BCMA靶向抗体、嵌合抗原受体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了抗BCMA抗体和抗原结合片段、具有这些抗BCMA抗体和抗原结合片段的嵌合抗原受体(“CARs”)(“BCMA CARs”)以及具有这些BCMA CARs的基因工程改造的免疫效应细胞。本发明专利技术还提供了编码抗BCMA抗体和抗原结合片段，以及BCMA CAR的多核苷酸。本发明专利技术还提供了包含抗BCMA抗体和抗原结合片段，以及BCMA CAR的组合物。本发明专利技术还涉及所述抗BCMA抗体和抗原结合片段，以及具有这种BCMA CAR的基因工程改造的免疫效应细胞在癌症治疗中的用途。免疫效应细胞在癌症治疗中的用途。

【技术实现步骤摘要】
BCMA靶向抗体、嵌合抗原受体及其应用
1.

[0001]本专利技术涉及分子生物学、细胞生物学和免疫肿瘤学。具体地，本专利技术所提供的包括抗BCMA抗体、包含此抗BCMA抗体的嵌合抗原受体(“BCMA CARs”)、表达此BCMA CARs的基因工程免疫效应细胞，以及其在治疗肿瘤或癌症中的用途。
2.
技术介绍

[0002]B细胞成熟抗原(BCMA)是一种表达于成熟B淋巴细胞的跨膜糖蛋白。BCMA的表达与包括癌症和传染病的多种疾病有关。然而，目前针对BCMA的治疗，包括BCMA结合嵌合抗原受体(CARs)和表达此类CARs的细胞，仅取得有限的成功。因此，其他BCMA靶向治疗的选择代表了未满足的需求。本专利技术提供的组合物和方法满足这些需求并具有其他相关优势。
3.
技术实现思路

