【技术实现步骤摘要】
一种检测脊髓性肌萎缩症致病基因SMN1的引物探针组以及试剂盒
[0001]本专利技术属于生物
,涉及一种检测脊髓性肌萎缩症致病基因SMN1的引物探针组以及试剂盒。
技术介绍
[0002]脊髓性肌萎缩症(spinal muscular atrophy,SMA)是一种儿童最常见的神经肌肉病,临床特征以脊髓前角α
‑
运动神经元退化变性导致的肌无力和肌萎缩为主。SMA患者临床症状差异大,从出生后至成人期均可发病。主要表现为以四肢近端为主的进行性肌无力和肌萎缩,随着疾病进展,可出现呼吸、消化、骨骼等多系统受累。
[0003]SMA属于常染色体隐性遗传性疾病,由运动神经元生存基因1(survival motor neuron 1,SMN1)突变引起,SMN1突变导致脊髓前角细胞的α运动神经元退化,进而导致严重的进行性肌张力减退和肌肉无力,从而可引起患者早期死亡。SMN基因有两个高度同源的SMN1和SMN2基因,目前发现SMN1和SMN2基因只有在外显子6到外显子8区域存在5个碱基的区别(c.835
‑
44,c.840,INS7+100,INS7+215,c.*239),c.840在7号外显子上,同源性大于99%,均编码SMN蛋白。SMN1基因编码有功能的全长SMN蛋白,SMN2仅表达少量的有正常功能的蛋白。SMN1为SMA的致病基因,SMN2作为修饰代偿基因与疾病严重程度相关。
[0004]SMA突变基因型主要有两类,95%由SMN1基因双等位纯合缺失所致;5%由SMN1 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种试剂盒,包括基因检测液A、基因检测液B、基因检测液C;所述基因检测液A中含有引物F4、引物R4、引物F6、引物R6、引物F7、引物R7、探针FP4、探针Q2、探针FP8、探针Q5、探针FP9、探针FP10和探针Q6;基因检测液B中含有引物F4、引物R4、引物F6、引物R6、引物F5、引物R5、探针FP6、探针Q4、探针FP7、探针FP11、探针Q7、探针FP5和探针Q3;基因检测液C中含有引物F1、引物R1、引物F2、引物R2、引物F3、引物R3、探针FP1、探针FP2、探针Q1、探针FP3和探针FB1;引物F1为SEQ ID NO:1所示的单链DNA分子;引物R1为SEQ ID NO:2所示的单链DNA分子;引物F2为SEQ ID NO:3所示的单链DNA分子;引物R2为SEQ ID NO:4所示的单链DNA分子;引物F3为SEQ ID NO:5所示的单链DNA分子;引物R3为SEQ ID NO:6所示的单链DNA分子;引物F4为SEQ ID NO:7所示的单链DNA分子;引物R4为SEQ ID NO:8所示的单链DNA分子;引物F5为SEQ ID NO:9所示的单链DNA分子;引物R5为SEQ ID NO:10所示的单链DNA分子;引物F6为SEQ ID NO:11所示的单链DNA分子;引物R6为SEQ ID NO:12所示的单链DNA分子;引物F7为SEQ ID NO:13所示的单链DNA分子;引物R7为SEQ ID NO:14所示的单链DNA分子;探针FP1为SEQ ID NO:15所示的单链DNA分子;探针FP2为SEQ ID NO:16所示的单链DNA分子;探针Q1为SEQ ID NO:17所示的单链DNA分子;探针FP3为SEQ ID NO:18所示的单链DNA分子;探针FB1为SEQ ID NO:19所示的单链DNA分子;探针FP4为SEQ ID NO:20所示的单链DNA分子;探针Q2为SEQ ID NO:21所示的单链DNA分子;探针FP5为SEQ ID NO:22所示的单链DNA分子;探针Q3为SEQ ID NO:23所示的单链DNA分子;探针FP6为SEQ ID NO:24所示的单链DNA分子;探针Q4为SEQ ID NO:25所示的单链DNA分子;探针FP7为SEQ ID NO:26所示的单链DNA分子;探针FP8为SEQ ID NO:27所示的单链DNA分子;探针Q5为SEQ ID NO:28所示的单链DNA分子;探针FP9为SEQ ID NO:29所示的单链DNA分子;探针Q6为SEQ ID NO:30所示的单链DNA分子;探针FP10为SEQ ID NO:31所示的单链DNA分子;探针FP11为SEQ ID NO:32所示的单链DNA分子;探针Q7为SEQ ID NO:33所示的单链DNA分子。2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括前处理液和扩增反应液;所述前处理液中含有Chelex
‑
100、Triton
‑
X100和NaOH;所述扩增反应液中含有DNA聚合酶、dNTP、dUTP和UDG酶。3.基因检测液A、基因检测液B和基因检测液C在制备试剂盒中的应用;所述基因检测液A为权利要求1中所述的基因检测液A;所述基因检测液B为权利要求1中所述的基因检测液B;所述基因检测液C为权利要求1中所述的基因检测液C。4.基因检测液A、基因检测液B、基因检测液C、前处理液和扩增反应液在制备试剂盒中的应用;所述基因检测液A为权利要求1中所述的基因检测液A;所述基因检测液B为权利要求1中所述的基因检测液B;所述基因检测液C为权利要求1中所述的基因检测液C。所述前处理液为权利要求2中所述的前处理液;所述扩增反应液为权利要求2中所述的扩增反应液。
5.如权利要求1至4中任一所述的试剂盒或应用,其特征在于:基因检测液A中,引物F4、引物R4、引物F6、引物R6、引物F7、引物R7、探针FP4、探针Q2、探针FP8、探针Q5、探针FP9、探针FP10和探针Q6的摩尔配比依次如下:1.5:15:12:1.2:1:10:6:6:6:6:5:5:5;基因检测液B中,引物F4、引物R4、引物F6、引物R6、引物F5、引物R5、探针FP6、探针Q4、探针FP7、探针FP11、探针Q7、探针FP5和探针Q3的摩尔配比依次如下:1.5:15:1:10:1.5:15:7.5:7.5:7.5:5:5:6:6;基因检测液C中,引物F1、引物R1、引物F2、引物R2、引物F3、引物R3、探针FP1、探针FP2、探针Q1、探针FP3、探针FB1的摩尔配比依次如下:1:10:1:10:10:1:5:5:5:5:2。6.如权利要求1至4中任一所述的试剂盒或应用,其特征在于:探针FP1,5'端末标记FAM,3'末端标记BHQ2;探针FP2,5'末端标记CY5,3'端进行C3 Spacer修饰;探针Q1,3'末端标记BHQ2;探针FP3,5'末端标记ROX,3'末端标...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨尧,张鲁军,郭翠,韦淑杯,张伟,戴国华,王庆,张燕娜,
申请(专利权)人:苏州淦江生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。