所致的神经发育障碍性疾病，属于非进展性脑病。特征性表现为智力低下、快乐行为、严重语言障碍、共济失调、睡眠障碍及癫痫发作等，发病率约为1/20000
‑
1/12000。
[0003]天使综合征主要由基因缺陷引起，遗传学发病机制类型有：
[0004]Ⅰ型(缺失型)：母源15号染色体q11.2
‑
13区域约5
‑
7Mb缺失，约占68％。
[0005]Ⅱ型(UPD型)：q11.2
‑
13区域父源单亲二倍体(uniparental disomy，UPD)所致，即患者的两条15号染色体或15号染色体q11.2
‑
13片段均来自父亲，约占7％。
[0006]Ⅲ型(ID型)：印迹缺陷(imprintingdefects)所致，患者虽然从双亲各遗传了1条15号染色体，但母源15号染色体q11.2
‑
13区域内的印迹中心(imprintingcenter)呈现DNA甲基化异常或基因表达缺失，通常为6
‑
200kb微缺失，约占3％。
[0007]Ⅳ型(UBE3A突变型)：UBE3A基因突变所致，基因内大片段缺失/重复或整个基因缺失/重复突变罕见，通常表现为UBE3A基因点突变或小的插入缺失，约占11％。
[0008]另有10％的患者遗传机制不明确。
[0009]基因突变是导致疾病发生发展的重要遗传基础，基因诊断和发现基因突变是确诊天使综合征的重要标准。临床上需要针对不同突变建立相应的检测技术并用于明确病因和疾病诊断。因此，寻求诊断天使综合征的突变基因、及早明确患者诊断以及靶向干预，在目前天使综合征检测领域尤为重要。

技术实现思路

[0010]本专利技术的目的在于提供一种用于诊断天使综合征的突变基因、扩增引物、检测试剂及应用，丰富天使综合征的致病突变谱，精准判断天使综合征，用于天使综合征的遗传学诊断以指导治疗，以及产前遗传学诊断和优生优育。
[0011]本专利技术提供了一种UBE3A突变体蛋白，所述UBE3A突变体蛋白包括p.N82Tfs*5的突变。
[0012]本专利技术还提供了编码上述技术方案所述的UBE3A突变体蛋白的UBE3A基因突变体，所述UBE3A基因突变体包括c.245delA。
[0013]本专利技术还提供了上述技术方案所述UBE3A突变体蛋白或UBE3A基因突变体作为检测靶点在制备a1)～a5)中任意一种或多种试剂盒中的应用：
[0014]a1)预防天使综合征试剂盒；
[0015]a2)诊断天使综合征试剂盒；
[0016]a3)孕前和/或产前遗传病筛查试剂盒；
[0017]a4)孕前和/或产前遗传病诊断试剂盒；
[0018]a5)辅助治疗天使综合征试剂盒。
[0019]本专利技术还提供了一种用于扩增上述技术方案所述UBE3A基因突变体的引物，包括上游引物UBE3A
‑
F和下游引物UBE3A
‑
R；
[0020]所述上游引物UBE3A
‑
F包括如b1)～b4)中的任意一种：
[0021]b1)序列表中SEQ ID NO.1所述的单链DNA；
[0022]b2)在b1)的5
’
端和/或3
’
端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；
[0023]b3)在b1)或b2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；
[0024]b4)在严格条件下与b1)或b2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；
[0025]所述下游引物UBE3A
‑
R包括如c1)～c4)中的任意一种：
[0026]c1)序列表中SEQ ID NO.2所述的单链DNA；
[0027]c2)在c1)的5
’
端和/或3
’
端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；
[0028]c3)在c1)或c2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；
[0029]c4)在严格条件下与c1)或c2)限定的单链DNA杂交的单链DNA。
[0030]本专利技术还提供了上述技术方案所述引物在制备诊断天使综合征的试剂中的应用。
[0031]本专利技术还提供了一种诊断天使综合征的试剂，所述试剂包括上述技术方案所述的引物。
[0032]优选的，所述试剂还包括和测序引物；
[0033]所述测序引物包括上游引物UBE3A
‑
SeqF和下游引物UBE3A
‑
SeqR；
[0034]所述上游引物UBE3A
‑
SeqF包括如d1)～d4)中的任意一种：
[0035]d1)序列表中SEQ ID NO.3所述的单链DNA；
[0036]d2)在d1)的5
’
端和/或3
’
端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；
[0037]d3)在d1)或d2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；
[0038]d4)在严格条件下与d1)或d2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；
[0039]所述下游引物UBE3A
‑
SeqR包括如e1)～e4)中的任意一种：
[0040]e1)序列表中SEQ ID NO.4所述的单链DNA；
[0041]e2)在e1)的5
’
端和/或3
’
端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；
[0042]e3)在e1)或e2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；
[0043]e4)在严格条件下与e1)或e2)限定的单链DNA杂交的单链DNA。
[0044]优选的，所述试剂还包括dNTPs，PCR缓冲液，镁离子和Tap聚合酶中的一种或多种。
[0045]本专利技术还提供了上述技术方案所述的引物或试剂在制备下述f1)～f5)中任意一种或多种试剂盒中的应用：
[0046]f1)预防天使综合征试剂盒；
[0047]f2)诊断天使综合征试剂盒；
[0048]f3)孕前和/或产前遗传病筛查试剂盒；
[0049]f4)孕前和/或产前遗传病诊断试剂盒；
[0050]f5)辅助治疗天使综合征试剂盒。
[0051]本专利技术还提供了一种诊断天使综合征的试剂盒，包括上述技术方案所述的试剂。
[0052]本专利技术提供本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种UBE3A突变体蛋白，其特征在于，所述UBE3A突变体蛋白包括p.N82Tfs*5的突变。2.编码权利要求1所述的UBE3A突变体蛋白的UBE3A基因突变体，其特征在于，所述UBE3A基因突变体包括c.245delA。3.权利要求1所述UBE3A突变体蛋白或权利要求2所述的UBE3A基因突变体作为检测靶点在制备a1)～a5)中任意一种或多种试剂盒中的应用：a1)预防天使综合征试剂盒；a2)诊断天使综合征试剂盒；a3)孕前和/或产前遗传病筛查试剂盒；a4)孕前和/或产前遗传病诊断试剂盒；a5)辅助治疗天使综合征试剂盒。4.一种用于扩增权利要求2所述UBE3A基因突变体的引物，其特征在于，包括上游引物UBE3A
‑
F和下游引物UBE3A
‑
R；所述上游引物UBE3A
‑
F包括如b1)～b4)中的任意一种：b1)序列表中SEQ ID NO.1所述的单链DNA；b2)在b1)的5
’
端和/或3
’
端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；b3)在b1)或b2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；b4)在严格条件下与b1)或b2)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述下游引物UBE3A
‑
R包括如c1)～c4)中的任意一种：c1)序列表中SEQ ID NO.2所述的单链DNA；c2)在c1)的5
’
端和/或3
’
端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；c3)在c1)或c2)限定的单链DNA具有85％以上的同一性的单链DNA；c4)在严格条件下与c1)或c2)限定的单链DNA杂交的单链DNA。5.权利要求4所述引物在制备诊断天使综合征的试剂中的应用。6.一种诊断天...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾桥，刘亚宁，伍亮，邓亚兰，
申请(专利权)人：湖南家辉生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：