间皮素靶向抗体、嵌合抗原受体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了抗间皮素抗体和抗原结合片段、具有此类抗间皮素抗体和抗原结合片段的嵌合抗原受体(“CAR”)(“间皮素CAR”)以及具有此类间皮素CAR的基因工程化改造的免疫效应细胞。本发明专利技术还提供了编码抗间皮素抗体及抗原结合片段，和间皮素CAR的多核苷酸。本发明专利技术还提供了包含抗间皮素抗体和抗原结合片段以及间皮素CAR的组合物。本发明专利技术还涉及所述抗间皮素抗体及抗原结合片段，以及具有此类间皮素CAR的基因工程化改造的免疫效应细胞在癌症治疗中的用途。的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】间皮素靶向抗体、嵌合抗原受体及其应用
1.

[0001]本专利技术涉及分子生物学、细胞生物学和免疫肿瘤学。具体地，本专利技术所提供的包括抗间皮素抗体、包含此抗间皮素抗体的嵌合抗原受体(“间皮素CAR”，嵌合抗原受体为CAR)、表达此间皮素CAR的基因工程免疫效应细胞，以及其在治疗肿瘤或癌症中的用途。
2.
技术介绍

[0002]细胞免疫疗法是一种有治疗潜力的肿瘤治疗方法。通过引入编码抗原的人工或合成受体的遗传物质，所述受体对特定抗原具有特异性，如嵌合抗原受体(CAR)，可以修饰T细胞和其他免疫细胞使其靶向肿瘤抗原。使用CAR(CART)的靶向T细胞治疗最近在治疗某些血液系统恶性肿瘤方面取得了临床成功。然而，将表达CAR的T细胞疗法应用到实体瘤存在一些障碍，必须克服这些障碍才能在临床获益。因此，需要新的治疗策略来设计用于治疗癌症(尤其是实体瘤)的CAR，其策略能够以最小的毒性和免疫原性诱导强效肿瘤根除。间皮素在多种人类癌症中表达，如间皮瘤、胰腺癌和卵巢癌。然而，目前靶向间皮素的治疗方法只取得了有限的成功。因此，其他的间皮素靶向治疗方案代表了未满足的需求。本专利技术提供的组合物和方法满足这些需求并具有其他相关优势。
3.
技术实现思路

[0003]本专利技术提供了特异性结合间皮素(例如人间皮素)的抗体或其抗原结合片段，其包括：(a)轻链可变区(VL)，所述VL包括(1)轻链CDR1(VL CDR1)，其具有选自由SEQ ID NO:1
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15组成的群组中的氨基酸序列；(2)轻链CDR2(VL CDR2)，其具有选自由SEQ ID NO:16
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29组成的群组中的氨基酸序列；和(3)轻链CDR3(VL CDR3)，其具有选自由SEQ ID NO:30
‑
44组成的群组中的氨基酸序列；或其变体，所述变体在所述VL CDR中具有至多约5个氨基酸的替换、添加和/或缺失；和/或(b)重链可变区(VH)，所述VH包括(1)重链CDR1(VH CDR1)，其具有选自由SEQ ID NO:45
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57组成的群组中的氨基酸序列；(2)重链CDR2(VH CDR2)，其具有选自由SEQ ID NO:58
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70组成的群组中的氨基酸序列；和(3)重链CDR3(VH CDR3)，其具有选自由SEQ ID NO:71
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85组成的群组中的氨基酸序列；或其变体，所述变体在所述VH CDR中具有至多约5个氨基酸替换、添加和/或缺失。
[0004]在本专利技术提供的抗体和抗原结合片段的一些实施方案中，(a)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有(1)SEQ ID NO:1、16和30所示的氨基酸序列；(2)SEQ ID NO:2、17和31所示的氨基酸序列；(3)SEQ ID NO:3、18和32所示的氨基酸序列；(4)SEQ ID NO:4、19和33所示的氨基酸序列；(5)SEQ ID NO:5、20和34所示的氨基酸序列；(6)SEQ ID NO:6、21和35所示的氨基酸序列；(7)SEQ ID NO:7、22和36所示的氨基酸序列；(8)SEQ ID NO:8、23和37所示的氨基酸序列；(9)SEQ ID NO:2、24和38所示的氨基酸序列；(10)SEQ ID NO:10、25和39所示的氨基酸序列；(11)SEQ ID NO:11、26和40所示的氨基酸序列；(12)SEQ ID NO:12、27和41所示的氨基酸序列；(13)SEQ ID NO:13、28和42所示的氨基酸序列；(14)SEQ ID NO:14、29和43所示的氨基酸序列；或(15)SEQ ID NO:15、18和44所示的氨基酸序列；或其变体，所
述变体在所述VL CDR中具有至多约5个氨基酸的替换、添加和/或缺失；和/或，(b)所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有(1)SEQ ID NO:45、58和71所示的氨基酸序列；(2)SEQ ID NO:46、59和72所示的氨基酸序列；(3)SEQ ID NO:47、60和73所示的氨基酸序列；(4)SEQ ID NO:48、61和74所示的氨基酸序列；(5)SEQ ID NO:49、62和75所示的氨基酸序列；(6)SEQ ID NO:50、63和76所示的氨基酸序列；(7)SEQ ID NO:51、64和77所示的氨基酸序列；(8)SEQ ID NO:52、65和78所示的氨基酸序列；(9)SEQ ID NO:53、66和79所示的氨基酸序列；(10)SEQ ID NO:48、61和80所示的氨基酸序列；(11)SEQ ID NO:54、67和81所示的氨基酸序列；(12)SEQ ID NO:53、66和82所示的氨基酸序列；(13)SEQ ID NO:55、68和83所示的氨基酸序列；(14)SEQ ID NO:56、69和84所示的氨基酸序列；或(15)SEQ ID NO:57、70和85所示的氨基酸序列；或其变体，所述变体在所述VH CDR中具有至多约5个氨基酸的替换、添加和/或缺失。