[0003]本专利技术提供的是能够特异性结合BCMA(例如人BCMA)的抗体或其抗原结合片段，包括：(a)轻链可变区(VL)，其包括轻链CDR1(VL CDR1)，轻链CDR2(VL CDR2)，和轻链CDR3(VL CDR3)，分别具有SEQ ID NO:8、18和28所示的氨基酸序列；或其变体，所述变体在VL CDRs中具有至多约5个氨基酸的替换、添加和/或缺失；和/或(b)重链可变区(VH)，包括重链CDR1(VH CDR1)，重链CDR2(VH CDR2)，和重链CDR3(VH CDR3)，分别具有SEQ ID NO:39、51和63所示的氨基酸序列；或其变体，所述变体在VH CDRs中具有至多约5个氨基酸的替换、添加和/或缺失。
[0004]在一些实施方案中，本专利技术提供的抗体和抗原结合片段包括VL CDR1、VL CDR2、VL CDR3、VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3，其中(a)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:8、18和28所示的氨基酸序列；和(b)所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:39、51和63的氨基酸序列。
[0005]本专利技术提供的抗体或其抗原结合片段能够特异性结合BCMA(例如人BCMA)，其包括：(a)与由SEQ ID NO:75所示的氨基酸序列具有至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的VL；和/或(b)与由SEQ ID NO:87所示的氨基酸序列具有至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的VH。
[0006]在一些实施方案中，本专利技术提供的抗体和抗原结合片段包括VL和VH，其中所述VL和VH分别具有SEQ ID NO:75和87所示的氨基酸序列。
[0007]本专利技术提供的特异性结合BCMA(例如人BCMA)的抗体或其抗原结合片段，包括(a)包含VL CDR1、CDR2和CDR3的VL，所述VL CDR1、CDR2和CDR3来源于具有SEQ ID NO:75所示氨基酸序列的VL，和/或，(b)包含VH CDR1、CDR2和CDR3的VH，所述VH CDR1、CDR2和CDR3来源于具有SEQ ID NO:87所示氨基酸序列的VH。
[0008]在一些实施方案中，本专利技术提供抗体或抗原结合片段与本专利技术所描述的抗体或抗原结合片段竞争以结合BCMA。
[0009]在一些实施方案中，本专利技术提供的抗体或抗原结合片段为单克隆抗体或抗原结合
片段。在一些实施方案中，本专利技术提供的抗体或抗原结合片段为双特异性或多特异性抗体。在一些实施方案中，本专利技术提供的抗体为双特异性T细胞接合子(BiTE)。在一些实施方案中，本专利技术提供的抗体选自由IgG1抗体、IgG2抗体、IgG3抗体和IgG4抗体组成的群组。在一些实施方案中，本专利技术提供的抗体或抗原结合片段选自由Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、scFv、(scFv)2、单域抗体(sdAb)和重链抗体(HCAb)组成的群组。在一些实施方案中，本专利技术提供的抗体或抗原结合片段为scFv。
[0010]在一些实施方案中，本专利技术提供的抗体或抗原结合片段为嵌合抗体或抗原结合片段、人源化抗体或抗原结合片段、或人抗体或抗原结合片段。在一些实施方案中，本专利技术提供的抗体或抗原结合片段为人抗体或抗原结合片段。
[0011]本专利技术还提供了编码本专利技术所述抗体或抗原结合片段的多核苷酸。在一些实施方案中，所述多核苷酸为信使RNA(mRNA)。在一些实施方案中，本专利技术提供了包含本专利技术所述多核苷酸的载体。在一些实施方案中，本专利技术提供了包含本专利技术所述多核苷酸或本专利技术所述载体的宿主细胞。
[0012]本专利技术还提供了特异性结合BCMA的嵌合抗原受体(CAR)，从N
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端到C
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端包括：(a)包含本专利技术所述抗体或抗原结合片段的BCMA结合结构域；(b)跨膜结构域；和(c)胞质结构域。在一些实施方案中，所述跨膜结构域来源于CD8、CD28、CD3ζ、CD4、4
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1BB、OX40、ICOS、CTLA
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4、PD
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1、LAG
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3、2B4、BTLA、TCRα链、TCRβ链、或TCRζ链、CD3ε、CD45、CD5、CD8、CD9、CD16、CD22、CD33、CD37、CD64、CD80、CD86、CD134或CD154。
[0013]在本专利技术提供的CAR的一些实施方案中，所述跨膜结构域包括CD8跨膜区或CD28跨膜区。在一些实施方案中，所述胞质结构域包括来源于CD3ζ、FcRγ、FcγRIIa、FcRβ、CD3γ、CD3δ、CD3ε、CD5、CD22、CD79a、CD79b、DAP10、DAP12或其任何组合的信号传导结构域。在一些实施方案中，所述胞质结构域还包括来源于CD28、4
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1BB(CD137)、OX40、ICOS、DAP10、2B4、CD27、CD30、CD40、CD2、CD7、LIGHT、GITR、TLR、DR3、CD43，或其任何组合的共刺激结构域，在一些实施方案中，所述胞质结构域包括CD3ζ信号传导结构域和4
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1BB共刺激结构域。在一些实施方案中，所述胞质结构域包括CD3ζ信号传导结构域和CD28共刺激结构域。
[0014]在一些实施方案中，本专利技术提供的CAR进一步包括CD8铰链，所述CD8铰链位于所述抗体或抗原结合片段与跨膜结构域之间。
[0015]在一些实施方案中，本专利技术提供的特异性结合BCMA的CAR包括由SEQ ID NO:138所示的氨基酸序列。
[0016]本专利技术还提供了编码本专利技术所述CAR的多核苷酸。在一些实施方案中，所述多核苷酸为mRNA。本专利技术还提供了包含本专利技术所述多核苷酸的载体或本专利技术所述载体。
[0017]在一些实施方案中，本专利技术提供的细胞为免疫效应细胞。在一些实施方案中，所述细胞来源于从外周血或骨髓分离的细胞。在一些实施方案中，所述细胞来源于由干细胞或祖细胞体外分化而来的细胞，所述干细胞或祖细胞选自由T细胞祖细胞、造血干/祖细胞、造血多本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种特异性结合BCMA的抗体或其抗原结合片段，包括：(a)轻链可变区(VL)，其包括轻链CDR1(VL CDR1)，轻链CDR2(VL CDR2),和轻链CDR3(VL CDR3)，分别具有SEQ ID NO:8、18和28所示的氨基酸序列；或其变体，所述变体在VL CDR中具有至多约5个氨基酸的替换、添加和/或缺失；和/或(b)重链可变区(VH)，其包括重链CDR1(VH CDR1)，重链CDR2(VH CDR2)，和重链CDR3(VH CDR3)，分别具有SEQ ID NO:39、51和63所示的氨基酸序列；或其变体，所述变体在VH CDR中具有至多约5个氨基酸的替换、添加和/或缺失。2.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其包括VL CDR1、VL CDR2、VL CDR3、VH CDR1、VH CDR2及VH CDR3，其中(a)所述VL CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:8、18和28所示的氨基酸序列；和(b)所述VH CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO:39、51和63所示的氨基酸序列。3.一种特异性结合BCMA的抗体或其抗原结合片段，包括：(a)VL，其与SEQ ID NO:75所示的氨基酸序列具有至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％的序列同一性；和/或(b)VH，其与SEQ ID NO:87所示的氨基酸序列具有至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％的序列同一性。4.如权利要求3所述的抗体或抗原结合片段，其包括VL和VH，其中所述VL和VH分别具有SEQ ID NO:75和87所示的氨基酸序列。5.一种特异性结合BCMA的抗体或其抗原结合片段，包括(a)VL，其包括VL CDR1、CDR2和CDR3，所述VL CDR1、CDR2和CDR3来源于具有SEQ ID NO:75所示的氨基酸序列的VL；和/或(b)VH，其包括VH CDR1、CDR2和CDR3，所述VH CDR1、CDR2和CDR3来源于具有SEQ ID NO:87所示的氨基酸序列的VH。6.一种抗体或其抗原结合片段，其与权利要求1所述的抗体或抗原结合片段竞争结合BCMA。7.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其为单克隆抗体或抗原结合片段。8.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其为双特异性抗体或多特异性抗体。9.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其为双特异性T细胞接合子(BiTE)。10.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其选自由IgG1抗体、IgG2抗体、IgG3抗体和IgG4抗体所组成的群组。11.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其选自由Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、scFv、(scFv)2、单域抗体(sdAb)和重链抗体(HCAb)组成的群组。12.如权利要求11所述的抗体，其为scFv。13.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其为嵌合抗体或抗原结合片段、人源化抗体或抗原结合片段，或，人抗体或抗原结合片段。14.如权利要求13所述的抗体或抗原结合片段，其为人抗体或抗原结合片段。15.一种多核苷酸，其编码如权利要求1～14任一项所述的抗体或抗原结合片段。16.如权利要求15所述的多核苷酸，其为信使RNA(mRNA)。17.一种载体，其包含如权利要求15所述的多核苷酸。18.一种宿主细胞，其包含如权利要求15所述的多核苷酸。
19.一种特异性结合BCMA的嵌合抗原受体(CAR)，其从N端到C端包含：(a)BCMA结合结构域，其包含如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段；(b)跨膜结构域；和(c)胞质结构域。20.如权利要求19所述的CAR，其中所述跨膜结构域来源于CD...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵阳兵，潘伟，
申请(专利权)人：上海优替济生生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：