[0005]在本专利技术提供的抗体和抗原结合片段的一些实施方案中，(1)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:1、16和30所示的氨基酸序列；和/或，所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:45、58和71所示的氨基酸序列；(2)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:2、17和31所示的氨基酸序列；和/或，所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:46、59和72所示的氨基酸序列；(3)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:3、18和32所示的氨基酸序列；和/或，所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:47、60和73所示的氨基酸序列；(4)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:4、19和33所示的氨基酸序列；和/或，所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:48、61和74所示的氨基酸序列；(5)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:5、20和34所示的氨基酸序列；和/或，所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:49、62和75所示的氨基酸序列；(6)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:6、21和35所示的氨基酸序列；和/或，所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:50、63和76所示的氨基酸序列；(7)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:7、22、36所示的氨基酸序列；和/或，所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:51、64和77所示的氨基酸序列；(8)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:8、23和37所示的氨基酸序本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种特异性结合间皮素的抗体或其抗原结合片段，包括：(a)轻链可变区(VL)，其包括(1)轻链CDR1(VL CDR1)，具有选自由SEQ ID NO:1
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15所构成群组中的氨基酸序列；(2)轻链CDR2(VL CDR2)，具有选自由SEQ ID NO:16
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29所构成群组中的氨基酸序列；(3)轻链CDR3(VL CDR3)，具有选自由SEQ ID NO:30
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44所构成群组的氨基酸序列；或其变体，所述变体在VL CDR中具有至多约5个氨基酸替换、添加和/或缺失；和/或(b)重链可变区(VH)，其包括(1)重链CDR1(VH CDR1)，具有选自由SEQ ID NO:45
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57所构成群组的氨基酸序列；(2)重链CDR2(VH CDR2)，具有选自由SEQ ID NO:58
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70所构成群组的氨基酸序列；(3)重链CDR3(VH CDR3)，具有选自由SEQ ID NO:71
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85所构成群组的氨基酸序列；或其变体，所述变体在VH CDR中具有至多约5个氨基酸替换、添加和/或缺失。2.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其中：(a)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有(1)SEQ ID NO:1、16和30所示的氨基酸序列；(2)SEQ ID NO:2、17和31所示的氨基酸序列；(3)SEQ ID NO:3、18和32所示的氨基酸序列；(4)SEQ ID NO:4、19和33所示的氨基酸序列；(5)SEQ ID NO:5、20和34所示的氨基酸序列；(6)SEQ ID NO:6、21和35所示的氨基酸序列；(7)SEQ ID NO:7、22和36所示的氨基酸序列；(8)SEQ ID NO:8、23和37所示的氨基酸序列；(9)SEQ ID NO:9、24和38所示的氨基酸序列；(10)SEQ ID NO:10、25和39所示的氨基酸序列；(11)SEQ ID NO:11、26和40所示的氨基酸序列；(12)SEQ ID NO:12、27和41所示的氨基酸序列；(13)SEQ ID NO:13、28和42所示的氨基酸序列；(14)SEQ ID NO:14、29和43所示的氨基酸序列；或(15)SEQ ID NO:15、18和44所示的氨基酸序列；或其变体，所述变体在VL CDR中具有至多约5个氨基酸替换、添加和/或缺失；和/或(b)所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有(1)SEQ ID NO:45、58和71所示的氨基酸序列；(2)SEQ ID NO:46、59和72所示的氨基酸序列；(3)SEQ ID NO:47、60和73所示的氨基酸序列；(4)SEQ ID NO:48、61和74所示的氨基酸序列；(5)SEQ ID NO:49、62和75所示的氨基酸序列；(6)SEQ ID NO:50、63和76所示的氨基酸序列；(7)SEQ ID NO:51、64和77所示的氨基酸序列；
(8)SEQ ID NO:52、65和78所示的氨基酸序列；(9)SEQ ID NO:53、66和79所示的氨基酸序列；(10)SEQ ID NO:48、61和80所示的氨基酸序列；(11)SEQ ID NO:54、67和81所示的氨基酸序列；(12)SEQ ID NO:53、66和82所示的氨基酸序列；(13)SEQ ID NO:55、68和83所示的氨基酸序列；(14)SEQ ID NO:56、69和84所示的氨基酸序列；或(15)SEQ ID NO:57、70和85所示的氨基酸序列；或其变体，所述变体在VH CDR中具有至多约5个氨基酸替换、添加和/或缺失。3.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其中(1)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:1、16和30所示的氨基酸序列；和/或，所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:45、58和71所示的氨基酸序列；(2)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:2、17和31所示的氨基酸序列；和/或，所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:46、59和72所示的氨基酸序列；(3)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:3、18和32所示的氨基酸序列；和/或，所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:47、60和73所示的氨基酸序列；(4)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:4、19和33所示的氨基酸序列；和/或，所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:48、61和74所示的氨基酸序列；(5)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:5、20和34所示的氨基酸序列；和/或，所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:49、62和75所示的氨基酸序列；(6)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:6、21和35所示的氨基酸序列；和/或，所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:50、63和76所示的氨基酸序列；(7)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:7、22、36所示的氨基酸序列；和/或，所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:51、64和77所示的氨基酸序列；(8)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:8、23和37所示的氨基酸序列；和/或所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:52、65和78所示的氨基酸序列；(9)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:9、24和38所示的氨基酸序列；和/或所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:53、66和79所示的氨基酸序列；(10)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:10、25和39所示的氨基酸序列；和/或所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:48、61和80所示的氨基酸序列；(11)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:11、26和40所示的氨基酸序列；和/或所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:54、67和81所示的氨基酸序列；(12)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:12、27和41所示的氨基序列；和/或所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:53、66和82所示的氨基酸序列；(13)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:13、28和42所示的氨基酸序列；和/或所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:55、68和83所示的氨基酸序列；(14)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:14、29和43所示的氨基酸序列；和/或所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:56、69和84所示的氨基酸序列；或(15)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:15、18和44所示的氨基酸序列；和/
或所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:57、70和85所示的氨基酸序列。4.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其包括VL CDR1、VL CDR2、VLCDR3、VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3，其中(a)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:5、20和34所示的氨基酸序列；和(b)所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:49、62和75所示的氨基酸序列。5.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其包括VL CDR1、VL CDR2、VLCDR3、VH CDR1、VH CDR2及VH CDR3，其中(a)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:10、25和39所示的氨基酸序列；和(b)所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:48、61和80所示的氨基酸序列。6.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其包括VL CDR1、VL CDR2、VLCDR3、VH CDR1、VH CDR2及VH CDR3，其中(a)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:14、29和43所示的氨基酸序列；和(b)所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:56、69和84所示的氨基酸序列。7.一种特异性结合间皮素的抗体或其抗原结合片段，包括：(a)VL，其与选自由SEQ ID NO:86
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100所构成群组中的氨基酸序列具有至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％的序列同一性；和/或(b)VH，其与选自由SEQ ID NO:101
‑
115所构成群组中的氨基酸序列具有至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％的序列同一性。8.如权利要求7所述的抗体或抗原结合片段，其包括VL和VH，其中所述VL和VH分别具有(1)SEQ ID NO:86和101所示的氨基酸序列；(2)SEQ ID NO:87和102所示的氨基酸序列；(3)SEQ ID NO:88和103所示的氨基酸序列；(4)SEQ ID NO:89和104所示的氨基酸序列；(5)SEQ ID NO:90和105所示的氨基酸序列；(6)SEQ ID NO:91和106所示的氨基酸序列；(7)SEQ ID NO 92和107所示的氨基酸序列；(8)SEQ ID NO:93和108所示的氨基酸序列；(9)SEQ ID NO:94和109所示的氨基酸序列；(10)SEQ ID NO:95和110所示的氨基酸序列；(11)SEQ ID NO:96和111所示的氨基酸序列；(12)SEQ ID NO:97和112所示的氨基酸序列；(13)SEQ ID NO:98和113所示的氨基酸序列；(14)SEQ ID NO:99和114所示的氨基酸序列；或(15)SEQ ID NO:100和115所示的氨基酸序列。9.如权利要求7所述的抗体或抗原结合片段，其包括VL和VH，其中所述VL及VH分别具有SEQ ID NO:90和105所示的氨基酸序列。10.如权利要求7所述的抗体或抗原结合片段，其包括VL和VH，其中所述VL及VH分别具有SEQ ID NO:95和110所示的氨基酸序列。11.如权利要求7所述的抗体或抗原结合片段，其包括VL和VH，其中所述VL及VH分别具
有SEQ ID NO:99和114所示的氨基酸序列。12.一种特异性结合间皮素的抗体或其抗原结合片段，包括(a)VL，其包括VL CDR1、CDR2和CDR3，所述VL CDR1、CDR2和CDR3来源于具有选自由SEQ ID NO:86
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100组成的群组中的氨基酸序列的VL；和/或(b)VH，其包括VH CDR1、CDR2和CDR3，所述VH CDR1、CDR2和CDR3来源于具有选自由SEQ ID NO:101
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115组成的群组中的氨基酸序列的VH。13.如权利要求12所述的抗体或抗原结合片段，包括(1)包含VL CDR1、CDR2和CDR3的VL，所述VL CDR1、CDR2和CDR3来源于具有SEQ ID NO:86所示氨基酸序列的VL，和/或，包含VH CDR1、CDR2和CDR3的VH，所述VH CDR1、CDR2和CDR3来源于具有SEQ ID NO:101所示氨基酸序列的VH；(2)包含VL CDR1、CDR2和CDR3的VL，所述VL CDR1、CDR2和CDR3来源于具有SEQ ID NO:87所示氨基酸序列的VL，和/或，包含VH CDR1、CDR2和CDR3的VH，所述VH CDR1、CDR2和CDR3来源于具有SEQ ID NO:102所示氨基酸序列的VH；(3)包含VL CDR1、CDR2和CDR3的VL，所述VL CDR1、CDR2和CDR3来源于具有SEQ ID NO:88所示氨基酸序列的VL，和/或，包含VH CDR1、CDR2和CDR3的VH，所述VH CDR1、CDR2和CDR3来源于具有SEQ ID NO:103所示氨基酸序列的VH；(4)包含VL CDR1、CDR2和CDR3的VL，所述VL CDR1、CDR2和CDR3来源于具有SEQ ID NO:89所示氨基酸序列的VL，和/或，包含VH CDR1、CDR2和CDR3的VH，所述VH CDR1、CDR2和CDR3来源于具有SEQ ID NO:104所示氨基酸序列的VH；(5)包含VL CDR1、CDR2和CDR3的VL，所述VL CDR1、CDR2和CDR3来源于具有SEQ ID NO:90所示氨基酸序列的VL，和/或，包含VH CDR1、CDR2和CDR3的VH，所述VH CDR1、CDR2和CDR3来源于具有SEQ ID NO...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵阳兵，朱庚振，
申请(专利权)人：上海优替济生生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：